② 竞争性免疫分析

反应通式：待测抗原 已知抗体（已知量、欠量） Ag + Ab = AgAb Ag* + Ab = Ag*Ab 标记抗原

示例： Bound Free Ag + Ag* + Ab →→→ AgAb + Ag*Ab + Ag + Ag* B/F 0 2 1 0 1 0 1 1 2 2 1 0.5 0.5 1.5 1.5 1/3 4 2 1 0.67 0.33 3.33 1.67 1/5 8 2 1 0.8 0.2 7.2 1.8 1/9

B/F

B/F

[Ag]

如:待测物为Ab同理

lg[Ag]

此为竞争性免疫反应——免疫分析法非常重要的思路. 竞争免疫法,选择条件很重要,选择适当的[Ag*]和[Ab], 一般要求无Ag时, Ag*和Ab结合率在50%左右,

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[Ab]确定方法：抗体---抗血清逐级稀释方法 标记抗原浓度固定, 抗血清——浓度，难测

——滴度 效价titre ，实际使用 滴度：

——将抗血清稀释时能与抗原发生反应的最高稀释度, ——结合50%标记抗原时抗血清稀释度

总结：基于免疫反应的标记免疫分析法： ——反应至少有Ag Ab （反应物）参与

——标记反应物只有两个选择：标记抗原、标记抗体.

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——排列组合，四种情况. 待测物

Ag Ab* 标记对方,非竞争 Ag Ag* 标记己方，竞争 Ab Ag* 标记对方,非竞争 Ab Ab* 标记己方，竞争

4.均相.非均相免疫分析 非竞争免疫分析:

Ag + Ab*Free = AgAb*Bound 竞争性免疫分析

Ag + Ab = AgAb Ag* Free + Ab = Ag*AbBound

同一溶液体系,共存在至少二种标记物质: 带标记的免疫复合物（产物）B 游离的标记抗原或抗体 （反应物）F

测定时，测定反应物F的减少，或产物B的增加 ① 均相免疫分析

——不需分离B.F 可直接测定B,F变化. ——具体方法后述

——必要条件:结合前后必须标记物检测性能有变化

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② 非均相免疫分析

——需将B.F分离,分别测定B.F 变化,分离方法多种,后详述

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