实验1 酶的特性

一、实验目的

1、了解pH、温度对酶活力的影响。 2、加深对酶性质的认识 二、实验原理

酶的特点之一对环境酸碱度敏感，酶表现最大活力时的pH值称为酶的最适pH值，一般酶的最适pH值在4～8之间；酶的催化作用受温度的影响很大，反应速度达到最大值时的温度称为酶的最适温度。大多数动物酶的最适温度为37～40℃，大多数植物酶的最适温度为50～60℃，有些酶的干燥制剂，虽加热到100℃其活性无明显变化，但在100℃的溶液中却很快的完全失活；低温能降低或抑制酶的活性，但不能使酶失活。

淀粉与各级糊精遇碘呈现不同的颜色。在不同pH、温度以及激活剂、抑制剂存在下，唾液淀粉酶对淀粉水解活力的高低可通过水解混合物遇碘呈现颜色的不同来判断。 三、器材及试剂

1、器材： 恒温水浴锅 、pH试纸等

2、试剂：

新配制的溶于0.3％NaCl的0.5％淀粉溶液； 0.2mol／L Na2HPO4溶液、0.1mol／L柠檬酸溶液

KI－碘溶液：将碘化钾20克及碘10克溶于100ml蒸馏水中，使用前稀释10倍；

3、材料：唾液淀粉酶溶液：用矿泉水漱口清除食物残渣，再含一口矿泉水，半分钟后流入量筒并稀释200倍（稀释倍数可调节），混匀备用。 四、实验步骤

1. 温度对酶活力的影响——最适温度测定

温度对淀粉酶活力的影响：取试管5支，编号后按下表加入试剂： 试剂 管号 0.5%淀粉液（0.3%氯化钠）ml 1 2 0℃ 2 2 室温 3 2 37℃ 4 2 50℃ 5 2 65℃ 温度（℃） 唾液淀粉酶（ml） 各保温5分钟 1 1 1 1 1 混匀后，置响应温度保温10分钟 KI-I2溶液 （滴） 记录颜色变化 1 1 1 1 1

摇匀，将2号试管放入37℃恒温水浴中，1号试管放入冰水中,3号管放入沸水浴。用KI－碘溶液检验各管内淀粉被水解的程度。记录水解时间。

2.pH值对酶活力的影响 （1）反应时间的确定

取一支试管加入2ml 0.5%淀粉液（0.3%氯化钠）和2滴KI-I溶液，加入1ml唾液淀粉酶，37℃保温，记录颜色褪去的时间。 （2）取试管3支，标号，按下表调pH 试 剂 锥形瓶号 0.2mol/L Na2HPO4（ml） 1 2 3 5.15 7.72 9.72 0.1mol/L柠檬酸（ml） 4.85 2.28 0.28 缓冲液pH 5.0 6.8 8.0

然后按下表所列的次序操作：

管号 1 2 3 试剂 1%淀粉溶液（ml） 3.0 3.0 3.0 缓冲溶液 Ph5 2.0 — pH6.8 2.0 pH8 — 2.0 唾液淀粉酶（ml） 1.0 1.0 1.0 现象 摇匀后放入37℃恒温水浴锅中保温,检测淀粉水解程度,并测定淀粉完全水解所需的时间。按照第（1）步试管的保温时间保温后将各管迅速取出，并立即加入KI－碘溶液1滴。观察各管呈现的颜色，观察pH对唾液淀粉酶活力的影响，并确定其最适pH。

五、实验结果与分析

记录实验现象，分析pH值、温度对酶活力的影响 六、思考题

1. 什么是酶的最适温度？有何实践意义？

2. 什么是酶的最适pH？它是否是一个常数？它与哪些因素有关？这种性质对于选择测定酶活力的条件有什么意义？

实验报告内容 题目 一 实验目的 二 实验原理

三 实验器材 1 材料 2 仪器 3 试剂 四 实验步骤 1、2、3、4 ……… 五 实验记录 六 结果分析 七 实验小结 八 实验思考 参考文献格式：

[1] 冯道伦.微生物絮凝剂的制备及其絮凝机理的研究［D］．武汉理工大学硕士学位论文，2002,1. [2] 马青山，贾琴，孙丽氓.絮凝化学和絮凝剂［M］.中国环境科学出版社.1988,3.

[3] 朱丹，杨琳，苏鸿雁.洱海底泥絮凝剂产生菌分离及培养条件优化研究［J］．大理学院学报，2010，9

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