3.3.2苯甲酸含量的测定：准确吸取1mg/mL的苯甲酸标准储备液10mL，在100mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为100ug/mL）。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液，在100mL容量瓶中定容（浓度分别为0、1、2、4、6、8、10ug/mL）。准确移取10mL苯甲酸未知液，在100mL容量瓶中定容，于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

3.3.3糖精钠含量的测定：准确吸取1mg/mL的糖精钠标准储备液10mL，在100mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为100ug/mL）。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液，在50mL容量瓶中定容（浓度分别为0、2、4、8、12、16、20ug/mL）。准确移取10mL糖精钠未知液，在50mL容量瓶中定容，于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

3.3.4水杨酸含量的测定：准确吸取1mg/mL的水杨酸标准储备液10mL，在100mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为100ug/mL）。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液，在50mL容量瓶中定容（浓度分别为0、2、4、8、12、16、20ug/mL）。准确移取10mL水杨酸未知液，在50mL容量瓶中定容，于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

3.3.5硝酸盐氮含量的测定：准确吸取1mg/mL的硝酸盐氮标准储备液10mL，在100mL容量瓶中定容（此溶液的浓度为100ug/mL）。再分别准确移取0、1、2、4、6、8、10mL上述溶液，在100mL容量瓶中定容（浓度分别为0、1、2、4、6、8、10ug/mL）。准确移取10mL硝酸盐氮未知液，在100mL容量瓶中定容，于最大吸收波长处分别测定以上溶液的吸光度。然后以浓度为横坐标，以相应的吸光度为纵坐标绘制标准曲线。从标准曲线上查得未知液的浓度。

4.结果计算

根据未知液的稀释倍数，可求出未知溶液的浓度。附图1

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维生素C吸收曲线(10ug/mL)1.41.21吸光度0.80.60.40.20200205210215220225230235240245250255260265270275280285290295300305310315320325330335340345350波长

附图2

糖精钠吸收曲线(10ug/mL)1.41.21吸光度0.80.60.40.20200205210215220225230235240245250255260265270275280285290295300305310315320325330335340345350波长

附图3

苯甲酸吸收曲线(10ug/mL)1.6001.4001.200吸光度1.0000.8000.6000.4000.2000.000200205210215220225230235240245250255260265270275280285290295300305310315320325330335340345350波长

附图4

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水杨酸吸收曲线(10ug/mL)2.0001.8001.6001.400吸光度1.2001.0000.8000.6000.4000.2000.000200205210215220225230235240245250255260265270275280285290295300305310315320325330335340345350波长

附图5

硝酸盐氮吸收曲线(10ug/mL)2.0001.6001.2000.8000.4000.000200205210215220225230235240245250255260265270275280285290295300305310315320325330335340345350波长吸光度

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邻菲罗啉分光光度法测定铁

一、实验内容：

1. 吸收曲线的制作。 2. 标准曲线的制作。

3. 未知水样的铁含量的测定。

二、准备工作

1、722S型分光光度计20台（二人一台）。

2、通知仪器室准备20套仪器：

(1) 50ml容量瓶7只。 (2）1ml刻度吸管1支。 (3）吸球1只。 (4）洗瓶1只。

(5）400ml烧杯（废液杯）1只。 3. 准备好公用仪器：

(l）1ml刻度吸管（发样品用）1支。 (2）100ml小烧杯（发标准Fe3+）20只。

(3）自动加液器二套（6只），盛放HAc－NaAc缓冲溶液，1％盐酸羟胺及0.1％邻菲罗啉。 4. 试剂：

（1）100μg／mlFe3+标准溶液：准确称取1.9gNH4Fe(SO4)2·12H2O于100ml烧杯中，加入1：1HCl20ml及少量水，溶解后，转移到1L容量瓶中，用水稀释到刻度、摇匀。 （2）0.10％邻菲罗啉水溶液：将0.100g邻菲罗啉溶于加有2～3滴浓HCl的蒸馏水100ml中，贮于棕色瓶内。

（3）HAc－NaAc缓冲溶液：取12.9mlC.P.级HAc及34gC.P.级NaAc·3H2O溶于水中，稀释至1000ml。

（4）1％盐酸羟胺水溶液：取1g盐酸羟胺溶于水中，稀释至100ml。 5. 未知样品

不另配制，直接将标准Fe3+液发于同学交上来的容量瓶中，发放体积应介于0.2～1.0ml间，可为0.3，0.5，0.7，0.9ml。未知样品体积以1ml计。

三、提问内容：

1. 在本实验中，那些试剂加入量要比较准确，哪些试剂则可不必？为什么？ 2. 要使分光光度测定结果的误差尽可能小一些，吸光度的最佳读数范围为多少？如何控制？

3. 为什么要制作吸收曲线？

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