阶段达标检测

本卷共10小题，满分100分。

1．(11分)某化工厂的污水池中含有一种有害的难以降解的有机化合物A。研究人员用化合物A、磷酸盐、镁盐以及微量元素配制的培养基，成功筛选到能高效降解化合物A的细菌(目的菌)。实验的主要步骤如图所示。请分析回答下列问题。

(1)培养基中加入化合物A的目的是________，这种培养基属于________培养基。 (2)“目的菌”生长所需的氮源和碳源是来自培养基中的________。实验需要振荡培养，由此推测“目的菌”的代谢类型是________。

(3)在上述实验操作过程中，获得纯净“目的菌”的关键是

________________________________________________________________________。 (4)转为固体培养基时，常采用平板划线的方法进行接种，此过程中所用的接种工具是________，操作时采用________灭菌的方法。

(5)实验结束后，使用过的培养基应该进行灭菌处理后才能倒掉，这样做的目的是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。 (6)某同学计划统计污水池中“目的菌”的总数，他选用10、10、10

－4

－5

－6

稀释液进行

平板划线，每种稀释液都设置了3个培养皿。从设计实验的角度看，还应设置的一组对照实验是________________，此对照实验的目的是

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 解析：(1)该实验的目的是筛选“目的菌”，故培养基中添加化合物A起选择作用。(2)微生物正常生长需要碳源、氮源、无机盐等，由培养基中添加的物质种类知：化合物A应该给微生物生长提供碳源、氮源。培养过程需振荡，说明目的菌是需氧型微生物。(6)统计污水池中的“目的菌”时应设置空白对照，以用于检验培养基是否灭菌严格。

答案：(1)筛选目的菌 选择 (2)化合物A 异养需氧型 (3)防止外来杂菌污染 (4)接种环 灼烧 (5)防止造成环境污染 (6)不接种的空白培养基 检验培养基制备过程中是否被杂菌污染

2．(10分)人和哺乳动物的尿液中含有尿素，大量尿素的存在会对环境造成污染。土壤中有些细菌含有可降解尿素的脲酶。如图是某同学从土壤中筛选出能降解尿素的菌株的实验流程。请回答相关问题：

配制土壤溶液→系列稀释→涂布平板与培养→菌落计数

(1)用以________为唯一氮源的培养基筛选能分泌脲酶的细菌。从功能上讲，该培养基属于________培养基。培养细菌时必须在________条件下操作。对培养基灭菌的常用方法是________________。

(2)采用________________法时需要将样液进行一系列的梯度稀释，然后接种培养、计数菌落。在稀释土壤溶液的过程中每一步都要在________________旁进行操作。将接种后的培养皿在37 ℃的恒温箱中倒置培养，平板倒置培养的目的是_________________________。

(3)在接种前需要检测使用的培养基是否被污染，方法是________________________． (4)向培养基中加入酚红指示剂，若培养基中存在可合成脲酶的细菌，其菌落周围会出现红色，这是尿素被分解产生的________使酚红指示剂显色的结果。变色区域越大，表明该菌株降解尿素的能力________。

解析：(1)欲筛选出能降解尿素的菌株，配制培养基时应以尿素为唯一氮源，这样不能降解尿素的细菌在此培养基上就不能生存，这类培养基属于选择培养基。培养细菌时必须保证无菌操作。实验室常用的灭菌方法有灼烧灭菌法(如接种环)、干热灭菌法(如培养皿)和高压蒸汽灭菌法(如培养基)等。(2)在统计菌落数目时，常用的接种方法是稀释涂布平板法，整个实验过程中要求操作都要在酒精灯火焰旁(有一个无菌区)进行，以避免周围微生物的污染。(3)将未接种的含培养基的培养皿在37 ℃的恒温箱中倒置培养，若有菌落形成，说明培养基灭菌不彻底。(4)酚红指示剂变红的原因是细菌合成的脲酶将尿素分解成了氨，而氨会使培养基的碱性增强，pH升高。降解尿素能力越强的菌株，在其菌落周围形成的红色区域越大。

答案：(1)尿素 选择 无菌 高压蒸汽灭菌法 (2)稀释涂布平板 酒精灯火焰 防止皿盖上的冷凝水落入培养基，造成污染 (3)将未接种的含培养基的培养皿在37 ℃的恒温箱中倒置培养，观察是否有菌落形成 (4)氨(NH3) 越强

3．(8分)下图是泡菜的制作及测定亚硝酸盐含量的实验流程示意图，请据图回答：

(1)测定亚硝酸盐含量的方法是________。在样品处理过程中，用________将pH调至________，在出现白色沉淀后，水浴加热至________；在绘制标准曲线时，应以________为横坐标，________为纵坐标。

(2)泡菜腌制过程中起主要作用的是________和________。用水密封坛口的主要作用是________________________。在腌制时，适量加入少许白酒的作用是____________________。

解析：(1)亚硝酸盐可与对氨基苯磺酸发生重氮化反应，这一产物再与N1萘基乙二胺偶联，形成紫红色产物，可用光电比色法测定亚硝酸盐的含量，在测定亚硝酸盐的过程中，

首先要对样品进行处理，需用氢氧化钠将样品pH调至8.0，再水浴加热至60 ℃。在绘制标准曲线时以亚硝酸钠含量为横坐标，以光密度值为纵坐标。

(2)在腌制泡菜的过程中，起作用的微生物主要是假丝酵母和乳酸菌。用水密封坛口的主要作用是为发酵创造无氧条件。

答案：(1)光电比色法 氢氧化钠 8.0 60 ℃ 亚硝酸钠含量 光密度值 (2)假丝酵母 乳酸菌 为发酵创造无氧环境 使泡菜脆嫩，味道好

4．(12分)请回答下列有关微生物的一些问题。

(1)微生物的分布：微生物主要分布在富含________的土壤表层；不同微生物对pH的要求不同，细菌常生活在酸碱度________的潮湿土壤中。

(2)微生物的消毒和灭菌：在菊花组织培养中，对外植体常用酒精和________进行消毒。在微生物培养中，对培养基常用________方法进行灭菌。静止空气中的细菌可用紫外线杀灭，其原因是紫外线能使蛋白质变性，还能________。如果要检测灭菌是否彻底，可以采用的方法是：________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。 (3)微生物的应用：在葡萄酒的自然发酵过程中，运用吸附在葡萄皮上的野生酵母菌发酵产生酒精，请写出该过程的化学反应式：________________。在果醋制作时，运用醋酸菌在________和糖源充足时，将糖分解成醋酸。

(4)微生物的接种：微生物接种的方法很多，最常用的是________和________。 (5)微生物的计数：根据培养基上出现的菌落数目和稀释倍数计算得出细菌数目往往比实际的数目低，原因是

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (6)微生物的鉴定：为检测尿素分解菌的存在与否，在以尿素为唯一氮源的________(填“选择”或“鉴别”)培养基中加入____________指示剂，如果存在尿素分解菌，则指示剂将变____________色。

解析：(1)微生物主要分布在有机质丰富的土壤表层，细菌常生活在酸碱度接近中性的潮湿土壤中。(2)植物组织培养时，对外植体常用酒精和氯化汞消毒，对培养基常用高压蒸汽灭菌法灭菌；紫外线能使蛋白质变性，还能损伤DNA的结构；可通过在适宜的温度下放置灭菌过的培养基看其是否有菌落产生来确定培养基灭菌是否彻底。(3)醋酸菌为需氧型生物。(4)最常用的微生物接种方法有平板划线法和稀释涂布平板法。(5)因一个菌落可由多个连在一起的细菌形成，所以计算得出的细菌数一般低于实际数目。(6)用选择培养基筛选尿素分解菌，加入酚红指示剂，若存在尿素分解菌，指示剂变红色。

答案：(1)有机质 接近中性 (2)氯化汞 高压蒸汽灭菌 损伤DNA的结构 将灭菌过酶的培养基在适宜的温度下放置一段时间，观察培养基上是否有菌落产生 (3)C6H12O6――→

2C2H5OH＋2CO2＋能量 有氧 (4)平板划线法 稀释涂布平板法 (5)当两个或多个细菌连在一起时，平板上观察到的只是一个菌落 (6)选择 酚红 红

5．(10分)下面是有关食醋和泡菜制作的实验。请回答： (1)食醋可用大米为原料经三步发酵来制作：

第一步：大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶，将原料中的淀粉分解成________(填中间产物)，然后进一步分解成葡萄糖，这一过程可用________(填淀粉指示剂)来检测，因为该试剂遇淀粉呈蓝色，遇上述中间产物呈红色。

第二步：用________菌将葡萄糖转化成乙醇，这一发酵过程中，玻璃发酵瓶不应完全密闭的主要原因是

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 第三步：用________菌将乙醇转化成乙酸，这一过程________氧气。

(2)泡菜发酵过程中，会产生多种酸，其中主要是________，还有少量的亚硝酸。对亚硝酸盐的定量测定可以用________法，因为亚硝酸盐与对氨基苯磺酸的反应产物能与N-1-萘基乙二胺偶联成________色化合物。进行样品测定时，还要取等量水进行同样的测定，目的是________________________________________________________________________

________________________________________________________________________。 解析：(1)大米经蒸熟、冷却后加入淀粉酶(淀粉酶必须冷却后加入，因为酶的催化活性受温度的影响)，大米的主要成分是淀粉，在淀粉酶催化作用下，分解成糊精(主要含麦芽糖等)，这一过程可用碘液(或KI-I2溶液)来检测反应的情况。酵母菌将葡萄糖转化成乙醇的过程中产生CO2，随反应的进行发酵瓶中CO2逐渐增多，瓶内压力升高，可能引起破裂，所以不要完全密闭。醋酸菌是好氧型细菌，在将乙醇转化成乙酸的过程中消耗氧气。(2)泡菜发酵过程离不开乳酸菌，其产生的酸主要是乳酸和少量的亚硝酸盐，亚硝酸盐总量达到0.3～0.5 g时就会引起人中毒，必须对泡菜亚硝酸盐含量进行测定。其测定方法可用比色法。

答案：(1)糊精 碘液(或KI-I2溶液) 酵母 发酵过程中会产生大量CO2，使瓶内压力升高而可能引起爆裂 醋酸菌 需要消耗 (2)乳酸(或有机酸) (光电)比色 玫瑰红 作为对照

6．(12分)下列是与芳香油提取相关的问题，请回答：

(1)玫瑰精油适合用水蒸气蒸馏法提取，其理由是玫瑰精油具有____________________的性质。蒸馏时收集的蒸馏液________(填“是”或“不是”)纯的玫瑰精油，原因是

________________________________________________________________________ ________________________________________________________________________。 (2)当蒸馏瓶中的水和原料量一定时，蒸馏过程中，影响精油提取量的主要因素有蒸馏