3.按教科书中图6-2所示安装蒸馏装置，对萃取的样品进行浓缩。具体的操作步骤及注意事项见本专题课题1的案例1。

4.收集接受器中的样品，观察样品的颜色和气味，并通过纸层析进行鉴定。层析时注意选择干净的滤纸，为了防止操作时对滤纸的污染，应尽量避免用手直接接触滤纸，可以带手套进行操作。点样时应注意点样斑点不能太大（直径应小于0.5 cm），如果用吹风机吹干，温度不宜过高，否则斑点会变黄。将点好样的滤纸卷成筒状，卷纸时注意滤纸的两边不能相互接触，以免因毛细管现象导致溶剂沿滤纸两边的移动加快，溶剂前沿不齐，影响结果。

课题成果评价

（一）确定提取胡萝卜素的最佳方案

在进行本实验时，教师可以将学生分组，每组可以采用不同的有机溶剂和时间进行萃取，比较各组的实验结果，确定提取胡萝卜素的最佳方案。

（二）是否出现对应的层析带

如果萃取样品中出现了和标准样品一样的层析带，说明提取胡萝卜素的实验成功。由于提取物中含有杂质，萃取样品的颜色可能比标准样品的颜色浅，我们也可以通过颜色的比较，初步确定提取的胡萝卜素的量。

答案和提示

（一）［资料一］ 萃取剂的选择讨论题

1.乙醇和丙酮能够用于胡萝卜素的萃取吗？为什么？

答：胡萝卜素可溶于乙醇和丙酮，但它们是水溶性有机溶剂，因萃取中能与水混溶而影响萃取效果，所以不用它们作萃取剂。

2.在石油醚、醋酸乙酯、乙醚、苯和四氯化碳这几种有机溶剂中，哪种最适宜用来提取胡萝卜素？ 答：在这五种有机溶剂中，石油醚的沸点最高，在加热萃取时不易挥发，所以石油醚最适宜用作萃取剂。

（二）练习

1.答： 列表分析如下。 提取方法 水蒸气蒸馏 实验原理 利用水蒸气将挥发性较强的芳香油携带出来 方法步骤 1.水蒸气蒸馏 2.分离油层 3.除水过滤 适用范围 适用于提取玫瑰油、薄荷油等挥发性强的芳香油 参考答案

专题一传统发酵技术的应用

课题1 果酒和果醋的制作

1. （1）酵母菌 兼性厌氧型 有氧时C6H12O6+6H2O+6O2 → 6CO2+12H2O+能量，无氧时C6H12O6

→ 2C2H5OH+2CO2+能量，

酒精

（2）附着于葡萄品皮上的野生型酵母菌20 ℃ 酸性（3）酒精度 色素 深红 （4）缺氧 酸性

2. （1）醋酸菌 需氧型

（2）醋酸 乙醇 乙醛 C2H5OH+O2→CH3COOH +H2O 3. （1）体积分数为70%的酒精 （2）1/3

（3）18～25 ℃ 10---12天

（4）30—35℃ 7—8天 通气口 4. （1）重铬酸钾 （2）酸性 灰绿色

5. 冲洗 榨汁 酒精发酵 醋酸发酵

课题2 腐乳的制作

1. （1）.肽 氨基酸 甘油 脂肪酸

（2）.青霉 酵母 曲霉 毛霉 毛霉 真菌 土壤 水果 蔬菜 谷物 （3）.无菌 毛霉 污染

2. 毛霉 加盐腌制 加卤汤装瓶

3. （1）15--18℃ 毛霉孢子（2）增加盐量 铺厚一些 成形 抑制其它微生物 不足以抑制微生物的生长，可导致豆腐腐败变质 影响腐乳的口味（3）12% 抑制 腐乳成熟时间延长 不足以抑制微生物的生长，导致豆腐腐败 防腐杀菌（4）通过酒精灯的火焰

课题3 制作泡菜并检测亚硝酸盐含量

1.异氧厌氧型 无氧 空气 土壤 植物体表面 肠道 乳酸链球菌 乳酸杆菌乳酸杆菌 2.白色粉末 水 添加剂 0.3-0.5 3 适宜温度 PH 一定的微生物

3.盐水配制 封坛（1）4：1 煮沸冷却（2）一半 八成满 没过全部菜料 注满水 无氧（3）时间 温度

食盐的用量 腌制时间 细菌大量繁殖 亚硝酸盐含量增加

4. 在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N一1一萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红染料 制备标准显色液 比色

1.石灰水浸泡、漂洗 通过机械加压，压榨适用于柑橘、柠檬等易焦糊原料的压榨法 2.压榨、过滤、静置 出果皮中的芳香油 提取 3.再次过滤 有机溶 使芳香油溶解在有1.粉碎、干燥 适用范围广，要求原料的颗粒要尽2.萃取、过滤 可能细小，能充分浸泡在有机溶液3.浓缩 中 机溶剂中，蒸发溶剂剂萃取 后就可获得芳香油

17

的菌落

专题二 微生物的培养与应用

课题1 微生物的实验室培养

1.液体培养基 固体培养基

2.水 碳源 氮源 无机盐 PH 特殊营养物质 氧气 3.防止外来杂菌的污染

4.使用较为温和的方法仅杀死物体表面或内部一部分对人体有危害的微生物 使用强烈的理化? 因素杀死物体内外微生物，包括芽孢和孢子

? 5.煮沸消毒 酒精 氯气 灼烧灭菌 干热灭菌 高压蒸汽灭菌 紫外线 化学药物 ? 6.计算 称量 融化 灭菌 倒平板

? 7.平板划线法 稀释涂布法 通过接种环在琼脂固体培养基表面连续划线的操作，将聚集的菌种?

逐步稀释分散到培养基表面 将菌液进行一系列梯度稀释，并将不同稀释度菌液分别涂布到琼脂固体培养基上进行培养

8.（1）固体斜面培养基培养 菌落 4℃ 较短 污染（2）甘油管藏法 －20℃

?

? ? 课题2 土壤中分解尿素的细菌的分离与计数

? 1. 脲酶 氨和CO 尿素 固体

? 2.DNA多聚酶链式反应 少量DNA 大量复制的技术 ? 3.目的菌株 营养、温度、PH等

? 4.允许特定种类的微生物生长，同时抑制或阻止其他种类微生物生长的培养基

?

5. 稀释涂布平板法 样品稀释液中一个活菌 30～300 （平均菌落数÷涂布的稀释液体积）×稀释倍数 恰当的稀释度 显微镜直接计数

6. 低 当两个或多个细胞在一起时，平板上观察到的只是 一个 菌落 菌落数

7.是排除实验组中非测试因素对实验结果的影响 指除了被测试的条件外，其他条件都相同? 的实验 对照组 实验组

? 8. 实验方案、材料用具、实施步骤和时间安排

? 9.培养温度 培养时间 防止因培养时间不足而导致遗漏菌落的数目 ? 10.微生物的天然培养基 数量最大 种类最多 不同 ? 11. 70％～80％ 中性

? 12. 形状、大小、隆起程度、颜色 ? 13.避免混淆 ? 14. 生物化学

? 15. 脲酶 氨 增强 升高 pH 尿素 酚红 红 分解尿素 ?

课题3 分解纤维素的微生物的分离

1.多糖 棉花

2.复合 C1酶、Cx酶 葡萄糖苷酶 葡萄糖

3. 刚果红染色法 颜色 刚果红 红色复合物 纤维素酶 透明圈

4. 土壤取样 选择培养 将样品涂布到鉴别纤维素分解菌的培养基上 挑选产生透明圈

18

5. 发酵产纤维素酶 液体 固体 葡萄糖

专题三 植物的组织培养技术

课题1 月季的花药培养

遗传信息 完整个体 全能性 特定的时间和空间 选择性表达 快速繁殖 脱毒 人工 新品种 工厂化生产 形态、结构和生理功能 稳定性

细胞分裂 疏松而无规则 液泡化 无定形 薄壁 植物组织培养的过程可简单表示为：

年龄 保存时间的长短 未开化植物的茎上部新萌生的侧枝

MS N、P、S、K、Ca、Mg Fe、Mn、B、Zn、Cu、Mo、Cl、Ni、I、Co 生长素 细胞分裂素 浓度 使用的先后顺序 用量的比例 温度 光 5.8 18-22℃ 每日用日光灯照射12小时 浓缩倍数 蒸馏水

蔗糖 蒸馏水 1000 植物激素 高压蒸汽灭菌

70％的酒精 灭菌 形态学上端 7～8 操作步骤相同，而且都要求无菌操作光照 封口膜 消过毒的蛭石或珍珠岩

课题2 月季的花药培养

四分体 单核 双核 4 很多

愈伤组织 分化 胚状体 分化 材料的选择 培养基的组成

镜检 醋酸洋红溶液 焙花青－铬钒溶液 红 蓝黑 卡诺氏固定液 无水酒精和冰醋酸 3：1

无菌 容易从受伤部位产生愈伤组织 花丝不利于愈伤组织或胚状体的形成 培养基 7～10 MS 5.8 25 IAA BA IAA 愈伤组织 分化培养基 分开 染色体倍性

专题4 酶的研究与应用 课题1果胶酶在果汁生产中的作用

一、1.(1)细胞壁 胞间层 半乳糖醛酸 (2)半乳糖醛酸

无菌箱 温度 (3)分解果胶 多聚半乳糖醛酸酶 果胶分解酶 果胶酯酶 (4)植物 霉菌 酵母菌 细菌 霉菌

2．(1)催化一定化学反应 反应速度 (2)单位时间 单位体积 减少量 增加量 温度 pH 酶的抑制剂 3.浪费 限制

二、1.(1)①增强 全部丧失 ②单位时间 苹果汁的体积

苹果汁的体积大小 果汁的澄清度 越大 澄清 (4)①酶的活性 自变量 ②保证底物和酶在混合时的温度

2．(1)最适pH (2)①相同 ②苹果泥 果胶酶 3．(1)用量不足 不再改变 最适用量 (2)①相等

课题2 探讨加酶洗衣粉的洗涤效果

一、1.(1)酶制剂 (2)蛋白酶 脂肪酶 淀粉酶 纤维素酶 (3)蛋白质 氨基酸或小分子的肽 脂肪 甘油和脂肪酸 淀粉 麦芽糖 碱性蛋白酶 氨基酸 小分子的肽

2．温度 面活性剂 基酸 耐碱 忍剂 较高温度

二、(1)类 对照

2．(1)温生活实际

3．(1)不同种类的加酶洗衣粉 完全相同

课题3 酵母细胞的固定化

一、1.(1)①葡萄糖 ②葡萄糖异构酶 (2)不能 自由出入 葡萄糖异构酶 果糖 (3)反应物 产物 反复

2．(1)物理 化学 (2)包埋法 化学 ①包埋法 ②化学 ③物理 二、1.(1)活化 (2)CaCl2 (3)海藻酸钠 (4)酵母细胞 (5)固定化 2．(1)酵母细胞 (2)葡萄糖溶液 小火 间断加热 溶化

酶 能量 引物 条件 模板 原料 组分 DNA的两条单链 四种脱氧核苷酸 解旋酶 DNA聚合酶 ATP RNA 提供复制的模板 合成DNA子链的原料 打开DNA双链 催化合成DNA子链 为解螺旋和合成子链供能 为DNA聚合酶提供合成的3’端起点 度 对照

作用 酸碱度 表因工程 耐受表面活性隔离 洗衣粉的种

专题5 DNA和蛋白质技术导学案

（一）DNA的粗提取与鉴定

19

1.化学方法分离具有不同物理或化学性质的生物大分子 DNA RNA 蛋白质和脂质 （1）① NaCl DNA ② 酒精

o

（2） 蛋白质 DNA 80C以上 细胞膜 （3）沸水浴 二苯胺 蓝

2. （1）DNA DNA含量相对较高

（2） 蒸馏水 玻璃棒 洗涤剂 食盐 ① 低渗 吸水胀裂 ② 细胞膜 DNA DNA

③ DNA 少 丝状沉淀物 蓝色 （3）去除滤液中的杂质

①溶解度 NaCl溶液的浓度 ②蛋白质 DNA ③蛋白质 DNA

（4）①酒精溶液 白色丝状物

② 2mol/L 二苯胺试剂 沸水浴 蓝 3.（1）血液凝固 （2）轻缓、柔和

（3）轻缓 DNA分子的断裂 （4）现配现用 （5）降低 升高

（二）多聚酶链式反应扩增DNA片断 1.（1）

（2）①解旋 ② 引物结合

③ DNA聚合酶结合 ④ 子链合成

（3） 双链的解开 温度 ① 80～100 变性 ② 50 复性

③ 缓冲液 DNA 两种引物 耐热的DNA聚合 ④PCR仪

2. （1）①95 ②55 ③72

（2）离心管 PCR仪 DNA

（3）①微量离心管 枪头 缓冲液 高压灭菌 ② －20 ③更换

（三）血红蛋白的粗提取和分离

1.形状和大小 性质和多少 溶解度 吸附性质 对其他分子的亲和力

（1） 分配色谱法

① 相对分子质量的大小

② 多糖类化合物 相对分子质量较小 较长 较慢 相对分子质量较大 凝胶外部 较短 较快 （2）① pH

② 外界的酸和碱 pH pH

③ 1～2 使用比例 在不同pH范围内 （3）① 带电粒子 电场

② 多肽 核酸 可解离的基团 一定的pH 正电或负电 相反 ③ 带电性质的差异 大小 形状 迁移速度 ④ 琼脂糖凝胶 聚丙稀酰胺凝胶

所带净电荷的多少 分子的大小 十二烷基硫酸钠（SDS）—聚丙稀酰胺凝胶电泳 2. 样品处理 粗分离 纯化 纯度鉴定 （1）① 杂蛋白 低速短时间 ② 蒸馏水 甲苯

③ 无色透明 脂溶性物质 白 血红蛋白 红色透明 暗红色 滤纸 脂溶性物质沉淀层 分液漏斗 红色透明的液体 ④ 透析 去除分子量较小的杂质 （2） 相对分子质量较大的杂质蛋白 ① 凝胶色谱柱

② 凝胶色谱柱 所需要的凝胶量 气泡 （3） 纯化 SDS－聚丙烯酰胺凝胶电泳

3. （1） 洗涤次数 离心速度 离心时间 洗涤次数 离心速度 离心时间 白细胞

（2） 洗脱液 湿凝胶 沸水浴 （3） 洗脱次序 分离效果 （4） 均匀一致

4. （1） 洗涤次数少，未能除去血浆蛋白 纯净 血红蛋白的提取纯度 （2） 凝胶色谱柱的装填

溶剂中的方法 植物芳香油 事先精制，除去杂质

3.高级香水 稳定 水 有机溶剂 水蒸气 水蒸气蒸馏法 水上蒸馏法 鲜玫瑰花+清水 水蒸气蒸馏 油水混合物 分离油层 除水 玫瑰油

4.橘皮油 柠檬烯 橘皮部分 压榨法 石灰水浸泡 漂洗 压榨 过滤 静置 再次过滤 橘皮油

课题2 胡萝卜素的提取

1.橘黄色结晶 稳定 乙醇 石油醚 β-胡萝卜素 胡萝卜素 植物 大面积养殖的海藻 微生物的发酵 混合物 分离 2.胡萝卜 粉碎 干燥 萃取 过滤 浓缩 胡萝卜素

专题六 植物有效成分的提取

课题1 植物芳香油的提取

1. 植物、动物 玫瑰油 樟油 挥发性 比较复杂 萜类化合物 衍生物

2.蒸馏法、压榨法、萃取 水蒸气蒸馏法

利用水蒸气将挥发性较强的植物芳香油携带出来，形成油水混合物，冷却后，混合物又会重新分出油层和水层 原料放置 水中蒸馏、水上蒸馏、水气蒸馏 水中蒸馏会导致原料焦糊和有效成分水解 压榨法

挥发性强，有机溶剂 萃取法 粉碎、干燥的植物原料用有机溶剂浸泡，使芳香油溶解在有机

20