2.5%NaHCO3,观察曲线变化。
★勿混用滴加试剂的试管;加试剂应由少到多,作用不明显再补加;加试剂后立即用滴管搅匀,使之迅速发挥作用;随时滴加任氏液于心脏表面使之保持湿润。 4、将心脏搏动变化的情况填入表5-1。
表5-1 几种离子及药物对离体心脏活动的影响
实验项目 Na+ 对照 给药 心率(次/30s) 振幅(mm) 基线变化 其它 Ca2+ 对照 给药 K+ 对照 给药 肾上对照 腺素 给药 乙酰对照 胆碱 给药
七、作业与思考
(一)、正常情况下,两栖类动物(或哺乳类动物)的心脏起搏点是心脏的哪一部分?它为什么能控制潜在起搏点的活动?
(二)、上述各种离子和药物对心搏有何影响,为什么?
(三)、高Ca任氏液与去甲肾上腺素引起的心脏活动变化有何不同?为什么? (四)、以本实验为例说明内环境相对恒定的重要意义。
2+
实验6 影响尿生成的因素
一、实验目的
1、学习插管导尿技术。
2、观察若干因素对尿生成的影响。 二、实验内容
1、 标本的制备与仪器的连接; 2、 实验观察与分析。 三、实验原理
尿生成的过程包括:肾小球的滤过作用、肾小管与集合管的重吸收作用、肾小管与集合管的分泌作用;肾小球的滤过作用取决于肾小球的有效滤过压,其大小取决于肾小球毛细血管血压、血浆的胶体渗透压和肾小囊内压;影响肾小管重吸收作用主要是管内渗透压和肾小管上皮细胞的重吸收能力,后者又被多种激素所调节。在整体内,这3个过程往往受到生理性的调节,凡影响这些过程的因素,都可以影响尿的生成而引起尿量的改变。 四、实验材料
家兔。 五、实验用品
兔手术板、哺乳动物手术器械、记滴器、动脉插管、动脉测压管、三通、水银检压计、膀胱插管(或细塑料管)、小漏斗、刻度试管、2ml及20ml注射器、20%氨基甲酸乙酯、20%葡萄糖液、肝素生理盐水溶液(100U/ml)、生理盐水、10%Na2SO4溶液、去甲肾上腺素(1:10000)、垂体后叶素(5单位/ml);压力换能器、计算机生物信号采集处理系统。 六、实验方法 (一)标本的制备
1、 实验兔在实验前应给予足够的菜和饮水。 2、 麻醉与固定
根据动物体重沿耳缘静脉注入20%氨基甲酸乙酯(5mL.kg),待动物麻醉后,将其仰卧固定于手术台上。剪去颈部和下腹部被毛。 3、手术
(1)分离颈部的神经和血管:沿颈部正中线切开皮肤8~10cm,钝性分离皮下组织和肌肉,暴露气管。在气管两侧,分别分离出左侧颈总动脉和右侧迷走神经,在其下穿线备用。
(2)颈动脉插管:在左侧颈总动脉下穿二根线,将颈总动脉近头端用线结扎,左侧的颈
-1
总动脉近心端用动脉夹夹住以阻断血流,在靠近颈总动脉头端结扎处用眼科剪将动脉管壁剪一“V”字形切口。★注意不可只剪开血管外膜,也切勿剪断整个动脉,剪口大小约为管径的一半。然后将充满抗凝集(柠檬酸钠溶液或肝素生理盐水)的动脉插管向心脏方向插入动脉约6~8mm,用线结扎动脉于动脉插管上,并把结扎线固定在动脉插管上端的固定圈上以防插管从动脉中滑出。
(3)插管导尿:在耻骨联合上缘向上沿正中线作长约4cm的皮肤切口,沿腹白线切开腹壁(勿损伤腹腔脏器),用手轻轻将膀胱移出腹腔外,并用蘸有温热生理盐水的纱布垫上,便可进行插管。
插管的方法有两种,即输尿管插管导尿和膀胱插管导尿。
输尿管插管导尿:认清输尿管进入膀胱背侧部位后,细心地分离出一侧输尿管。先在靠近膀胱处穿线结扎,再在离此结扎线约2cm处穿一条线,用眼科剪在管壁上剪一斜向肾侧的小切口,插入充满生理盐水的细塑料管,用缚线结扎固定(图39-1)。将此导尿的塑料管连接至记滴器装置的玻管内,记录尿流量。
膀胱插管导尿:插管前亦应先认清膀胱和输尿管的解剖部位。用线结扎膀胱颈部,以阻断同尿道的通路。然后在膀胱顶部选择血管较少处,作一直径约1.5cm的荷包缝合,在其中央沿纵向剪一小切口,插入膀胱插管(或膀胱漏斗)。把切口周围的缝线拉紧,结扎固定(图39-1)。插管口最好正对输尿管在膀胱的入口处,但不要紧贴膀胱后壁而堵塞输尿管。膀胱插管的另一端则用导管连接至记滴器或刻度试管,记录尿流量。手术完毕后用温热的生理盐水纱布覆盖腹部创口。
图5-1 兔输尿管及膀胱导尿法(自解景田)
4、仪器连接
将压力换能器接在计算机生物信号采集处理系统的2通道,尿滴记录线接在记滴器
上,通过记滴器与系统的4通道连接,描计尿的滴数(滴/min)。 5、记录血压
手术和实验装置连接完后,轻轻取下向心端动脉夹,可见动脉血与插管内液体混合。再取下通向压力传感器的止血钳,此时显示器上出现血压的波动曲线。 6、实验项目
调节血压通道和记录尿滴通道的扫描速度一致,同时记录正常血压与尿量。待尿流量和血压稳定后,即可进行下列各项实验。每项实验开始时,都应先记录一段尿量和血压曲线作为对照;然后进行注射或刺激,并连续记录和观察至效应明显和恢复过程。 (1)自耳缘静脉分别注射38℃生理盐水30ml,观察血压和尿量的变化。 (2)自耳缘静脉分别注射20%葡萄糖液15ml,观察其变化。
(3)自耳缘静脉分别注射1:10000去甲肾上腺素0.5ml,观察其变化。
(4)结扎并剪断右侧迷走神经,用中等强度的连续脉冲刺激其外周端20-30S,使血压降低至40-50mmHg。观察尿量变化。★刺激迷走神经强度不宜过强,时间不宜过长,以免血压过低、心跳停止。
(5)自耳缘静脉分别注射垂体后叶素2单位,观察和记录其变化20min。 (6)将上述实验结果填入表5-1:
表5-1 若干因素对尿量的影响
影响因素 生理盐水 20%葡萄糖液 去甲肾上腺素 垂体后叶素 刺激迷走神经外周端 尿量(滴/min) 对照 实验 变化率(%) 血压(mmHg) 对照 实验
变化率(%)