第四章 药物的含量测定方法与验证

一、基本要求

1．掌握：药物含量的容量、光谱和色谱分析法，滴定度与含量计算，色谱系统适用性试验的内容、要求及相关计算，样品分析的前处理方法，药物分析方法的验证与内容。 2．熟悉：各类分析法的基本原理与条件选择，样品分析前处理方法的适用范围，不同分析方法对验证内容的基本要求。

3．了解：滴定液的配制与标定，分析仪器的校正和检定。

二、基本内容

药物的含量系指药物中所含主成分的量，是评价药物质量的重要指标。药物的含量测定则是运用化学、物理学或生物学及微生物学的方法测定药物的含量，它是评价药物质量的主要手段，也是药品质量标准的重要内容。药物的含量测定可分为两大类，即基于化学或物理学原理的“含量测定”和基于生物学原理的“效价测定”。其中，效价测定法（包括生物检定法、微生物检定法、酶法）的方法建立与验证过程各具特殊性，本章将主要探讨基于化学或物理学原理的“含量测定”。

可供药物含量测定的分析方法主要包括容量分析法、光谱分析法和色谱分析法。其中，容量分析法操作简便，结果准确，方法耐用性高，但方法缺乏专属性，主要适用于对结果准确度与精密度要求较高的样品测定；光谱分析法简便、快速，灵镦度高，并具有一定的准确度，但方法专属性稍差，主要适用于对灵敏度要求较高、样本量较大的分析项目；色谱分析法则具有高灵敏度与高专属性，并具有一定的准确度，但其结果计算需要对照品，本法主要适用于对方法的专属性与灵敏度要求较高的复杂样品的含量测定。

药物的含量测定所采用的分析方法一般要求操作简便，结果准确、重现。但对于药物的不同形式，其含量测定方法的选择依据有所侧重。对于化学原料药的含量测定，因为纯度较高、所含杂质较少，故强调测定结果的准确和重现，通常要求方法具有更高的准确度和精密度，首选容量分析法；对于药物制剂的含量测定，则因为制剂组分复杂、干扰物质多，且含量限度一般较宽，故更加强调方法的灵敏度和专属性或选择性，多采用具有分离能力的色谱分析法，在辅料不干扰测定时也可选用光谱分析法；而对于药物制剂的定量检查，如溶出度、含量均匀度检查中药物的溶出量或含量的测定，因为分析样本量较大、且限亦较宽，在辅料不干扰测定时宜选用光谱分析法。

无论采用何种方法对药物进行鉴别、检查和含量测定，为确保其分析结果的可靠性，要

求分析方法应准确、稳定、耐用。所以，需要对所建立的分析方法进行方法学验证。验 证内容包括：准确度、精密度、专属性、检测限、定量限、线性、范围和耐用性。

三、习题与解答

（一）最佳选择题

D1．紫外分光光度计的吸光度准确度的检定，中国药典规定 A．使用重铬酸钾水溶液 B．使用亚硝酸钠甲醇溶液 C．配制成5%的浓度 D．测定不同波长下的吸收系数 E．要求在220nm波长处透光率<0.8% B 2．反相色谱法流动相的最佳pH范围是

A.0 -2 B.2—8 C.8～10 D.10 ~12 E.12～14 E 3．高效液相色谱法色谱峰拖尾因子（对称因子）的计算公式是

A. ? 5 . 54 t R W h 2 B. n?16?tRW?n2??2

C. R? D.

2tR1?tR1W1?W2??R?2tR1?tR1??1.70??W1,h?W2,h??22??C4．气相色谱法最常用的检测器是

A．蒸发光散射检测器 B．二极管阵列检测器 C．火焰离子化检测器 D．电化学检测器 E．电子俘获检测器

A5．在较短时间内，在相同条件下，由同一分析人员连续测定所得结果的RSD称为 A．重复性 B．中间精密度 C．重现性 D．耐用性 E．稳定性 （二）配伍选择题 [6—8]

A．色谱柱的效能 B．色谱系统的重复性 C．色谱峰的对称性 D．方法的灵敏度 E．方法的准确度 下列色谱参数用于评价 A 6．理论板数

C 7．拖尾因子

B 8．色谱峰面积或峰面积比值的RSD [9—10]

A．检测限 B．定量限 C．准确度 D．精密度 E．线性 下列检验项目需要验证的内容是 A9．鉴别试验 A10.杂质限度检查 [11~14J

A．1 B．1.5 C．2.0 D，3 E．10 下列要求的限度为 D11.检测限要求信噪比 E12.定量限要求信噪比

B13.定量分析时要求色谱峰分离度应大于

C14.定量分析时色谱峰面积的重复性要求雕1D(%)不大于 （三）多项选择题

ABCE15.下列关于滴定度的说法，正确的是 A．滴定度是一种浓度形式，单位通常是mg/ml

B．滴定度系指每1ml规定浓度的滴定液所相当的被测物质的量（通常用mg表示） C．若口与6分别为被测物与滴定剂反应的摩尔比，m为被测物的分子量，T为 滴定液的摩尔浓度，则滴定度 T?mB? D．滴定度是分光光度法计算浓度的参数

E．滴定度可根据滴定反应及滴定液摩尔浓度与被测物分子量求得 ABCE 16.紫外一可见分光光度法用于含量测定的方法有 A．对照品比较法 B．吸收系数法 C．标准曲线法 D．灵敏度法 E．计算分光光度法 ACBE17. HPLC法常用的检测器有

A．紫外检测器 B．蒸发光散射检测器 C．电化学检测器 D．电子俘获检测器 E．质谱检测器 ABCDE18.药品质量标准分析方法验证的内容有

a?MAb A．准确度 B．重复性 C．专属性 D．检测限 E．耐用性 ABCDE19.下列分析方法准确度的说法，正确的是

A．准确度系指用该方法测定的结果与真实值或参考值接近的程度 B．准确度一般用回收率(%)表示

C．可用本法所得的结果与已知准确度的另一方法测定的结果进行比较验证 D．回收率 ?%??测得量?100（%）加入量 E．在规定范围内，至少用9个测定结果（3个浓度，每个浓度各3份）进行评价 （四）是非判断题

20.滴定度系指每Iml规定浓度的滴定液所相当的被测物质的量（通常用mg表示）( T ) 21.滴定度可根据滴定反应及滴定液摩尔浓度与被测物分子量求得( T )

1á 22.根据物质在特定波长处的吸收系数（cm）及供试溶液的吸光度可计算该溶液的

浓度( g/l00ml)( T )

23.紫外分光光度法使用有机溶剂时，测定波长不能小于截止使用波长( T ) 24.某些物质受紫外光或可见光照射激发后能发射出比激发光渡长较短的荧光( F ) 25.反相色谱系统使用极性填充剂，常用的色谱柱填充剂为化学键合硅胶( F )

26.精密度系指在规定的测试条件下，同一个均匀供试品，经多次取样测定所得结果之间的接近程度( T )

27.检测限是指试样中被测物能被准确测定的最低浓度或量( F ) （五）简答题

?V?V??F?T 100含量 28．请说明剩余量回滴法含量计算公式： ? % ? ? ? % 中形

0BSBBAW各符号的含义。

29.简述紫外分光光度法对溶剂的要求。 30.简述气相色谱法的进样方式 31.简述凯氏定氮法的原理与应用

32.简述氧瓶燃烧法用于含碘药物测定时的燃烧产物以及吸收液的选择 （六）计算题

33.用碘滴定液滴定维生素C，化学反应式为： C6H806+I2—C6H606 +2 HI

计算：碘滴定液(0. 05mol/L)对维生素C(M( C6H806) =176. 13J的滴定度。