1. 有四种氨基酸，其解离常数分别为：

+

氨基酸 pK1(α-COOH) pK2(α-NH3) pK3(R) Cys 1.71 8.33 10.78 Glu 2.19 9.67 4.25 Arg 2.17 9.04 12.48 Tyr 2.20 9.11 10.07

问：⑴四种氨基酸的等电点分别是多少？

⑵四种氨基酸在pH=7的电场中各向哪个方向移动？

2.一种氨基酸的可解离基团可以带电或中性状态存在，这取决于它的pK值和溶液的pH。已知： pK(α-COOH)=1.82; pK(α-NH3+)=9.17; pK3(R)=6.0

（a）组氨酸有3种可解离基团，写出相应于每个pK 值的3种解离状态的平衡方程式。每种解离状态下的组氨酸分子的净电荷是多少？

（b）在pH1、4、8和12时，组氨酸的净电荷分别是多少？将每一pH下的组氨酸置于电场中，它们将向阴极还是阳极迁移？

3.胃液（pH＝1.5）的胃蛋白酶的等电点约为1，远比其它蛋白质低。试问等电点如此低的胃蛋白酶必须存在有大量的什么样的官能团？什么样的氨基酸才能提供这样的基团？

4.利用阳离子交换层析分离下列每一对氨基酸，哪一种氨基酸首先被pH7缓冲液从离子交换柱上洗脱出来。 （a）Asp和Lys（b）Arg和Met

5．下列试剂和酶常用于蛋白质化学的研究中：

CNBr 异硫氰酸苯酯 丹黄酰氯 脲 6mol/LHCl β-巯基乙醇 水合茚三酮 过甲酸 胰蛋白酶 胰凝乳蛋白酶 其中哪一个最适合完成以下各项任务？ （a）测定小肽的氨基酸序列。 （b）鉴定肽的氨基末端残基。

（c）不含二硫键的蛋白质的可逆变性。若有二硫键存在时还需加什么试剂？

（d）在芳香族氨基酸残基羧基侧水解肽键。 （e）在蛋氨酸残基羧基侧水解肽键。 （f）在赖氨酸和精氨酸残基侧水解肽键。

6．已知某蛋白是由一定数量的链内二硫键连接的两个多肽链组成的。1.00g该蛋白样品可以与25.0mg还原型谷胱甘肽（GSH，MW＝307）反应。

（a）该蛋白的最小分子量是多少？

（b）如果该蛋白的真实分子量为98240，那么每分子中含有几个二硫键？

（c）多少mg的巯基乙醇（MW＝78.0）可以与起始的1.00g该蛋白完全反应？

7、已知某七肽组成是Ala 5、Lys 1、Phe 1，与2，

4-二硝基氟苯（DNFB）反应后再酸解产生一个游离的DNP- Ala；用胰蛋白酶水解得到一个三肽：Lys 1、Ala 2和一个四肽：Ala 3、 Phe 1；整个七肽用糜蛋白酶水解生成一个六肽和一个游离的氨基酸，写出该七肽的结构。（写出具体分析过程）

8．某肽经CNBr水解得到三个肽段，这三个肽的结构分别是：Asn-Trp-Gly-Met，

Gly-Ala-Leu，Ala-Arg-Tyr-Asn-Met；用胰凝乳蛋白酶水解此肽也得到三个肽段，其中一个为四肽，用6mol/L盐酸水解此四肽只得到（Asp）2和Met三个氨基酸，问此肽的氨基酸排列顺序如何？（写出分析过程）

9、由下列信息求八肽的顺序：（写出分析过程） （a）用酸水解得：Ala、Arg、Leu、Met、Phe、Thr、2Val；

（b）用Sanger试剂处理得：DNP-Ala； （c）用胰蛋白酶处理得：Ala、Arg、Thr和Leu、

Met、Phe、2Val，当用Sanger试剂处理该二肽段时，分别得到DNP-Ala和DNP- Val； （d）用CNBr处理得Ala、Arg、高丝氨酸内酯、

Thr、2Val和Leu、Phe，当用Sanger试剂处理该二肽段时，分别得DNP-Ala和DNP- Leu。

10、以下是八肽水解结果，根据条件确定八肽顺序。已知氨基酸组成：Ala、Gly、Lys、Met、Ser、Thr和Tyr。（写出分析过程） （Ⅰ）用CNBr裂解得：（1）Ala、Gly、Lys、