西安市中心医院 输血科 聚凝胺技术交叉配血SOP 文件编号:A6 执行日期:2006-01-01 编辑版本:第2版 聚凝胺技术交叉配血标准操作规程
1.目的 进一步验证受血者与供血者血型鉴定是否正确,以防止受血 者与供血者相互之间血型不合,保证输血安全。 2.适用范围 配血室,发血室,血型血清学实验室。
3.职责 具有初级以上职称(检验),在血型鉴定和交叉配血工作岗位的工作人员有权执行本规程。出现交叉配血鉴定结果本人无法判定,不能发出实验结果时,应当向上一级职称的检验人员或直接向本部门负责人报告并寻求技术上指导和帮助。
4.监督 交叉配血审核者及实验室负责人监督工作人员是否遵从此项规程 5.材料
(1)聚凝胺介质试剂(BASO-Polymatching) 套组内容:低离子溶
液(Low lonic Medium),聚凝胺溶液(Polybrene Reagent),悬浮液(Rensuspending)
生产许可证:粤食药监械生产许20010407号 生产编号:BA-1002
产品注册号:国食药监械(准)字2004第3400397号 执行标准号:YZB/国 1592-2003 (2)受血者血样 (3)供血者血样
(4)经过校准的台式离心机 6.原理
红细胞表面带有大量负电荷,以避免其产生自发性凝集,当红细胞悬浮在电解质时,阳离子会被红细胞的负电荷所吸引,此时红细胞则被扩散的双层离子云所包绕,而形成Zata电位,Zata电位决定红细胞之间的排斥作用。
聚凝胺技术首先利用低离子溶液(LIM)降低介质的离子强度,减少红细胞周围的阳离子云,以促进红细胞和血清(血浆)中的抗体结合。其后,加入聚凝胺(Polybrene)溶液,它是一种高价阳离子多聚物、肝素中和剂,溶解后能产生很多正电荷,可以中和红细胞表面带有的负电荷,使红细胞的Zata电位降低,缩短红细胞之间的距离,是红细胞产生非特异性的凝集。最后,加入悬浮液(Rensuspending),悬浮液具有中和聚凝胺(Polybrene)的作用,使正常红细胞的非特异性凝集散开,实验结果为阴性;但如果红细胞被相应的抗体致敏,则会被聚凝胺凝结,凝集就不会散开,实验结果为阳性。 7.程序
(1)取试管2支,标主次侧,主侧管加病人血清(血浆)2滴 ,加
供血者3%-5%红细胞悬液(洗涤或不洗涤均可)1滴,次侧管反之。
(2)各加LIM0.7ml混合均匀后,再各加Polybrene溶液2滴,并混
合均匀。
(3)用BASO血库专用离心机1000g离心力,离心10秒(若用普
通离心机,离心条件为:3400rpm,离心10秒)然后把上清夜倒掉,不要沥干,让管底残留约0.1ml液体。
(4)轻轻摇动试管,目测红细胞有无凝集,如无凝集,则必须重做。 (5)最后加Rensuspending2滴,轻轻摇动试管混合并同时观察结果
如果在30秒~1分钟内凝集散开,代表是由Polybrene引起的非特异性凝集,配血结果相合;如凝集不散开,则为红细胞抗原抗体结合的特异性反应,配血结果不相合。如反应可疑,可进一步倒在玻片上用显微镜观察。
8.结果发出 根据实验结果,填写实验记录、报告单,审核无误后, 发出报告单。 9.注意事项
(1)用EDTA之血浆代替血清使用。
(2)病人血清(血浆)含肝素,如洗肾患者,须多加4~6滴Polybrene
溶液以中和肝素。
(3)若试剂使用前为低温贮存,请回复室温再行操作。
(4)在冬天室温极低的情况下,操作交叉配血试验,某些病人血清
中可能含有冷凝集素等因素,而导致假阳性结果的出现。若有 此怀疑,建议在最后滴入Rensuspending时,将试管立即置入 37℃水浴中,轻轻摇动试管混合,并在30秒内观察结果。 (5)BASO血库专用离心机1000g离心力相当于3000rpm。上文所
指的普通离心机一般为80型离心机,其相当离心力所对应转速
为
3400rpm。 10.参考文献:
(1)人民卫生出版社 2003年7月(第一版) 高峰主编:输血与输血技术
(2)人民卫生出版社 2003年6月(第二版) 罗春丽主编:检验基础 (3)科学出版社 1999年11月(第一版) 孙连明等主编:临床输血手册 (4)聚凝胺介质试剂说明书
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