（2）向另一烧瓶加入1ml水作空白对照；

在每个烧瓶内加入硫酸钾—硫酸铜混合物（克氏催化剂）少许，浓硫酸10ml，小瓷片两粒，摇匀；

（3）将烧瓶约60度角固定在铁架上，每个瓶口放一小漏斗，在通风厨内的电炉上消化；

（4）在消化开始时，应控制火力，不要使液体冲到瓶颈； （5）待瓶内水汽蒸完，硫酸开始分解并放出SO2白烟后，适当加强火力，继续消化，直至消化液呈透明绿色为止；

（6）消化完毕，待烧瓶内容物冷却后，加蒸馏水10ml（注意慢加，边加边摇）；

（7）冷却后将瓶中内容物转入100ml的容量瓶中，并用蒸馏水洗烧瓶数次，溶液一并倒入容量瓶，最后定容至刻度摇匀，做上记号备用。

2.蒸馏

（1）蒸馏器洗净后，开放水龙头P3，使水进入A室，水放至A室球部2/3处即可。

（2）取3个50ml的锥形瓶，分别加入10ml硼酸（内加有混合指示剂）。用表面皿复盖备用。

（3）加样

① 用移液管吸取2ml消化液，小心地由漏斗D倾入B室； ② 取一个盛有硼酸的锥形瓶，置于M管下，使管口恰好接触

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硼酸溶液，用量筒从漏斗D加入30%氢氧化钠5ml，随即将P4夹紧，并往漏斗加入少量蒸馏水封闭。

（4）蒸馏

① 用酒精灯加热，维持火力恒定，沸腾不可高于Y管口以免A室溶液从Y管倒吸，待第一滴蒸馏液从冷凝柱F顶端滴下时起，继续蒸馏5分钟；

② 然后将锥形瓶放低，使导管离开液面再蒸2分钟，最后用蒸馏水洗导管外壁，蒸馏完毕，取下锥形瓶准备滴定。

（5）空白蒸馏

① 用移液管分别吸取2ml蒸馏水按上述操作步骤进行蒸馏。 仪器的洗涤： 3.滴定

（1）蒸馏完毕，用微量酸式滴定管，以0.01mol/L 盐酸标准溶

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液进行滴定锥瓶内溶液，溶液由蓝绿色变为淡紫色或灰色，即为终点。

（2）记录所用盐酸的量。 4.计算

（A?B）?0.0100?14样品的总氮含量（克氮％）??100C?1000

若测定的样品含氮量部分只是蛋白质则：

（A?B）?0.0100?14?6.25样品的总蛋白含量（克蛋白％）??100C?1000

式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数； B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；

C为称量样品的克数：0.0100为盐酸的当量浓度（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；

14为氮的原子量；6.25为常数（1毫升0.1N盐酸相当于0.14毫克氮）。

五、实验结果

序号 称量样品(g） 滴定样品用去的盐酸（ml） 滴定空白用去的盐酸（ml） 1 2 1 1 15.2 15.4 0.12 7

15.2?15.4滴定样品用去盐酸平均值?2

?15.（3ml）（A?B）?0.0200?14样品的总氮含量（克氮％）??100C?1000

?0.43％若测定的样品含氮量部分只是蛋白质，则：

（A?B）?0.0200?14?6.25样品的总蛋白含量（克蛋白％）??100、C?1000?2.66％

式中：A为滴定样品用去的盐酸平均毫升数； B为滴定空白用去的盐酸平均毫升数；

C为称量样品的克数：0.0100为盐酸的当量浓度（实际上，此项应按实验中使用盐酸的实际浓度填写）；

14为氮的原子量；6.25为常数（1毫升0.1N盐酸相当于0.14毫克氮）。

六、注意事项

1.本法适用于0.05-3.0mg氮，样品中含氮量过高时，则应减少取样量或将样液稀释。

2.勿使样品粘于烧瓶颈部。放置液体样品时，需将吸管插至烧瓶底部再放样：如固体样品，可将样品卷在纸内，平插入烧瓶底部，然后再将烧瓶直起，纸卷内的样品即完全放在烧瓶底部。

3.蒸馏完毕，先将蒸馏出口离开液面，继续蒸馏1min，将附着

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