态和运动可选用 显微镜,观察生物膜的内部结构可采用 法。
11、体外培养的细胞,不论是原代细胞还是传代细胞,呈现出两种基本形态即 和 。 三、选择题
1、由小鼠骨髓瘤细胞与某一B细胞融合后形成的细胞克隆所产生的抗体称( )。
A、单克隆抗体 B、多克隆抗体 C、单链抗体 D、嵌合抗体 2、要观察肝组织中的细胞类型及排列,应先制备该组织的( ) A、滴片 B、切片 C、涂片 D、印片 3、提高普通光学显微镜的分辨能力,常用的方法有( )
A、利用高折射率的介质(如香柏油)B、调节聚光镜,加红色滤光片 C、用荧光抗体示踪 D、将标本染色 4、适于观察培养瓶中活细胞的显微镜是( )
A、荧光显微镜 B、相差显微镜 C、倒置显微镜 D、扫描电镜 5、观察血细胞的种类和形态一般制备成血液( )
A、滴片 B、切片 C、涂片 D、印片 6、冰冻蚀刻技术主要用于( )
A、电子显微镜 B、光学显微镜 C、微分干涉显微镜 D、扫描隧道显微镜 7、分离细胞内不同细胞器的主要技术是( )
A、超速离心技术 B、电泳技术 C、层析技术 D、光镜技术 8、利用差速离心法可从动物组织匀浆中分离出下列哪种细胞器( ) A、溶酶体 B、细胞核 C、线粒体 D、质膜
9、Feulgen反应是一种经典的细胞化学染色方法,常用于细胞内( ) A、蛋白质的分布与定位 B、脂肪的分布与定位 C、DNA的分布与定位 D、RNA的分布与定位 10、要探知细胞内某一蛋白质的表达水平,可通过( )实现。
A、Southern 杂交 B、Northern 杂交 C、Western杂交 D、免疫荧光技术
11、流式细胞术可用于测定( )
A、细胞的大小和特定细胞类群的数量 B、分选出特定的细胞类群 C、细胞中DNA、RNA或某种蛋白的含量 D、以上三种功能都有 12、真核细胞和原核细胞的最主要区别是( )。
A、真核细胞具有完整的细胞核 B、原核细胞无核糖体 C、质膜结构不同 D、细胞形状不同 13、直接取材于机体组织的细胞培养称为( )。
A、 细胞培养 B、原代培养 C、 传代培养 D、细胞克隆 14、 扫描电子显微镜可用于( )。
A、获得细胞不同切面的图像 B、观察活细胞
C、定量分析细胞中的化学成分 D、观察细胞表面的立体形貌 15、建立分泌单克隆抗体的杂交瘤细胞是通过下列技术构建立( )。 A、细胞融合 B、核移植 C、病毒转化 D、基因转移 16、适于观察无色透明活细胞微细结构的光学显微镜是( )。
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A相差显微镜 B、暗视野显微镜 C、普通光学显微镜 D、偏振光学显微镜
17、动物细胞在体外培养条件下生长情况是( )。
A、能无限增殖 B、不能增殖分裂很快死亡 C、经过有限增殖后死亡 D、一般进行有限增殖后死亡,但少数情况下某些细胞发生了遗传突变,获得无限增殖能力
18、细胞融合首先采用的技术是( )介导的融合。 A、化学试剂 B、病毒 C、电融合 D、融合仪 19、细胞培养时,要保持细胞原来染色体的二倍体数量,最多可传代培养( )代。
A、10~20 B、40~50 C、20~30 D、90~100
20、正常细胞培养的培养基中常需加入血清,主要是因为血清中含有( )。 A、氨基酸 B、核酸 C、生长因子 D、维生素 21、cDNA是指( )。
A、细菌环状的DNA分子 B、质粒环状的DNA分子 C、tRNA的DNA拷贝 D、mRNA的DNA拷贝 22、在杂交瘤技术中,筛选融合细胞时常选用的方法是( )。 A、密度梯度离心法 B、荧光标记的抗体和流式细胞术 C、采用在选择培养剂中不能存活的缺陷型瘤系细胞来制作融合细胞 D、让未融合的细胞在培养过程中自然死亡
23、动物的正常细胞在体外培养条件下的生长行为是( )。 A、能无限增殖 B、在有充分营养条件下,能无限增殖 C、不能无限增殖,其增殖代数与物种和供体年龄有关
24、从胎儿肺得到的成纤维细胞可在体外条件下传50代,而从成人肺得到的成纤维细胞可在体外条件下传20代,这主要是因为( )。
A、胎儿的肺成纤维细胞没有完全分化 B、体内细胞生长环境在胎儿和成人不同 C、成人的肺成纤维细胞受到凋亡因子的影响 D、细胞增殖能力是受到年龄限制的
25、在普通光镜下可以观察到的细胞结构是( )。
A、核孔 B、核仁 C、溶酶体 D、核糖体
四、判断题
1、亚显微结构就是超微结构。( )
2、光学显微镜和电子显微镜的差别在于后者的放大倍数远远大于前者,所以能看到更小的细胞结构。( )
3、荧光显微镜技术是在光镜水平,对特异性蛋白质等大分子定性定位的最有力的工具。广泛用于测定细胞和细胞器中的核酸、氨基酸、蛋白质等。( ) 4、生物样品的电子显微镜分辨率通常是超薄切片厚度的十分之一,因而切得越薄,照片中的反差越强,分辨率也越高。( )
5、细胞株是指在体外培养的条件下,细胞发生遗传突变且带有癌细胞特点,有可能无限制地传下去的传代细胞。( )
6、透射或扫描电子显微镜不能用于观察活细胞,而相差或倒置显微镜可以用于观察活细胞。( )
6
7、酶标抗体法是利用酶与底物的特异性反应来检测底物在组织细胞中的存在部位。( )
8、光镜和电镜的切片均可用载玻片支持。( )
9、体外培养的细胞,一般仍保持机体内原有的细胞形态。( ) 10、细胞冻存与复苏的基本原则是快冻慢融。( ) 11、多莉的培育成功说明动物的体细胞都是全能的。( ) 五、简答题
1、超薄切片的样品制片过程包括哪些步骤? 2、荧光显微镜在细胞生物学研究中有什么应用? 3、比较差速离心与密度梯度离心的异同。
4、为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜? 5、相差显微镜在细胞生物学研究中有什么应用? 6、比较放大率与分辨率的含义。 7、扫描隧道显微镜具有哪些特点?
参考答案
一、名词解释
1、分辨率:区分开两个质点间的最小距离。
2、细胞培养:把机体内的组织取出后经过分散(机械方法或酶消化)为单个细胞,在人工培养的条件下,使其生存、生长、繁殖、传代,观察其生长、繁殖、接触抑制、衰老等生命现象的过程。
3、细胞系:在体外培养的条件下,有的细胞发生了遗传突变,而且带有癌细胞特点,失去接触抑制,有可能无限制地传下去的传代细胞。
4、细胞株:在体外一般可以顺利地传40—50代,并且仍能保持原来二倍体数量及接触抑制行为的传代细胞。
5、原代细胞培养:直接从有机体取出组织,通过组织块长出单层细胞,或者用酶消化或机械方法将组织分散成单个细胞,在体外进行培养,在首次传代前的培养称为原代培养。
6、传代细胞培养:原代培养形成的单层培养细胞汇合以后,需要进行分离培养(即将细胞从一个培养器皿中以一定的比率移植至另一些培养器皿中的培养),否则细胞会因生存空间不足或由于细胞密度过大引起营养枯竭,将影响细胞的生长,这一分离培养称为传代细胞培养。
7、细胞融合:两个或多个细胞融合成一个双核细胞或多核细胞的现象。一般通过灭活的病毒或化学物质介导,也可通过电刺激融合。
8、单克隆抗体:通过克隆单个分泌抗体的B淋巴细胞,获得的只针对某一抗原决定簇的抗体,具有专一性强、能大规模生产的特点。 二、填空题
1、光学放大系统,照明系统,机械和支架系统;光源的波长,物镜的镜口角,介质折射率。
2、紫外光;电子束。
3、物镜和照明系统的位置颠倒。 4、透射电镜,扫描电镜。 5、固定,包埋,切片,染色。
6、超速离心法,层析法,电泳法。
7
7、差速离心法,密度梯度离心法。 8、电磁,玻璃。 9、(小鼠骨髓)瘤细胞,B淋巴细胞;单克隆抗体。 10、相差显微镜;暗视野显微镜;冰冻蚀刻。 11、成纤维样细胞,上皮样细胞。
三、选择题 1、A,2、B,3、A,4、C,5、C,6、A,7、A,8、B,9、C,10、C,11、D,12、A,
13、B,14、D,15、A,16、A,17、C,18、B,19、B,20、C,21、D、22、C,23、C,24、D,25、D。
四、判断题 1、×,2、×,3、√,4、×,5、×,6、√,7、×,8、×,9、×,10、√,11、×。 五、简答题
1、超薄切片的样品制片过程包括哪些步骤? 答案要点:固定,包埋,切片,染色。
2、荧光显微镜在细胞生物学研究中有什么应用?
答案要点:荧光显微镜是以紫外线为光源,照射被检物体发出荧光,在显微镜下观察形状及所在位置,图像清晰,色彩逼真。
荧光显微镜可以观察细胞内天然物质经紫外线照射后发荧光的物质(如叶绿体中的叶绿素能发出血红色荧光);也可观察诱发荧光物质(如用丫啶橙染色后,细胞中RNA发红色荧光,DNA发绿色荧光),根据发光部位,可以定位研究某些物质在细胞内的变化情况。
3、比较差速离心与密度梯度离心的异同。 答案要点:二者都是依靠离心力对细胞匀浆悬浮扔中的颗粒进行分离的技术。差速离心是一种较为简便的分离法,常用于细胞核和细胞器的分离。因为在密度均一的介质中,颗粒越大沉降越快,反之则沉降较慢。这种离心方法只能将那些大小有显著差异的组分分开,而且所获得的分离组分往往不很纯;而密度梯度离心则是较为精细的分离手段,这种方法的关键是先在离心管中制备出蔗糖或氯化铯等介质的浓度梯度并将细胞匀浆装在最上层,密度梯度的介质可以稳定沉淀成分,防止对流混合,在此条件下离心,细胞不同组分将以不同速率沉降并形成不同沉降带。
4、为什么电子显微镜不能完全替代光学显微镜?
答案要点:电子显微镜用电子束代替了光束,大大提高了分辨率,电子显微镜相对光学显微镜是个飞跃。但是电子显微镜:样品制备更加复杂;镜筒需要真空,成本更高;只能观察“死”的样品,不能观察活细胞。光学显微镜技术性能要求不高,使用容易;可以观察活细胞,观察视野范围广,可在组织内观察细胞间的联系;而且一些新发展起来的光学显微镜能够观察特殊的细胞或细胞结构组分。因此,电子显微镜不能完全代替光学显微镜。 5、相差显微镜在细胞生物学研究中有什么应用?
答案要点:相差显微镜通过安装特殊装置(如相差板等)将光波通过样品的光程差或相差位转换为振幅差,由于相差板上部分区域有吸光物质,使两组光线之间增添了新的光程差,从而对样品不同同造成的相位差起“夸大作用”,样品表现出肉眼可见的明暗区别。相差显微镜的样品不需染色,可以观察活细胞,甚至研究细胞核、线粒体等到细胞器的形态。 6、比较放大率与分辨率的含义。
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