（1）若要从转基因牛的乳汁中提取人的生长激素，应将人的生长激素基因与乳腺蛋白基因的 启动子 等调控组件结合．该过程需要的工具酶有 限制酶和DNA连接酶 ．为了检

测人的生长激素基因是否插入到牛耳细胞染色体DNA上，可采用 DNA分子杂交 技术．

（2）要获得单个牛耳细胞，过程C需要用 胰蛋白酶或胶原蛋白酶 处理优质奶牛牛耳组织块．在单个细胞培养过程中，为了防止杂菌污染，通常在细胞培养液中添加一定量的 抗生素 ．

（3）G过程表示 胚胎移植 ，通常胚胎应发育到 囊胚或桑椹胚 阶段才能进行，G过程前若进行 胚胎分割 操作，可以获得同卵双胎或多胎．

（4）培育出的转基因牛的遗传物质来自 人、优良奶牛、本地牛 ． 【考点】基因工程的原理及技术；胚胎移植．

【分析】1、基因工程的基本操作步骤主要包括四步：①目的基因的获取；②基因表达载体的构建；③将目的基因导入受体细胞；④目的基因的检测与表达．工具：限制酶、DNA连接酶和运载体．

2、动物细胞培养的条件：（1）无菌、无毒的环境：①消毒、灭菌②添加一定量的抗生素③定期更换培养液，以清除代谢废物

（2）营养物质：糖、氨基酸、促生长因子、无机盐、微量元素等，还需加入血清、血浆等天然物质．

（3）温度和PH．

（4）气体环境：95%空气（细胞代谢必需的）和5%的CO2（CO2的作用是维持培养液的PH）．

3、胚胎移植的生理基础：

（1）供体与受体相同的生理变化，为供体的胚胎植入受体提供了相同的生理环境； （2）胚胎在早期母体中处于游离状态，这就为胚胎的收集提供了可能；

（3）子宫不对外来胚胎发生免疫排斥反应，这为胚胎在受体内的存活提供了可能． （4）胚胎遗传性状不受受体任何影响． 【解答】解：（1）构建乳腺生物发生器需将目的基因与乳腺蛋白基因的启动子等调控组件重组在一起，可在转基因动物的乳汁中获得所需的蛋白质．构建基因表达载体需要限制酶和DNA连接酶；若要检测该受精卵细胞内是否含有人的生长激素基因，在分子水平上通常用荧光标记作探针，采用DNA分子杂交技术．

（2）用胰蛋白酶或胶原蛋白酶处理优质奶牛牛耳组织块，可获得单个牛耳细胞．在单个细胞培养过程中，通常在细胞培养液中添加一定量的抗生素，为了防止杂菌污染．

（3）G过程将早期胚胎移植到受体母牛子宫内．被转移胚胎往往是需要发育良好的桑葚胚或囊胚．要获得同卵双胎或多胎，常用胚胎分割．

（4）培育出的转基因牛的生长素基因是人的，重组细胞质遗传物质来自于本地牛，细胞核的遗传物质来自于优良奶牛． 故答案为：

（1）启动子 限制酶和DNA连接酶 DNA分子杂交 （2）胰蛋白酶或胶原蛋白酶 抗生素

（3）胚胎移植 囊胚或桑椹胚 胚胎分割 （4）人、优良奶牛、本地牛

2016年6月13日