需插入到质粒上,才能转移到受体细胞中,A正确;由于植物细胞具有全能性,因此植物基因工程的受体细胞可以是受精卵或体细胞,B错误;限制酶具有专一性,能识别特定的脱氧核苷酸序列,C错误;转基因烟草与原烟草之间一般不会出现生殖隔离,D错误。

10. D 【解析】 构建载体需要限制酶和DNA连接酶,A错误;③侵染植物细胞后,重组Ti质粒上的T-DNA整合到④的染色体上,B错误;染色体上含有目的基因,但目的基因也可能不能转录或者不能翻译,或者表达的蛋白质不具有生物活性,C错误;植株表现出抗虫性状,说明含有目的基因,属于基因重组,为可遗传变异,D正确。

11. BCD 【解析】 从细胞中分离目的基因时需要使用限制酶;基因工程的基本操作程序有四步:①目的基因的获取,②基因表达载体的构建,③将目的基因导入受体细胞,④目的基因的检测与鉴定;启动子是一段有特殊结构的DNA片段,位于基因的首端,是RNA聚合酶识别和结合的部位,能驱动基因转录出mRNA,最终获得所需的蛋白质,所以目的基因要与启动子结合。 12. ACD 【解析】 采用DNA分子杂交技术可检测外源基因是否导入受体细胞,但不能检测外源基因在小鼠细胞内是否成功表达,B错误。

13. ACD 【解析】 转基因植物可能对环境更适应,与其他植物间更具有竞争力,可能成为入侵的“外来物种”,影响生态系统的稳定性;转基因植物与其他植物可以杂交,存在“基因污染”问题;“基因污染”会通过花粉等扩散到其他物种。

14. (1) 逆转录 RNA聚合酶 (2) 400 (3) 浆细胞 基因的选择性表达 (4) 2 细胞增殖(有丝分裂) (5) A蛋白 抗A蛋白的单克隆抗体

【解析】 (1) 过程①是以RNA为模板合成DNA的过程,称为逆转录。RNA聚合酶能识别启动子和终止子,催化转录过程。(2) Ⅱ区(编码区)的碱基数是2 000个,阴影区域(内含子)碱基数是800个,所以空白区域(外显子)碱基数是1 200个。由于G和C的总数是400个,所以空白区域A和T的总数是800个。由于两条链上A和T的总数一样,所以一条链上A和T的数

量是400个,转录产生的mRNA中A和U总数是400个。(3) 重复注射抗原可以通过二次免疫,增加小鼠体内的浆细胞数量。过程⑥是细胞分化,实质是基因的选择性表达。(4) 先在特定的选择培养基上筛选出杂交瘤细胞,再进行第二次筛选,选出能产生特定抗体的杂交瘤细胞。X细胞进行有丝分裂,最终扩大细胞数目。(5) 可以用基因工程生产的A蛋白作为抗原来制备疫苗。用分离出的病毒(抗原)与抗A蛋白的单克隆抗体进行特异性检测,可以对传染病疑似患者进行确诊。

15. (1) 逆转录酶(或反转录酶) 肾脏 (2) —AGCT 两种限制酶切割产生的黏性末端不同 (3) (凝胶)电泳 (4) 将GFP基因表达载体直接导入猪肾小管上皮细胞,然后观察绿色荧光在细胞中的分布情况

(5) 较高浓度葡萄糖能增强肾小管上皮细胞中hNaDC3基因的表达

【解析】 (1) 过程①是以RNA为模板形成DNA,需要逆(反)转录酶的催化。根据“hNaDC3主要分布于肾脏等重要器官”确定只有肾脏等器官的细胞中该基因能够表达,所以从肾脏中获得模板RNA。(2) 由于不同的酶切割形成的黏性末端不同,在DNA连接酶作用下可实现目的基因定向插入载体并正常表达。题中SacⅠ切割形成的黏性末端是—AGCT,SacⅡ切割形成黏性末端是—GC。(3) 依据DNA分子的大小不同,利用凝胶电泳技术进行筛选,可以筛选出重组质粒。(4) 通过该实验现象不能排除绿色荧光蛋白本身对结果的干扰,需设置对照进行比较,其思路为将GFP基因表达载体直接导入猪肾小管上皮细胞,然后观察荧光在细胞中的分布情况,以排除荧光蛋白对结果的影响。(5) 根据信息可以得出的结论是较高浓度葡萄糖能增强肾小管上皮细胞中hNaDC3基因的表达。