. 第一章 提取与分离技术

一、名词解释 1、机械破碎法 2、物理破碎法 3、温度差破碎法 4、压力差破碎法 5、超声波破碎法 6、渗透压变化法 7、化学破碎法

8、酶促（学）破碎法 9、自溶法 10、抽提 11、盐溶 12、盐析

13、沉淀分离法 14、分段盐析 15、KS分段盐析 16、β分段盐析 17、等电点沉淀法 18、有机溶剂沉淀法 19、复合沉淀法 20、金属盐沉淀法 21、选择性变性沉淀法 二、填空题

1、细胞破碎的方法有 、 和 。

2、机械破碎法按照使用机械的不同可分为 、 和 。 3、常用的物理破碎法有 、 和 等。 4、常用的压力差破碎法有 、 和 等。

5、化学破碎法采用的表面活性剂有 和 两种。其中之一按其带电荷性质又可分为 和 两种。

6、根据抽提时所采用的溶剂或溶液的不同。抽提的方法主要有 、 、 和 等 7、常用的沉淀分析法有 、 、 、 、 和 等。 8、常用的金属盐沉淀法有 和 。

9、蛋白质盐析时，带入大量盐离子杂质，可采用 、 和 方法脱盐。 10、要分离和提纯核酸过程中，常用 来沉淀DNA和RNA。

11、常用的使蛋白质沉淀的方法有 、 、 、 和 等。 12、

三、是非题（对的打√、错的打×）

1、渗透压变化法可用于革兰氏阳性菌的破碎。（ ）

2、有机溶剂破碎细胞主要是使细胞膜磷脂结构破坏，从而使细胞膜的透过性增强。（ ） 3、用化学法破碎细胞提取酶时，经常用离子型表面活性剂。（ ） 4、用化学法破碎细胞提取酶时，用非离子型表面活性剂最好。（ ）

5、对于具有细胞壁结构的细胞采用酶法破碎时，应根据细胞壁结构选择不同的酶。（ ）

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6、酸性物质易溶于酸性溶剂中，碱性物质易溶于碱性溶液中。（ ） 7、在等电点时两性电解质溶解度最小。（ ） 8、抽提两性电解质时应避开其等电点。（ ） 四、选择题

1、利用突然降压法破碎革兰氏阴性大肠杆菌应选择 期的细胞破碎效果最佳。 A 调整期 B 对数生长期 C 平衡期 D衰退期 2、提取膜结合酶采用 法破碎细胞最佳。

A 高压冲击法 B 突然降压法 C 渗透压变化法 3、超声波破碎法最适合于 破碎。

A 动物细胞 B 植物细胞 C 微生物细胞

4、利用超声波法破碎微生物细胞对 期的细胞破碎效果最佳。 A 调整期 B 对数生长期 C 平衡期 D衰退期 5、破碎革兰氏阳性菌选用 。

A 溶菌酶 B β-葡聚糖酶 C 几丁质酶 6、破碎酵母细胞选用 。

A 溶菌酶 B β-葡聚糖酶 C 几丁质酶 7、破碎霉菌选用 。

A 溶菌酶 B β-葡聚糖酶 C 几丁质酶

8、纤维素酶、半纤维素酶和果胶酶共用适合破碎 。 A 动物细胞 B 植物细胞 C 微生物细胞 9、胰蛋白酶可采用 提取。

A 盐溶液 B 酸溶液 C 碱溶液 D 有机溶剂 10、在提纯α-淀粉酶时，常采用 。

A 盐析沉淀法 B 有机溶剂沉淀法 C 复合沉淀法 D 选择性变性沉淀法 11、在DNA提取中起沉淀DNA作用的是 。

A、EDTA B、SDS C、酚 D、无水乙醇 五、简答题、

1、细胞破碎有哪些方法？

2、突然降压法破碎细胞的效果取决于哪几个因素？ 3、抽提有哪些方法？ 4、沉淀法有哪些？

5、蛋白质盐析沉淀时为什么选择中性盐硫酸铵？ 6、蛋白质用硫酸铵沉淀时应注意哪些事项？ 六、问答题

1、试论述影响有效成分抽提的因素。

2、试用三种或三种以上的方法分离RNA和DNA。

3、用以下原料试剂，设计一个实验来提取RNA（粗品） 原料：干酵母粉。

试剂：0.2%氢氧化钠溶液;乙酸;95%乙醇;无水乙醚 仪器; 自选,但必须为生化实验室常用仪器。

4、请设计一种方法来纯化真核细胞裂解液中的成熟mRNA。

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第二章 过滤与膜分离技术

一、名词解释 1、过滤 2、非膜过滤 3、粗滤 4、常压过滤 5、加压过滤 6、减压过滤 7、过滤速度 8、膜过滤 9、加压膜分离 10、微滤 11、超滤 12、反渗透 13、电场膜分离 14、扩散膜分离 15、流率 16、浓差极化 17、透析 二、填空题

1、根据过滤介质的不同，过滤可以分为 和 两种。

2、根据过滤介质截留物质颗粒大小不同，过滤分为 、 、 和 4大类。 3、非膜过滤主要包括 和 两类。

4、根据推动力产生的条件不同，过滤分为 、 和 3种。

5、根据物质颗粒或分子通过薄膜的原理和推动力的不同，膜拜分离可以分为 、 和

3大类。

6、根据所截留物质颗粒大小不同，加压膜分离可分为 、 和 3种。 7、电场膜主要包括 和 两类。 三、是非题（对的打√、错的打×） 1、所有的微滤都属于粗滤。（ ） 2、膜过滤中要防止浓差极化现象。（ ） 四、选择题

1、实验室和生产过程用的吊篮和吊袋过滤属于 。

A 常压过滤 B 加压过滤 C 减压过滤

2、实验室和生产中使用的各种真空抽滤机过滤属于 。

A 常压过滤 B 加压过滤 C 减压过滤 3、截留的主要物质是细胞的过滤属于 。

A 粗滤 B 微滤 C 超滤 D 反渗透 4、截留的主要物质是细菌和灰尘的过滤属于 。

A 粗滤 B 微滤 C 超滤 D 反渗透 5、截留的主要物质是病毒和生物大分子的过滤属于 。

A 粗滤 B 微滤 C 超滤 D 反渗透 6、截留的主要物质是生物小分子、盐、离子的过滤属于 。

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A 粗滤 B 微滤 C 超滤 D 反渗透 7、营养物质过滤除菌属于 。

A 粗滤 B 微滤 C 超滤 D 反渗透 8、海水淡化属于 。

A 粗滤 B 微滤 C 超滤 D 反渗透 五、简答题

1、请把过滤进行分类并说明每一类的主要特征。 2、影响过滤速度和效果的因素有哪些？ 六、问答题

1、论述电场膜分离的原理。

2、论述影响膜过滤流率的主要因素。

3、某一酶提取液，实验已证明在适宜条件下，它对底物有催化作用，用该酶制剂做如下实验： （1）取出上述提取液一部分，充分加热煮沸后，冷却至室温，在同等条件下，加底物，结果对底物无催化作用。为什么？

2）另一部分酶提取液置于透析袋内对蒸馏水充分透析，然后在同样条件下，进行酶反应实验，结果对底物也不起作用。为什么？

（3）如果将（1）中冷却溶液和（2）中透析袋中剩余物加在一起，混合后，在同样条件下用原底物试验，是否有催化活性？为什么？

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