育 苗 方 式 对 烤 烟 幼 苗 叶 绿 素 含 量 和 根 系

活 力 的 影 响

育苗方式对烤烟幼苗叶绿素含量和根系活力的影响

摘要：通过2个实验对烤烟幼苗根系活力和叶绿素的测定，得出育苗方式对二者的影响。

关键词：育苗方式，幼苗，叶绿素含量，根系活力。

前言：植物根系是活跃的吸收器官合和合成器官，根的生长情况和活力水平既可作为植物吸水和吸肥的指标，又可作为生长和营养指标。故根系的活力是植物生长的重要生理指标之一。

叶绿素与光合作用及氮素营养密切相关，是科学施肥、育种、光和、衰老

及植物病理研究中的重要指标。

1烤烟幼苗根系活力的测定

1.1实验材料、仪器及用具：

1.1.1材料：烤烟漂浮育苗植株的根系

1.1.2仪器及用具：分光光度计，小镊子，刀片，玻棒， 50 ml 或 100 ml 小烧杯， 50 ml 量筒，1 ml 移液管，10 ml 刻度试管，100 ml 、1000 ml 容量瓶各一个，试管架，小镊子、吸水纸适量。

1.1.3.试剂：

-1

⑴0.0002 mol .L 甲烯蓝标准溶液：精确称取64 mg 甲烯蓝（ C16H18N3SCl3H2O ），加水溶解后定容至 1000 ml ，此溶液含甲烯蓝 64 ug .ml-1 。

⑵ 10 ug.ml-1 甲烯蓝标准溶液：吸取 0.0002 mol .L-1 甲烯蓝溶液 15.60ml 定容至 100 ml 。

1.2方法步骤：

1.2.1.标准曲线的制作：取 7 支 20 ml 的试管编号，依次加入 10 ug.ml-1 甲烯蓝标准溶液 0，1，2，4，6，8，10 ml ，再依次加入蒸馏水 10，9，8，6，4，2，0 ml，

-1

即成每管含甲烯蓝 0，1，2，4，6，8，10ug.ml 浓度的系列标准溶液，以 1 号管为参比液在 722 分光光度计660 nm，1cm 光径的比色皿读出光密度。即：

管号 1 2 3 4 5 6 7 10 ug.ml-1（ml） 0 1 2 4 6 8 10 H2O（ml） 10 9 8 6 4 2 0

-1

C（ug.ml） 0 1 2 4 6 8 10 A(光密度) 0 0.181 0.395 0.775 1.136 1.411 1.659

以甲烯蓝浓度(C)为横坐标，光密度(A)为纵坐标绘标准曲线，并求出其回归方程。 1.2.2．根系体积的测定：取洗净的烟苗根系 3 株，用吸水纸吸干水分后放入量筒中（或 在电子天平上称重），根据阿基米德原理，根系浸没在水中，它排开水的体积即为根系本身的体积。用水位取代法，即可测知根系的体积。

2.烤烟幼苗叶绿素含量的测定

2.1实验材料、实验用具及仪器设备：

2.1.1.材料：不同成熟度烤烟烟叶叶片（过熟叶、成熟叶、未熟叶）、

2.1.2.仪器：722分光光度计、25ml具塞刻度试管、研袋、漏斗、天平、剪刀或打孔器、石英沙。

2.2操作步骤：

2.2.1取样：取新鲜烟叶叶片，擦净表面污物，如叶片小，按重量取样，叶片大可按面积取样。

2.2.1.1.重量取样：去掉叶片中脉，剪碎、混匀，电子天平上称取鲜样0.1～0.2g。 2.2.1.2.面积取样：避开叶片主脉，用打孔器取烟叶叶样6～8片，并量打孔器直径，计算出叶样面积。

2.2.2 叶绿体色素的提取：有研磨法和浸泡法

2.2.2.1.研磨法：将取好的样品剪碎后放入研袋中，加入少量石英沙和CaCO3粉及2～3ml浸提试剂（95%乙醇或80%丙酮）研成匀浆，再加浸提试剂5ml，继续研磨至溶液变绿，残渣变白，过滤于25ml具塞刻度试管（或容量瓶）中，用滴管吸取浸提试剂将残渣与滤纸上的叶绿体色素全部洗洗入具塞刻度试管（或容量瓶）中，直至滤纸和残渣中无绿色为止。最后用浸提试剂将滤液定容至25ml，摇匀备用。

2.2.2.2.浸泡法：科研测定项目多、待测样品量多，需错开时间，可选择此法。 将取好的样品放入25ml容量瓶中，加80%丙酮或混合浸提试剂（无水乙醇:丙酮=1:1）

20ml，放在暗处，浸泡至叶片变白，用浸提试剂定容至25ml,摇匀备用。 2.3比色测定：

将色素提取液到入光径为1cm的比色皿中，以浸提剂为空白，分别于663nm、646nm和470nm下比色测定吸光度，记录A值，带入上述色素浓度 公式，计算出色素提取液的浓度，然后再根据下式计算含量：

色素浓度（mg?L?1)?色素提取液总量（g）?1000ml)叶绿体色素含量(mg.g-1) =

色素浓度（叶片重量（?1

ml)2mg?L)?色素提取液总量（叶片面积(dm)?1000叶绿体色素含量(mg.dm) =

试管号 A C 烤烟育苗方式 -2

假植育苗幼苗根系 假植育苗幼苗根系 漂浮育苗幼苗根系 1 2 3 1 2 3 0.70.815 0.762 1.011.019 1.0263 2 9 4.24.553 4.242 5.705.750 5.8047 9 9 根吸收面积 活跃吸收面根的体积 根的重量 比表面积 积（%） （cm3） （g） （m2.cm3） 总活跃总的 活的 的 跃的 1.50.77550.12 1 1 1.548 0. 489 7759

漂浮育3.41.897 54.94 苗幼苗53 根系 A 色素浓度 66646470a b a+b 3nnm nm m 假1.1.01.011.0125.植1409 00 96 4668 育1 .苗5叶 72 漂0.0.10.44.8216.0浮4368 24 7 .26 育4 1苗9叶 9

2.5 2.5 1.381 色素含量 Cx a b a:b aCx +b 30.50.7.17 61 202 00.04.0.22 00 075 4.11.342 84 1.818 1.70.077 60 0.015 0.7588 Cr:Cx 叶片重量 6.193 0.2004 3.409 0.1997 3 实验结果讨论：

3.1烟草的根系因育苗方式的不同，移栽后在地下的分布不同。常规方式所育烟苗的不定根大量产生于烟株团棵期中耕培土后，由于培土后将茎基部埋入地下，从茎基部产生大量不定根，增加根系吸收面积，同时增强烟株的抗倒伏能力。而漂浮育苗所育的烟苗茎杆明显高于常规苗，一般在10～15cm，采用深栽技术后，烟苗绝大部分茎杆被埋在土内，因此烟株在茎基部产生不定根的时间比常规苗早，不定根产生的数量明显多于常规苗，而且形成了明显的侧根和不定根的二层分布。

3.2 高等植物叶绿体中所含光合色素，按颜色可分为叶绿素与类胡萝卜素，是叶绿体的重要组分，其功能是吸收、传递与转换光能。

参考文献

[1]柴天镇，郭月清主编.烟草栽培[M]. 北京：中国农业出版社，1996

[2]刘国顺，王彦亭，汪耀富等编.烟草栽培学[M].北京：中国农业出版社，2003.7 [3]邵岩.优质烤烟生产手册[M].昆明：云南科技出版社，1999.11

[4]王绍坤，滕永忠，顾华国等.烤烟漂浮育苗实用技术[M].昆明：云南科技出版社，2003 [5]邵岩，李永忠，文国松编.烤烟漂浮育苗理论与实践[M].昆明：云南科技出版社，2003 [6]D.Layten Davis 和Mark T. Nielsen 编. 烟草生产，化学和技术[M]. 北京：化学工

业出版社，2003.1

[7]白宝章，汤学军主编.植物生理学（Ⅱ）测试技术[M].北京：中国科学技术出版社，1993.8

[8]张志良编.植物生理学实验指导[M].北京:高等教育出版社,1996.5

[9]叶尚红主编. 植物生理生化实验教程[M]. 昆明：云南科技出版社，2003.1 [10] 雷丽萍，崔国民编.云南烤烟生产新技术[M].北京：科学出版社，2006.3