病毒介导基因转移是现在基因治疗研究的最新方向,美、法等国成功采用腺病毒载体进行心、脑、肺、肝内胆管和肌肉组织的体内基因转移。其具体思路如下:
回答下列问题:
(1)如果要在短时间内获得较多的目的基因,通常采用___________技术,在操作步骤中包括两次升温和一次降温,其中降温的目的是_____________________。 (2)构建基因表达载体时需要用到的工具酶有_________。
(3)作为接受转移基因的体细胞应具有的特点是___________(写出一点即可)。在进行细胞培养时,当细胞贴满瓶壁时需用__________酶处理,使之分散成单个细胞,培养液中还需通人无菌气体,其中通入CO2的目的主要是___________________。
(4)如果检测发现目的基因被成功导入了受体细胞,但却没有检测到目的基因相对应的蛋白质,应考虑位于目的基因首端的________和末端的__________是否设计好,并从这方面进一步改善。