第四章

一、填空题 1、遗传密码的 是由于mRNA上的密码子与tRNA上的反密码子不一定严格配对。 2、核糖体上可区分出五个功能活性位点，其中A位点主要在 50S亚基 上，而P位点主要在 50S亚基 上。

3、至少含有 42 个核苷酸的mRNA（不包括上游的非编码序列）才能编码含有13个氨基酸的多肽。

4、tRNA的二级结构为 三叶草 形，三级结构为 倒L 形。

5、原核生物蛋白质合成的起始tRNA是 甲酰甲硫氨酰-tRNA 携带的氨基酸是 甲酰甲硫氨酸 ，而真核生物蛋白质合成的起始tRNA是 甲硫氨酰-tRNA ，它携带的氨基酸是 甲硫氨酸 。

6、真核生物中rRNA包括 18SrRNA ， 28SrRNA ， 5.8SrRNA ， 5SrRNA 。 7、各类核糖核酸中，稀有碱基含量比例（%）最高的是 。 8、新生肽链每增加一个氨基酸单位都要经过 进位 ， 肽键形成 和 移位 三步反应。 9、与mRNA密码子ACG相对应的tRNA的反密码子是 CGU ，tRNA的反密码子为UGC，它识别的密码子为 GCA 。

10、一种氨基酸最多可以有 6 个密码子，一个密码子最多决定 1 种氨基酸。

11、多肽合成的起始密码子是 AUG ，而 UAA ， UAG 和 UGA 是终止密码子。 12、tRNA分子有 氨基酸臂 ， TΨC环 ， 反密码子环 、可变环和尿嘧啶环 等五个主要结构。

二、选择题

1． 多数氨基酸都有两个以上密码子，下列哪组氨基酸只有一个密码子？（ CD ）

A．苏氨酸、甘氨酸 B．脯氨酸、精氨酸 C．丝氨酸、亮氨酸 D．色氨酸、甲硫氨酸 E．天冬氨酸和天冬酰胺 2．tRNA分子上结合氨基酸的序列是（ B ）

A．CAA-3′ B．CCA-3′ C．AAC-3′ D．ACA-3′ E．AAC-3′ 3．遗传密码（C）

A．20种氨基酸共有64个密码子 B．碱基缺失、插入可致框移突变

C．AUG是起始密码 D．UUU是终止密码 E．一个氨基酸可有多达6个密码子 4、tRNA能够成为氨基酸的转运体、是因为其分子上有 (A)

A．-CCA-OH 3′末端 B．3个核苷酸为一组的结构 C．稀有碱基 D．反密码环 E．假腺嘌吟环

5、蛋白质生物合成中的终止密码是（A）。

（A）UAA （B）UAU （C）UAC （D）UAG （E）UGA 6、Shine-Dalgarno顺序(SD-顺序)是指:（ AA）

A.在mRNA分子的起始码上游8-13个核苷酸处的顺序 B.在DNA分子上转录起始点前8-13个核苷酸处的顺序

C.16srRNA3?端富含嘧啶的互补顺序 D.启动基因的顺序特征 7、“同工tRNA”是：（A）

(A)识别同义mRNA密码子(具有第三碱基简并性)的多个tRNA (B)识别相同密码子的多个tRNA (C)代表相同氨基酸的多个tRNA

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(D)由相同的氨酰tRNA合成酶识别的多个tRNA

8、反密码子中哪个碱基对参与了密码子的简并性(摇摆)。（ A ） （A）第一个 (B)第二个 (C)第二个 (D) 第一个与第二个 9、与mRNA的GCU密码子对应的tRNA的反密码子是（ B ） （A）CGA （B）IGC （C）CIG （D）CGI 10、真核与原核细胞蛋白质合成的相同点是（C） （A）翻译与转录偶联进行 （B）模板都是多顺反子

（C） 都需要GTP （D）甲酰蛋氨酸是第一个氨基酸

三、名词解释

单顺反子：只编码一条多肽链的mRNA。 多顺反子：编码多条多肽链的顺反子

简并密码子：三联体第三位碱基不同而编码同一种氨基酸的遗传密码

SD序列：原核生物mRNA起始密码子上游8~13个核甘酸处的一段富含嘌呤的保守序列，该序列由Shine和Dalgarno发现而得名，其可与核糖体小亚基中的16SrRNA的3ˊ端序列进行碱基配对，它的功能是相对于起始密码子而正确定位核糖体。 开放阅读框（ORF）：是指DNA或RNA分子中一组连续的不重叠的密码子（不包含终止密码子），观察DNA序列，可以辨认起始于ATG，终止于TGA、TAA、或TAG的连续的密码子区域，是有可能编码蛋白质的DNA序列。

四、问答题

1、原核生物蛋白质的合成可分为哪些阶段？简述各阶段的主要事件。

答：原核生物的蛋白质合成分为四个阶段：氨基酸的活化、肽链合成的起始、延伸和终止。 ①氨基酸的活化：游离的氨基酸必须经过活化以获得能量，才能参与蛋白质的合成，活化反应由氨酰tRNA合成酶催化，最终氨基酸连接在tRNA3ˊ端AMP的3ˊ-OH上，合成氨酰-tRNA。

②肽链合成的起始：首先IF1和IF3与30S亚基结合，以阻止大亚基的结合；接着，IF2和GTP与小亚基结合，以利于随后的起始tRNA的结合；形成的小亚基复合物经由核糖体结合点附着在mRNA上，起始tRNA和AUG起始密码子配对并释放IF3，并形成30S起始复合物。大亚基与30S起始复合物结合，替换IF1和IF2+GDP，形成70S起始复合物。这样在mRNA正确部位组装成完整的核糖体。

③肽链的延伸：延伸分三步进行，进位：负载tRNA与EF-Tu和GTP形成的复合物被运送至核糖体，GTP水解，EF-Tu GDP释放出来，在EF-Ts和GTP的作用下，EF-Tu GDP可以再次利用。转肽：肽酰转移酶将相邻的两个氨基酸相连形成肽键，该过程不需要能量的输入。移位：移位酶（EF-G）利用GTP水解释放的能量，使核糖体沿mRNA移动一个密码子，释放出空载的tRNA并将新生肽链运至P位点。

④肽链的终止与释放：释放因子（RF1或RP2）识别终止密码子，并在RP3的作用下，促使肽酰转移酶在肽链上加上一个水分子并释放肽链。核糖体释放因子有助于核糖体亚基从mRNA上解离。

2、简述遗传密码破译的方法。

答：①以均聚物、随机共聚物和特定序列的共聚物为模板指导多肽的合成

制备大肠杆菌的无细菌合成体系，在含有DNA、mRNA、tRNA、核糖体、AA-tRNA合成酶及其他酶类的抽提物中加入DNase，降解体系中的DNA，耗尽mRNA时，体系中的

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蛋白质合成停止，当补充外源mRNA或人工合成的各种均聚物或共聚物作为模板以及ATP、GTP、氨基酸等成分时又能合成新的肽链，新生肽链的氨基酸顺序由外加的模板所决定。因此，分析比较加入的模板和合成的肽链即可推知编码某些氨基酸的密码。

②核糖体结合技术

以人工合成的三核甘酸如UUU、UCU、UGU等为模板、在含核糖体、AA-tRNA的适当离子强度的反应液中保温，然后使反应液通过硝酸纤维素滤膜。游离的AA-tRNA因相对分子质量小而能自由通过滤膜，加入三核苷酸模板可以促使其对应的AA-tRNA结合到核糖体上，体积超过膜上的微孔而被滞留，这样就能把已结合到核糖体的AA-tRNA与未结合的AA-tRNA分开。

第五章

名词解释

蛋白质工程：应用重组DNA技术设计并构建具有新性质的蛋白质或酶的实验技术。该技术是将随机性单个部位改变引入结构基因以生成突变体基因，再将其与启动子偶联以指导发生特定改变的蛋白质的合成，随后分析蛋白质的结构和功能特征并与预期的特征进行比较。蛋白质的设计可辅以计算机绘图技术及其他先进的分子模式技术。

分子克隆：指遗传信息的分子操作和精密施工，即按人们的需求，将一种生物的基因或化学合成的基因与适合的载体DNA分子连接，构成重组DNA分子，然后将其导入受体细胞中复制扩增，从而获得该基因片段的大量拷贝。 酵母双杂交系统：以酵母的遗传分析为基础研究反式作用因子之间相互作用对真核基因转录调控影响的实验系统，用于鉴定蛋白质之间的相互作用。

聚合酶链式反应 ：在体外将DNA靶序列的拷贝数大量扩增的技术，其基本过程包括变性、复性以及DNA聚合酶指导下的链的延伸三个阶段的反复循环。 RACE技术：在已知cDNA序列的基础上克隆5ˊ端或3ˊ端缺失序列的技术，用于对RNA分子末端作图

原位杂交技术（ISH）：用标记核酸探针，经放射自显影或非放射检测体系，在组织、细胞、间期核及染色体上对核酸进行定位和相对定量研究的一种手段，通常可分为RNA原位杂交和染色体原位杂交两大类。

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第七章

一、填空题

1．基因表达调控主要表现在两个方面： 转录水平的调控 和 转录后水平的调控 。其中，后者又包括mRNA加工成熟水平上的调控和 翻译水平上的调控 。

2.不同生物使用不同的信号来指挥基因调控。原核生物中， 营养状况 和 环境因素对基因表达起着举足轻重的影响。在高等真核生物中，__激素水平_ 和____发育阶段__是基因表达调控的最主要手段。

3.原核生物的基因调控主要发生在转录水平上，根据调控机制的不同可分为_负转录调控__和_正转录调控_。在第一种调控体系中，调控基因的产物是___阻遏蛋白___。根据其作用特征又可分为___负控诱导__和__负控阻遏___两大类。在第二种调控系统中，调控基因的产物是__激活蛋白___。根据其作用性质可分为__正控诱导___和__正控阻遏__系统。

4.大肠杆菌乳糖操纵子包括三个结构基因：__lacZ__、lacY和lacA，以及__启动子_、操纵基因和__阻遏子_。

5.对于大肠杆菌乳糖操纵子而言，乳糖并不与阻遏物相结合，真正的诱导物是乳糖的异构体__异构乳糖__，而后者是在β-半乳糖苷酶的催化下由乳糖形成的。

6.在大肠杆菌中，cAMP的浓度受到葡萄糖代谢的调节。如果将细菌放在缺乏碳源的培养基中培养，细胞内cAMP浓度就高；如果在含葡萄糖的培养基中培养，cAMP的浓度就__低__；如果培养基中只有甘油或乳糖等不进行糖酵解途径的碳源，cAMP的浓度会_很高_。

7.在大肠杆菌色氨酸操纵子系统中，效应物分子为___色氨酸_。trpR基因突变常引起trp mRNA的组成型合成，该基因产物因此被称为__辅阻遏蛋白_。它与_色氨酸__相结合形成有活性的阻遏物，与操纵区结合并关闭trp mRNA转录。

8.大肠杆菌中，色氨酸操纵子的转录调控除了阻遏系统外，还有___弱化系统__。

9.色氨酸操纵子的弱化机制主要涉及__茎-环__的结构，它是一段可以通过自我配对形成的__弱化子__mRNA区域，有典型的终止子特点。前导区的碱基序列以不同的方式进行碱基配对，在前导肽基因中有两个相邻的__色氨酸__密码子，所以前导肽的翻译对_色氨酸-tRNA__的浓度敏感，弱化子对RNA聚合酶的影响依赖于前导肽中__核糖体__所处的位置，实现对转录过程的调节。

二、选择题

1. 原核生物的基因调控主要发生在（A ）。

A．转录水平 B. 转译水平 C. 转录后水平 D. 转译后水平 2.操纵子一般是有（ B ）组成的。

A．结构基因、启动子和调节基因 B. 操纵基因、结构基因和启动子

C. 操纵基因、结构基因和增强子 D. 操纵基因、启动子、结构基因和调节基因 3.强化基因转录的元件是（ C ）。

A．密码子 B. 复制子 C. 启动子 D. 内含子 E. 外显子 4. 以下关于大肠杆菌基因调控的说法错误的是（ B ）。 A．几个结构基因往往连在一起，共同受调控序列的调控

B. 在大肠杆菌中，如果调节基因突变造成阻遏物缺乏，那么乳糖分解代谢的三种酶就不能合成

C. 大肠杆菌乳糖代谢的调控主要是对转录水平的调控

D. 在大肠杆菌中，如果控制乳糖代谢启动子发生了突变，转录便不能进行

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