绕的白色有韧性的纤维蛋白。去纤维蛋白血不再凝固。 （二）、红细胞渗透脆性实验

1、 将试管编号后排列在试管架上，按下表向各试管准确加入1%NaCl溶液和蒸馏水，混

匀。

表4－1 试管加样顺序

管 号 1 2 1.3 0.7

3 1.2 0.8

4 1.1 0.9

5 1.0 1.0

6 0.9 1.1

7 0.8 1.2

8 0.7 1.3

9 0.6 1.4

10 0.5 1.5

1%NaCl(mL) 1.4 蒸馏水(mL) 0.6 NaCl浓度(%)

0.70 0.65 0.60 0.55 0.50 0.45 0.40 0.35 0.30 0.25

2、采取新鲜血液(或去纤维蛋白血)，在上列试管中各加1滴，双手搓动，混匀。 3、室温下静置2小时，使细胞下沉(必要时可取一组离心沉淀，2000—3000r/min，3—5min)

4、结果判定：上层清液无色，试管下层为浑浊红色，表明没有溶血；上层清液呈淡红色，试管下层仍为浑浊红色为“不完全溶血”；管内液体完全变成透明的红色，管底无细胞沉积为“完全溶血”。呈现不完全溶血的最高NaCl浓度为“最小抵抗”，呈现完全溶血的最高NaCl浓度为“最大抵抗”。

另，可将血液加到高渗液(1.0%NaCl)中，置显微镜下观察红细胞形态变化。

★实验中取血、滴血、混匀时避免用力震荡，以免引起非渗透脆性溶血。

（三）、影响血液凝固的因素

1、静脉注射氨基甲酸乙酯溶液，按5mL.kg的量，将兔麻醉，仰卧固定于兔手术台上。正中切开颈部，分离一侧颈总动脉，远心端用线结扎阻断血流，近心端夹上动脉夹。在动脉当中斜向剪一小切口，插入动脉插管（或细塑料导管），结扎导管以备取血。 2、准备好下列试管

试管1 不加任何处理（对照管）；

-1

试管2 用液状石蜡润滑整个试管内表面； 试管3 放少许棉花；

试管4 置于有冰块的小烧杯中； 试管5 加肝素8U； 试管6 加草酸钾1～2mL； 试管7 加肺组织浸液0.1mL；

3、放开动脉夹，每管加入血液2 mL。将多余的血盛于小烧杯中，并不断用竹签搅动直至纤维蛋白形成，取出纤维蛋白，将该血液取2 mL加入试管8中。 4、记录凝血时间

每个试管加血2 mL后，即刻开始计时，每隔15s倾斜一次，观察血液是否凝固，至血液成为凝胶状不再流动为止，记录所经历的时间。5、6、7号试管加入血液后，用拇指盖住试管口将试管颠倒两次，使血液与药物混合。

5、如果加肝素和草酸钾的试管不出现血凝，可再向两管内分别加入0.025mol.L的CaCl2溶液2～3滴，观察血液是否发生凝固？

6、将实验结果及各种条件下的凝血时间按表2－1填写，并进行比较、分析解释产生差异的原因。

表4－2 血液凝固及其影响因素

-1

实验管号 1 2 3 4 5 6 7 8

实验处理

不加任何处理（对照管） 用液状石蜡润滑整个试管内表面 放少许棉花

置于有冰块的小烧杯中 加肝素8U 加草酸钾1～2mL 加肺组织浸液0.1mL 去纤维蛋白血液

凝血时间

（四）、红细胞凝集现象及人ABO血型鉴定

1、取一干洁双凹玻片，在左、右上角标好“Ａ”、“Ｂ”字样，分别滴入抗Ａ(即Ｂ型)、抗Ｂ(即Ａ型)标准血清1滴。

2、人指尖、采血针消毒，待酒精挥发后采血。用两支干洁竹签各蘸取一滴血液，分别与一种标准血清混匀(切勿混用)，室温下静置几分钟，观察。

3、观察判定：如果红细胞聚集成团，虽经振荡或轻轻搅动亦不散开，为“凝集”现象(见图4－1)，红细胞散在均匀分布或虽似成团，一经振荡即散开，则为未凝集或“假凝集”。

4－1 红细胞凝集实验

按表4－3判定

表4－3 血型判定

血型：

现象 受试血

加抗Ａ血清 ＋ 加抗Ｂ血清 －

Ａ

－ ＋ Ｂ

＋ ＋

－ －

血型 ＡＢ Ｏ

注“＋”为凝集，“－”为不凝集

（五）交叉配血实验

1、分别对供血动物和受血动物消毒、静脉取血，制备成血清和红细胞悬浮液。红细胞悬浮液是将受检者的血液一滴，加入装有生理盐水约1mL的小试管中，即为2％的红细胞悬浮液，加盖备用。

2、取双凹玻片一块，在两端分别标上供血动物和受血动物的名称或代号，分别滴上它们的血清少许。

3、供血者的红细胞悬浮液吸取少量，滴到受血者的血清中（称为主侧配血）；将受血

者的红细胞悬浮液吸取少量，滴入供血者的血清中（称为次侧配血），混合。放置10～30min后，肉眼观察有无凝集现象，肉眼不易分辨的用显徽镜观察。如果两次交叉配血均无凝集反应，说明配血相合，能够输血。如果主侧发生凝集反应，说明配血不合，不论次侧配血如何都不能输血。如果次侧配血发生凝集反应，只有在紧急情况下才有可能考虑是否输血。 七、作业与思考

（一）、血浆与血清有哪些区别？如何区别血液的凝集与凝固，其机理是否一样？ （二）、为何同一个体的红细胞渗透脆性不同？ （三）、血液凝固的机制及影响血凝的外界因素？

（四）、如果只知1人为Ａ型血，请你设计无标准血清情况下测知全班人血型方案。

实验5 蛙类心博观察及离体蛙心灌流

一、实验目的

1、 观察蛙心起搏点和蛙心脏不同部位的自律性，加深对心脏自动节律性、正常起搏点

和潜在起搏点的理解；

2、 观察细胞外液钾离子、钙离子以及去甲肾上腺素、乙酰胆碱等神经递质对心脏活动

的影响，理解内环境理化因素相对稳定对维持心脏正常节律性活动的重要意义。 3、 学习离体蛙心灌流，了解离体器官的研究方法。 二、实验内容 1、 蛙心起博点观察； 2、 离体蛙心灌流。 三、实验原理

两栖类动物的心脏为两心房、一心室，心脏的起搏点是静脉窦。静脉窦的自动节律最高，心房次之，心室最低。正常情况下，心脏的活动节律服从静脉窦的节律，其活动顺序为：静脉窦、心房、心室。这种有节律的活动可以用机械方法或通过换能器记录下来，称为心搏曲线。

心脏的正常节律性活动必须在适宜的理化环境里才能维持，一旦适宜的环境被干扰破坏，心脏活动就会受到影响。心脏受植物性神经的双重支配，交感神经兴奋时，其末