(1)平板法:
①取洁净玻片3块,用蜡笔分别在玻片左右两上角标明Ac、
Bc、Oc等字样及受检者姓名或编号。
②在标记Ac、Bc、Oc格内加5%标准A型、B型、O型红细胞
悬液各一滴,再加受检者血清一滴于各小格内。
③用竹签(或洁净小试管底部)分别混合小格内容物,不时转
动玻片促进凝集反应的发生,10分钟后肉眼及显微镜观察结果。
(2)试管法:
分离血清 将待检血液以2500r/min离心3分钟,分离血清。 标记并加被检者血清 取小试管3支,分别标记A、B、O字
样,于各管加入被检者血清1滴。
加标准红细胞 按标记分别加入5%的A、B、O型标准红细胞
生理盐水悬液1滴,混匀,立即以1000r/min 离心1分钟。
观察结果 先观察上层液有无溶血现象,再斜持试管轻轻摇
动或轻轻弹动肉眼观察有无凝集,在低倍镜观察。
判断结果 凝集结果判断标准同正定型法。
8.结果发出 根据实验结果,填写实验记录、血型鉴定报告单,审核
无误后,发出报告单。
9.注意事项
(1)标准红细胞用3名健康人同型新鲜红细胞混合,用生理盐水洗
涤3次,以除去存在血清中的抗体及可溶性抗原。
(2)观察结果时,若试管中出现溶血现象,表明存在抗原抗体反应
并有补体激活,应视为凝集。
(3)先天性免疫球蛋白缺陷,长期大量应用免疫抑制剂,血型抗体
可减弱或消失,造成反定型困难。
(4)血清中存在自身免疫性抗体、冷凝集素效价增高、多发性骨髓
瘤、免疫球蛋白异常均可造成反定型困难。
(5)由于新生儿体内可存在母亲输送的血型抗体,而且自身血型抗
体效价又低因而出生6个月以内的婴儿不宜做反定型。 (6)其他与正定型相同。 10.ABO血型鉴定的临床意义
输血 血型鉴定是实施输血治疗的首要步骤,应该在受血者与供血
者血型相同,交叉配血完全相合的条件下才能输血。 器官移植 受者与供者必须ABO血型相符才能移植,血型不符极易
引起排斥反应导致移植失败。
新生儿溶血 母子ABO血型不合可引起新生儿溶血病,主要是依靠
血型血清学检查来诊断。
其他 ABO血型检查还用于亲缘鉴定,法医学鉴定以及某些疾病相
关的调查等。 12.参考文献
(1)人民卫生出版社 2003年7月(第一版) 高峰主编:输血与输血技术
(2)人民卫生出版社 2003年6月(第二版) 罗春丽主编:检验基础 (3)科学出版社 1999年11月(第一版) 孙连明等主编:临床输血手册
授权人签字 姓名 日期
操作人员 部门负责人 质量负责人
西安市中心医院 输血科 Rh血型鉴定/抗D鉴定SOP 文件编号:A3 执行日期:2006-01-01 编辑版本:第2版 Rh血型鉴定/抗D鉴定标准操作规程
1.目的 规范RhD鉴定实验,确保RhD血型鉴定结果的准确。 2.适用范围 发血室,血型血清学实验室。
3.职责 具有初级以上职称(检验),在血型鉴定和交叉配血工作岗位的工作人员有权执行本规程。出现血型鉴定结果本人无法判定,不能发出实验结果时,应当向上一级职称的检验人员或直接向本部门负责人报告并寻求技术上指导和帮助。
4.监督 交叉配血试验审核者及实验室负责人监督工作人员是否遵从此项规程。 5.材料
(1)RhD(IgM)血型定型试剂(单克隆抗体) 规格:10ml/支
保存:于2-8℃避光保存,有效期内使用
效价:抗D(IgM)≥1∶64(ccDee O型) 有效期:自成品鉴定合格之日起2年。 批准文号:10ml/支,国药准字S20060018 厂商:上海血液生物有限责任公司 (2)受检者3%-5%红细胞悬液 (3)经过校准的台式离心机
6.原理 根据RhD(IgM)类特异性血型抗体与红细胞上特异性抗原结