1.你认为样品制备和显微观察中（光镜和电镜）应通过哪些方法改变样品的反差以改善观察效果？
标准答案: 光学显微镜：对样品染色后改善反差； 更换聚光器和物镜，使用暗视野显微镜、相差显微镜 使用荧光显微镜时针对不同的目标选用不同的荧光染料 在相同条件下适当降低照明亮度 电子显微镜：扫描电镜在进行样品制备时喷金 透射电镜对样品进行负染、正染 透射电镜用投影法制样
2.为什么在微生物学奠基后的数十年时间内，人们认为微生物学与普通生物学之间没有关系？二者是怎样实现交叉、融合的？
微生物学和普通生物学都是在19世纪中叶奠基； 但二者的研究方法和研究兴趣完全不同 由于个体微小，对微生物的研究需要借助显微镜及注重微生物的群体，而以动植物为主要对象的普通生物学在研究时可以不借助显微镜，可以方便地对个体甚至个体的部分结构进行观察和研究
二者的研究兴趣也完全不同：
微生物学：寻找感染疾病的致病因子、免疫及疾病防治；寻找新的化学治疗药物、微生物代谢研究等。也就是更注重微生物对人类生活的影响及应用
普通生物学：高等动植物细胞的结构与功能、动植物的生态学、繁殖和发育、遗传以及进化等。也就是更加注重对生命基本活动规律的理论研究。 由于微生物个体十分微小，人们甚至怀疑动植物的生命活动规律是否适用于结构大大简单的微生物？
这使得二者之间并无交叉。
20世纪上半叶，下列三个方面的研究进展使人们认识到微生物在生命本质上与动植物并无差别，推动了微生物学和普通生物学的交叉、融合。微生物也由于其结构简单、生长迅速、易于培养等特点逐渐成为研究很多基本生命活动规律的材料，成为生命科学研究的明星 1）肌肉的糖酵解和酵母菌乙醇发酵在本质上具有同一性；
2）动物需要的维生素和某些微生物生长需要的生长因子相同的化学本质上述研究使人们认识到一切生命系统在代谢水平上具有相同的本质，所有的生命形式具有“生物化学的同一性” 3）生化突变可以用微生物遗传标记，以及细菌间水平基因转移途径的发现导致了微生物遗传学的建立，进一步的研究证实动植物的遗传规律同样适用于微生物。用微生物为材料进行的肺炎双球菌转化实验、病毒重组实验、噬菌体感染实验证实了核酸是遗传的物质基础，也标志着微生物学与普通生物学的汇合、交叉，微生物学被推到了整个生命科学发展的前沿，获得了迅速的发展，在生命科学的发展中作出了巨大的贡献。 1.培养微生物的常用器具中，（ ）是专为培养微生物设计的。 A. 平皿 B. 试管 C. 烧瓶 D. 烧杯
标准答案: A
2.（ ）可用来分离培养出由科学家设计的特定环境中能生长的微生物，尽管我们并不知道什么微生物能在这种特定的环境中生长。 A. 选择平板 B. 富集培养
C. 稀释涂布
D. 单细胞显微分离
标准答案: B
3.下面哪一项不属于稀释倒平板法的缺点? （ ） A. 菌落有时分布不够均匀 B. 热敏感菌易被烫死
C. 严格好氧菌因被固定在培养基中生长受到影响 D. 环境温度低时不易操作 标准答案: A
4.对光学显微镜观察效果影响最大的是（ ）。 A. 目镜 B. 物镜 C. 聚光器
D. 总放大倍数
标准答案: B
5.暗视野显微镜和明视野显微镜的区别在于（ ）。 A. 目镜 B. 物镜 C. 聚光器 D. 样品制备 标准答案: C
6.相差显微镜使人们能在不染色的情况下，比较清楚地观察到在普通光学显微镜和暗视野显微镜下都看不到或看不清的活细胞及细胞内的某些细微结构，是因为它改变了样品不同部位间光的（ ），使人眼可以察觉。 A. 波长 B. 颜色 C. 相位 D. 振幅
标准答案: D
7.当今，一种新的瘟疫正在全球蔓延，它是由病毒引起的（ ） A. 鼠疫 B. 天花
C. 艾滋病(AIDS) D. 霍乱
标准答案: C
8.公元9世纪到10世纪我国已发明（ ）
A. 曲蘖酿酒 B. 用鼻苗法种痘 C. 烘制面包 D. 酿制果酒 标准答案: D
9.安东·列文虎克制造的显微镜放大倍数为（ ）倍，利用这种显微镜，他清楚地看见了细菌和原生动物 A. 50 B. 10 C. 2 D. 500
标准答案: A
10.巴斯德为了否定“自生说”，他在前人工作的基础上，进行了许多试验，其中著名的（ ）无可辩驳地证实：空气中确实含有微生物，它们引起有机质的腐败 A. 厌氧试验 B. 灭菌试验 C. 曲颈瓶试验 D. 菌种分离试验
标准答案: C
三、判断正误（共有题目9题,共计9.0分）
1.为了防止杂菌，特别是空气中的杂菌污染，试管及玻璃烧瓶都需采用适宜的塞子塞口，通常采用棉花塞，也可采用各种金属、塑料及硅胶帽，并在使用前进行高温干热灭菌。 A.正确 B.错误
标准答案: B
2.所有的微生物都能在固体培养基上生长，因此，用固体培养基分离微生物的纯培养是最重要的微生物学实验技术。 A.正确 B.错误
标准答案: B
3.所有的培养基都是选择性培养基。 A.正确 B.错误
标准答案: A
4.直接挑取在平板上形成的单菌落就可以获得微生物的纯培养。 A.正确
B.错误
标准答案: B
5.光学显微镜的分辨率与介质折射率有关，由于香柏油的介质折射率（约1.5）高于空气（1.0），因此，使用油镜的观察效果好于高倍镜，目前科学家正在寻找折射率比香柏油更高的介质以进一步改善光学显微镜的观察效果。 A.正确 B.错误
标准答案: B
6.与光学显微镜相比，电子显微镜的分辨率虽然有很大的提高，但却无法拍摄彩色照片。 A.正确 B.错误
标准答案: A
7.微生物是人类生存环境中必不可少的成员，有了它们才使得地球上的物质进行循环，否则地球上的所有生命将无法繁衍下去 A.正确 B.错误
标准答案: A
8.当今研究表明：所有的细菌都是肉眼看不见的 A.正确 B.错误
标准答案: B
9.微生物个体小、结构简单、生长周期短，易大量繁殖，易变异等特性，因而与动、植相比，十分难于实验操作 A.正确 B.错误
标准答案: B
四、名词解释（共有题目6题,共计12.0分） 1.无菌技术
器具和培养基不含任何微生物；在转接、培养时防止其它微生物的污染，被操作的微生物培养物自身也不污染环境； 2.二元培养物 标准答案:
培养物中只含有二种微生物，而且有意识地保持二者之间的特定关系，例如寄生或捕食（或直接举病毒－细胞等的例子），是微生物纯培养的一种方式 3.Petri dish 标准答案:
Petri培养皿，上下互扣的培养微生物的装置。Petri是发明者的名字。 4.Culture plate 标准答案:
培养平板或者平板，在平皿中装有固体培养基 是指固体培养基倒入无菌平皿，冷却凝固后，盛固体培养基的平皿。 5.streak plate method 标准答案:
平板划线法，用接种环以无菌操作沾取少许待分离的材料，在无菌平板表面进行平行划线、扇形划线或其他形式的连续划线，微生物细胞数量将随着划线次数的增加而减少，并逐步分散开来，如果划线适宜的话，微生物能一一分散，经培养后，可在平板表面得到单菌落。
6.（生命）自然发生说
标准答案: 生命是从没有生命的物质中自然产生的
五、简答题（共有题目4题,共计24.0分）
1.试分析比较用固体培养基获得微生物纯培养各方法的特点。 标准答案:
稀释倒平板法，细菌分离效果好，但相对操作麻烦，不利于热敏感菌和好氧菌的生长
涂布平板法，方便，但有时涂布不均匀
平板划线法，方便，但无法进行计数
稀释摇管，对厌氧菌进行纯培养分离，操作和观察均相对麻烦
选择平板，利用选择性培养条件（例如加抗生素，或用牛奶平板）较快地分离获得目的菌
2.Lister是从哪里得到启发而建立消毒外科术的？从微生物学角度来对该技术进行分析和讨论。其理论和实践在哪里行业也可得到应用（请至少举2例说明）？ 标准答案: （受到启发）：受到巴斯德（Luis Pasteur）“空气中的微生物导致了食物腐败”学说的启发，李斯特怀疑手术伤口的化脓发炎也是微生物引起的。进而他尝试将大剂量的饱和石炭酸溶液注入伤口进行消毒。尤其令他自豪的是，在他坚持定期用石炭酸处理病人伤口后，病人不再出现坏疽现象。他的研究为细菌致病理论提供了有力的证据，尽管直到十年后，各种疾病与其致病菌之间的关系才被一一确定。
（从微生物学角度分析、讨论）：消毒外科术就是无菌操作技术。由于自然界中微生物无处不在，因此外科手术的创口十分容易受到微生物感染。消毒外科术通过无菌操作技术来避免微生物的污染，可以大大减少微生物引起伤口感染的几率，提高外科手术成功率。
（拓展的行业）：制药行业、食品行业，发酵工厂，等等
3.在没有专门的厌氧培养设备的情况下是否有可能分离获得厌氧菌？请描述基本的实验操作流程，以及如何证实所分到的确实为厌氧菌。
可以
使用稀释摇管法
方法：制备高层琼脂柱，灭菌后在50度左右保温，保持其处于融化状态，用琼脂培养基对样品进行梯度稀释并适当混匀，加盖石蜡封口，防止空气中的氧气重新溶回培养基。适当温度培养，在合适稀释度的试管琼脂柱中出现的相互分离的单菌落可能是厌氧菌或者兼性厌氧菌。
挑取适当的单菌落，分别重新接种到石蜡封口的高层琼脂柱中以及培养平板上，培养后如果细菌在二种情况下都生长，则为兼性厌氧菌，如果在琼脂柱中生长但在平板上不长，则为厌氧菌。
4.微生物世界由哪些基本的生物类群构成？ 标准答案: 没有细胞结构的：病毒 原核微生物：细菌、古生菌
真核微生物：真菌（酵母、霉菌、覃菌）、原生动物、单细胞藻类 其中“真菌（酵母、霉菌、覃菌）”
一、问答题（共有题目3题,共计45.0分）
1.试分析大肠杆菌、粘细菌、蛭弧菌、放线菌、霉菌、酵母在个体形态、繁殖方式上各有什么特点？ 标准答案:
大肠杆菌：单细胞，杆状，二分裂方式繁殖
粘细菌：营养细胞为单细胞杆状，可形成多个细胞聚集成的子实体、其中有粘胞子，以二分裂方式繁殖，粘胞子只是休眠结构，子实体结构则有利于粘胞子的传播
蛭弧菌：细胞杆状，呈不足一圈的弯曲（弧状），鞭毛偏端生，多为单根鞭毛（偏端单生），行寄生生活时以复分裂方式繁殖。
放线菌：单细胞，多由分枝发达的菌丝组成，有基内菌丝（营养菌丝）、气生菌丝、孢子丝（繁殖菌丝）三种，以无性孢子和菌丝短片方式繁殖
霉菌：分枝发达的菌丝组成，有基内菌丝（营养菌丝）、气生菌丝、孢子丝（繁殖菌丝）三种，有些霉菌的菌丝会可形成特化结构，以无性孢子、有性孢子、和菌丝短片方式繁殖
酵母菌：单细胞，圆形或椭圆形，也有可形如丝状的酵母（丝状酵母），以芽殖、裂殖二种方式进行无性繁殖，以形成子囊和子囊孢子的形式进行有性繁殖：
2.观察、判断某个细菌是否具有鞭毛有些什么方法？请设计实验证实鞭毛与细菌运动能力以及细菌趋化性之间的关系
观察、判断某个细菌是否具有鞭毛的方法 电子显微镜观察 鞭毛染色观察
显微镜下观察细菌的运动方式进行判断
半固体穿刺观察细菌菌落沿穿刺线分布情况进行判断，或将菌点种在半固体平板上观察菌落的扩散情况
基因组测序，分析是否存在鞭毛相关基因。
设计实验证实鞭毛与细菌运动能力以及细菌趋化性之间的关系 将鞭毛相关基因敲除分别得到突变株和野生型菌株，
后用上述显微镜和半固体培养基比较突变株和野生菌的运动能力改变 用栓菌实验（将鞭毛固定在载破片）证实鞭毛通过旋转推动细菌前进 将鞭毛固定在小球上后观察鞭毛旋转方向对其运动性的影响 将分别含有中性物质，引诱剂、趋避剂的毛细管插入三个细胞浓度相同的野生型菌株培养液中，一段时间后比较毛细管中和原培养液中细菌浓度的差异 上述实验用鞭毛缺失突变株进行同样实验，比较结果的差异
二、单项选择题（共有题目10题,共计10.0分） 1.（ ）不是鉴别染色。 A. 抗酸性染色 B. 革兰氏染色 C. 活菌染色 D. 芽孢染色
标准答案: C
2.细菌的下列哪项特性一般不用作对细菌进行分类、鉴定? （ ） A. 球菌的直径
B. 球菌的分裂及排列 C. 杆菌的直径
D. 杆菌的分裂及排列
标准答案: D
3.当今世界上使用最多和最广泛的生物杀虫剂是（ ），它对鳞翅目、双翅目、膜翅目、鞘翅目及直翅目中的200多种昆虫都有毒杀作用。 A. 病毒杀虫剂
B. 苏云金芽孢杆菌杀虫剂 C.真菌杀虫剂
D. 金龟子芽孢杆菌杀虫剂
标准答案: B
4.G－细菌细胞壁的最内层成分是（ ）。 A. 磷脂 B. 肽聚糖 C. 脂蛋白 D. LPS
标准答案: B
5.G＋细菌细胞壁中不含有的成分是（ ）。 A. 类脂
B. 磷壁酸 C. 肽聚糖 D. 蛋白质
标准答案: D
6.肽聚糖种类的多样性主要反映在（ ）结构的多样性上。 A. 肽桥 B. 黏肽 C. 双糖单位 D. 四肽尾
标准答案: A
7.磷壁酸是（ ）细菌细胞壁上的主要成分。 A. 分枝杆菌 B. 古生菌 C. G＋ D. G－
标准答案: C
8.脂多糖（LPS）是G－细菌的内毒素，其毒性来自分子中的（ ）。 A. 阿比可糖 B. 核心多糖 C. O特异侧链 D. 类脂A
标准答案: D
9.用人为的方法处理G－细菌的细胞壁后，可获得仍残留有部分细胞壁的称作（细菌。
A. 原生质体 B. 支原体 C. 球状体 D. L型细菌
标准答案: C
10.固氮菌所特有的休眠体构造称为（ ）。 A. 孢囊 B. 外生孢子 C. 黏液孢子 D. 芽孢
标准答案: A
三、判断正误（共有题目9题,共计9.0分） 1.霉菌、酵母菌均是没有分类学意义的普通名称。 A.正确
）的缺壁
B.错误
标准答案: A
2.苏云金芽孢杆菌的杀虫机制主要是靠其芽孢和伴胞晶体。当昆虫吞食伴胞晶体后，在肠道中的碱性条件下，伴胞晶体被分解出毒素的前体，再在肠中特异性的碱性蛋白酶作用下，水解出毒性多肽，造成钠离子和钾离子的“调节泵”失去作用，细胞代谢停止，昆虫死亡。 A.正确 B.错误
标准答案: A
3.古生菌也是一类原核生物。 A.正确 B.错误
标准答案: A
4.G＋细菌的细胞壁，不仅厚度比G－细菌的大，而且层次多、成分复杂。 A.正确 B.错误
标准答案: B
5.在G＋和G－细菌细胞壁的肽聚糖结构中，甘氨酸五肽是其肽桥的常见种类。 A.正确 B.错误
标准答案: B
6.磷壁酸只在G＋细菌的细胞壁上存在，而LPS 则仅在G－细胞壁上存在。 A.正确 B.错误
标准答案: A
7.古生菌细胞壁假肽聚糖上的糖链与真细菌肽聚糖的糖链一样，都可以被溶菌酶水解。 A.正确 B.错误
标准答案: B
8.着生于G－细菌细胞膜上的孔蛋白，是一种可控制营养物被细胞选择吸收的蛋白质。 A.正确 B.错误
标准答案: B
9.假肽聚糖只是一部分古生菌所具有的细胞壁成分。 A.正确 B.错误
标准答案: A
四、名词解释（共有题目6题,共计12.0分） 1.Archaea
标准答案:
古生菌，根据16 S rRNA序列建立的与细菌和真核生物并列的一种微生物分类单元。如果不写古生菌或古菌则本题为0分 2.周质空间 标准答案:
细胞膜和细胞壁间的狭小空间，多见于革兰氏染色阴性细菌，也有人认为革兰氏染色阴性和阳性菌均有 3.原生质球 标准答案:
革兰氏阴性菌，通过溶菌酶等处理去掉细胞壁中的肽聚糖层，但细胞膜外仍保留有外膜，呈球形 4.假酵母 标准答案:
真核生物的单细胞真菌，即酵母菌，但目前尚未发现有性生殖过程 5.prosthecate bacteria
标准答案: 柄细菌（柄杆菌），细胞呈杆状或梭状，并有特征性的细柄的一类细菌。细胞上有柄（stalk）、菌丝（hyphae）、附器（appendages）等细胞质伸出物， 一般生活在淡水中固形物的表面，其异常形态使得菌体能有效地吸附在颗粒表面，吸收有限的营养物； 6.Lipopolysaccharide（LPS）
标准答案: 脂多糖，位于革兰氏阴性细菌细胞壁最外层的一层较厚（8~10nm）的类脂多糖类物质，由类脂A、核心多糖(core polysaccharide)和O-特异侧链（O-specific side chain，或称O-多糖或O-抗原）三部分组成。
五、简答题（共有题目4题,共计24.0分）
1.请结合细胞壁结构分析革兰氏染色阳性和革兰氏染色阴性细菌的特点 标准答案:
阳性菌的细胞壁成分简单，肽聚糖层厚，阴性菌的细胞壁成分复杂，肽聚糖层薄，同时有以脂多糖为主要成分的外膜
1）革兰氏染色阳性菌的机械强度高于阴性菌 2）阳性菌对青霉素的敏感性大于阴性菌 3）阳性菌对溶菌酶的敏感性大于阴性菌
4）阴性菌产生内毒素，而阳性菌一般无内毒素，有些产生外毒素
2.请列举并简要分析至少6个有助于细菌适应环境的细胞结构 标准答案:
鞭毛－驱避运动
菌毛－粘附作用帮助细菌定殖在特定部位
糖被－提供保护以及粘附作用帮助细菌定殖在特定部位 细胞壁－提供机械保护
细胞膜－膜成分（例如磷脂的不饱和脂肪酸含量）的多样性反映了细菌对不同环境的适应 颗粒状储藏物－储藏营养、调节细胞内环境 气泡－帮助水生细菌调节在水中的位置 3.细菌和古生菌细胞壁在结构上有何异同？ 标准答案:
相同：细胞壁的功能类似，即为细胞提供保护，且均可通过革兰氏染色分成阳性菌和阴性菌
革兰氏染色阳性细菌和古生菌的细胞壁结构类似，均具有结构类似的肽聚糖，即由双糖单位和短肽构成
不同：古生菌的肽聚糖为假肽聚糖，双糖单位之间的连接是b-1,3糖苷键，而细菌的肽聚糖双糖单位间是b-1,4糖苷键
革兰氏染色阴性细菌的细胞壁含有外膜，革兰氏阴性古生菌细胞壁仅由S层蛋白构成（S层蛋白直接连在细胞膜表面）
4.试分析、比较放线菌和霉菌的异同点
标准答案: 型态类似，都有基内菌丝、营养菌丝、气生菌丝（繁殖丝）组成个体大小相差悬殊放线菌只有无性生殖，霉菌既有无性生殖，也有有性生殖
1.试结合微生物学实验课的内容，谈谈在选择、配制和使用培养基时应注意哪些方面的内容。你们在实验中是如何做的？有何体会？
标准答案: 培养基：人工配制的，适合微生物生长繁殖或产生代谢产物的营养基质。任何培养基在配置时都应该考虑微生物生长所需要六大营养要素：碳源、氮源、无机盐、能源、生长因子、水任何培养基一旦配成，必须立即进行灭菌处理，主要的灭菌方法：整体常规高压蒸汽灭菌，相关成分分开灭菌，有些成分或整个培养基过滤灭菌，分开灭菌的成分在临用前混合。在微生物学研究和生产实践中，配制合适的培养基是一项最基本的要求。应从下列三个方面进行考虑： 1、选择适宜的营养物质 2、营养物的浓度及配比合适 3、物理、化学条件适宜 4、经济节约 5、精心设计、试验比较
2.化能自养微生物是如何被发现的？试从代谢角度分析化能营养菌对人类生活的影响。 标准答案: 通过对硫细菌和氨氧化菌的研究发现的 通过观察硫细菌胞内硫粒的消失和重新出现，以及检测水中硫酸的产生 通过观察土壤灭菌前后氧化氨产生硝酸盐的差别 化能异养： 有氧呼吸：在有氧情况产生能量的主要方式，产生能量效率高，我们日常生活中遇到的很多细菌都是以这种方式生活 无氧呼吸：在无氧情况下依然通过氧化磷酸化过程产生能量，有较高的产能效率。对人类生活有正反二方面的影响，例如反硝化作用以硝酸盐作为最终电子受体进行厌氧呼吸，该过程可将农田中的盐酸盐变成氮气减少土壤肥力，一般可通过松土、排除多余水分等方式减低影响。另一方面，硝酸盐容易溶于水，常通过雨水流入水体，反硝化作用可使水中的硝酸盐以氮气的方式重返大气，使地球上N的循环不致中断，并保证水质。 发酵：在对物质氧化产生能量的过程中没有外源电子受体，产能效率较低，但可产生很多有用的产品，例如酒精。不同的发酵产物也可作为分类鉴定的指标，例如VP试验、甲基红试验，产酸产气试验等 化能自养 通过对无机物的氧化来获得能量，产能效率总体较低，菌体生长较慢。这类菌对我们的生活也有正反二方面的影响。例如：铁细菌以二价铁为能源物质生长，会造成铁质水管产生大量铁锈，影响水质甚至堵塞管道，氧化亚铁硫杆菌以煤矿中常见的黄铁矿（硫化亚铁）为能源物质生长，产生大量的酸和三价铁，造成环境污染。同时，该菌可用于生物冶金，从尾矿、贫矿中提炼贵重金属。
3.近年来是什么原因导致抗生素不敏感的抗性菌株的增多？有何对策来减少抗性菌出现的几率？ 标准答案:
对抗生素抗性菌株出现的原因：
① 细胞质膜透性改变使药物不能进入细胞；
② 药物进入细胞后又被细胞膜中的移位酶等泵出胞外； ③ 细菌产生了能修饰抗生素的酶使之失去活性；
④ 药物作用靶发生改变从而对药物不再具有敏感性；
⑤ 菌株改变代谢途径以绕过受药物抑制的过程或增加靶代谢物的产物。 减少抗性菌出现几率的对策：
(1)第一次使用的药物剂量要足（用药时间足）； (2)避免在一个时期或长期多次使用同种抗生素； (3)不同的抗生素(或与其他药物)混合使用； (4)对现有抗生素进行改造； (5)筛选新的更有效的抗生素；
二、单项选择题（共有题目10题,共计10.0分） 1.下列物质可用作生长因子的是（ ）。 A. 葡萄糖 B. 纤维素 C. NaCl
D. 叶酸 标准答案: D
2.大肠杆菌属于（ ）型的微生物。 A. 光能无机自养 B. 光能有机异养 C. 化能无机自养 D. 化能有机异养 标准答案: D
3.蓝细菌和藻类属于（ ）型的微生物。 A. 光能无机自养 B. 光能有机异养 C. 化能无机自养 D. 化能有机异养 标准答案: A
4.硝化细菌属于（ ）型的微生物。 A. 光能无机自养 B. 光能有机异养 C. 化能无机自养 D. 化能有机异养 标准答案: C
5.一般细菌适宜的生长pH为（ ）。 A. 5.0~6.0 B. 3.0~4.0 C. 8.0~9.0 D. 7.0~7.5 标准答案: D
6.无氧呼吸中呼吸链末端的氢受体是（ ）。 A. 还原型无机化合物
B. 氧化型无机化合物 C. 某些有机化合物
D. 氧化型无机化合物和少数有机化合物 标准答案: D
7.厌氧微生物进行呼吸吗（ ） A. 进行呼吸，但是不利用氧气
B. 不进行呼吸，因为呼吸过程需要氧气
C. 不进行呼吸，因为它们利用光合成作用生成所需ATP D. 不进行呼吸，因为它们利用糖酵解作用产生所需ATP 标准答案: A
8.延胡索酸呼吸中，（ ）是末端氢受体。 A. 琥珀酸 B. 延胡索酸 C. 甘氨酸 D. 苹果酸 标准答案: B 9.磺胺属于（）
A 消毒剂；B 防腐剂； C 抗代谢物；D 抗生素； 标准答案: C
10.微生物数量减少十倍所需的时间是（ ）。 A. 十倍减少时间 B. 十倍减少值 C. 热致死时间 D. 对数时间 标准答案: A
三、判断正误（共有题目9题,共计9.0分）
1.培养自养型微生物的培养基完全可以由简单的无机物组成。 A.正确 B.错误
标准答案: A
2.基础培养基可用来培养所有类型的微生物。 A.正确 B.错误
标准答案: B
3.伊红美蓝（EMB）培养基中，伊红美蓝的作用是促进大肠杆菌的生长。 A.正确 B.错误
标准答案: B
4.次级代谢的生理意义不像初级代谢那样明确，但是某些次级代谢产物对于该微生物具有特殊的意义，如与孢子的启动形成有关。 A.正确 B.错误
标准答案: A
5.当从厌氧条件转换到有氧条件时， 微生物转向有氧呼吸， 糖分解代谢速率加快。
A.正确 B.错误
标准答案: B
6.青霉素抑制肽聚糖分子中肽桥的生物合成， 因此对于生长旺盛的细胞具有明显的抑制作用，而对于休止细胞无抑制作用。 A.正确 B.错误
标准答案: A
7.一般显微镜直接计数法比稀释平板涂布法测定出的菌数多。 A.正确 B.错误
标准答案: A
8.对热敏感的溶液可采用巴斯德消毒法来灭菌。 A.正确 B.错误
标准答案: B
9.1∶600 稀释时某化学试剂 10 min 内能杀死的金黄色葡萄球菌与 1∶60 稀释的石炭酸相同，该化学试剂的石炭酸系数为 10。 A.正确 B.错误
标准答案: A
四、名词解释（共有题目6题,共计12.0分） 1.营养缺陷型
由于突变失去合成某种必须生长因子的能力，必须从培养基中添加相应的生长因子才能生长的微生物，常作为遗传学标记，但本题总得分不超过2分 2.完全培养基
标准答案: 在一定条件下含有某种微生物所有营养缺陷突变菌株生长繁殖所需的所有营养物质的培养基，可用于维持该菌所有营养缺陷型菌株生长的需要。 3.呼吸.
生物氧化过程中对底物进行彻底氧化，释放的电子交给最终电子受体（外源电子受体），产生能量和还原性产物。有有氧呼吸和无氧呼吸二种 4.次级代谢
生物体在一定的生长时期，以初级代谢产物为前体，合成一些对微生物的生命活动无明确功能的物质的过程，是某些微生物、植物的一种适应生存的方式。 5.生长限制因子
处于较低浓度范围内，可影响细菌生长速率的营养物成分 6.Antimicrobial agent
标准答案: 抗微生物剂（不写中文扣一分），一类能够杀死微生物或抑制微生物生长的化学物质，包括生物合成的天然产物和人工合成的化合物二大类 五、简答题（共有题目4题,共计24.0分）
1.与促进扩散相比，微生物通过主动运输吸收营养物质的特点有何不同？ 主动运输需要消耗能量，而促进扩散不消耗能量
主动运输与促进扩散相比的优点在于可以逆浓度运输营养物质。通过促进扩散将营养物质运输进入细胞，需要环境中营养物质浓度高于胞内，而在自然界中生长的微生物所处环境中的
营养物质含量往往很低，在这种情况下促进扩散难以发挥作用。主动运输则可以逆浓度运输，将环境中较低浓度营养物质运输进入胞内，保证微生物正常生长繁殖。
2.大肠杆菌在 37℃的牛奶中每 12.5 min 繁殖一代，假设牛奶消毒后，大肠杆菌的含量为1 个/100 mL，请问按国家标准（30 000 个/ mL） ，该消毒牛奶在37℃下最多可存放多少时间？
标准答案:
代时 G =（t－t0）/ n
=0.301×（t－t0）/（lgNt－lgN0） t－t0 =（lg3 000 000－lg1） ×12.5/0.301
≈269（min） ≈4.5（h） 展示演算过程
答：最多能放 4.5h。
3.自然界中铁有几种存在形式？微生物怎样参与它们之间的变化？
铁的存在形式：Fe 2+ 和 Fe 3＋，以及铸铁，Fe 0 Fe 3＋ 到Fe 2+ ：还原过程，可通过铁载体的运输（4分），或者以Fe 3＋ 为最终电子受体进行厌氧呼吸 Fe 2+ 到Fe 3＋：氧化过程：化能自养菌以Fe 2+ 为能源物质，通过生物氧化来产生能量
4.试分析液态饮料生产时可采取哪些措施防止微生物对产品品质的影响？
1）过滤除菌 2）巴士德消毒 3）超高温瞬时灭菌 4）添加防腐剂 5）密封包装 6）辐照灭菌 7）冷藏 8）热储
1.与细菌相比病毒的生长规律有何特点？试设计实验测定噬菌体的生命周期，请绘图并分析、讨论通过实验可能获得有关噬菌体生活规律的哪些数据。
病毒的生长规律：复制，而细菌为二分裂，包括吸附、侵入、脱壳、大分子的生物合成、装配、释放，所以与细菌等细胞生物的生长明显不同的5个阶段。实验操作 1、用噬菌体的稀释液感染高浓度的宿主细胞； 2、数分钟后，加入抗噬菌体的抗血清（中和未吸附的噬菌体）； 3、将上述混合物大量稀释，终止抗血清的作用和防止新 释放的噬菌体感染其它细胞； 4、保温培养并定期检测培养物中的噬菌体效价（对噬菌体 含量进行计数）； 5、以感染时间为横坐标，病毒的感染效价为纵坐标，绘 制出病毒特征性的繁殖曲线；一般用一步生长曲线表示、在画图中应注明：吸附期、潜伏期、隐蔽期、裂解期，并指明裂解量
2.何为营养缺陷型？应如何得到X菌的某种营养缺陷型（例如his_ ）菌株？简述并分析应采取的实验步骤和原理。
营养缺陷型：由于突变失去合成某种必须生长因子的能力，必须从培养基中添加相应的生长因子才能生长的微生物 实验设计：1）用基本培养基培养x菌株，然后用紫外线等进行诱变处理 2）将诱变后的菌液稀释涂布到完全培养基平板表面，长出分散的单个菌落 3）将完全培养基平板表面的菌影印到基本培养基和完全培养基平板表面 4）从完全培养基平板表面挑取在对应的基本培养基表面不长的菌落，用完全培养基培养，获得培养物 5）将得到的微生物培养物点种到基本培养基以及加有His（组氨酸）的基本培养基平板表面，在后者生长的细菌应为his_ 菌株 6）将获得的his_ 菌株进行进一步验证，该菌应在基本培养基中不长，而在加有His（组氨酸）的基本培养基中生长
3.为什么能用生物大分子作为衡量生物进化的标尺？有哪些选用原则？建立16 S r RNA系统发育树的意义何在？
为什么能用生物大分子作为衡量生物进化的标尺？ 大量的研究表明；蛋白质、RNA和DNA序列进化变化的显著特点是进化速率相对恒定，也就是说，分子序列进化的改变量(氨基酸或核苷酸替换数或替换百分率)与分子进化的时间成正比。因此，这些生物大分子被看作是分子计时器(molecular chronometers)或进化钟(evolutionary clock)，它们真实地记录了各种生物的进化过程。因此，我们可以通过比较不同类群的生物大分子序列的改变量来确定它们彼此系统发育相关性或进化距离。在两群生物中，如果同一种分子的序列差异很大时，表示它们进化距离远，这两群生物在进化过程中很早就分支了。如果两群生物同一来源的大分子的序列相同，说明它们处在同一进化水平上。 假设在进化的过程中进化速率相对恒定，则分子序列进化的改变量(氨基酸或核苷酸替换数或替换百分率)与分子进化的时间成正比 a）在两群生物中，如果同一种分子的序列差异很大时，------------进化距离远，进化过程中很早就分支了。 b）如果两群生物同一来源的大分子的序列基本相同，------------处在同一进化水平上。 有哪些选用原则？ 1）在所需研究的种群范围内，它必须是普遍存在的。 2）在所有物种中该分子的功能是相同的。 3）为了鉴定大分子序列的同源位置或同源区，要求所 选择的分子序列必须能严格线性排列，以便进行进 一步的分析比较。 4）分子上序列的改变（突变）频率应与进化的测量尺度相适应。大量的资料表明：功能重要的大分子、或者大分子中功能重要的区域，比功能不重要的分子或分子区域进化变化速度低。 16S rRNA是一个好的分子标尺的原因 1）rRNA具有重要且恒定的生理功能，且在生物中普遍存在； 2）在16SrRNA分子中，既含有高度保守的序列区域，又有中度 保守和高度变化的序列区域，因而它适用于进化距离不同的各类生物亲缘关系的研究； 3）16SrRNA分子量大小适中，便于序列分析； 4）rRNA在细胞中含量大(约占细胞中RNA的90%)，也易于提取； 建立16 S r RNA系统发育树的意义 1）提出了一种全新的正确衡量生物间系统发育关系的方法，使生物进化的研究范围真正覆盖所有生物类群； 2）对探索生命起源及原始生命的发育进程提供了线索和理论依据； 3）突破了细菌分类仅靠形态学和生理生化特性的限制，建立了全新的微生物分类、鉴定理论； 4）为微生物生物多样性和微生物生态学研究建立了全新的研究理论和研究方法，特别是不经培养直接对生态环境中的微生物进行研究。 二、单项选择题（共有题目10题,共计10.0分） 1.病毒显著区别于其他生物的特征是（ ）。 A. 具有感染性 B. 独特的繁殖方式 C. 体积微小 D. 细胞内寄生 标准答案: B
2.病毒纯化方法均是根据病毒的基本理化性质建立的，包括（ ）。 A. 病毒的核酸是DNA或是RNA B. 病毒的主要化学组成是蛋白质 C. 病毒含有脂类和糖类 D. 病毒体积微小 标准答案: B
3.人类消灭了天花病毒，其主要原因是：
A. 天花是最古老的疾病，通过数千年的斗争，人类积累相当防治天花的经验； B. 在所有的病毒中，天花病毒是最脆弱的一个； C. 天花病毒只能感染人，宿主范围狭窄；
D. 能引起牛痘的病毒和天花病毒在性质上类似； 标准答案: C
4.Avery和他的合作者分别用降解DNA、RNA或蛋白质的酶作用于有毒的S型细胞抽提物，选择性地破坏这些细胞成分，然后分别与无毒的R型细胞混合，结果发现，只有（ ）被酶解而遭到破坏的抽提物无转化作用，说明DNA是转化所必须的转化因子。 A. RNA B. 蛋白质 C. DNA
D. 毒素 标准答案: C
5.原核生物基因组存在一定数量的重复序列，但比真核生物（ ），而且重复的序列比较短，一般为4~40个碱基，重复的程度有的是十多次，有的可达上千次。 A. 多得多 B. 多几倍 C. 多几千倍 D. 少得多 标准答案: D
6.F′是携带有宿主染色体基因的F因子，F′×F－的杂交与F＋×F－不同的是给体的部分染色体基因随F′一起转入受体细胞，并且不需要整合就可以表达，实际上是形成一种部分二倍体，此时的受体细胞也就变成了（ ）。 A. F＋ B. F′ C. F－ D. F
标准答案: B
7.下面的哪个选项不适合作为基因工程克隆载体（ ）。 A. 转座子 B. 质粒 C. 柯斯质粒 D. 噬菌体 标准答案: A
8.外源DNA导入原核细胞可以采用转染法，即（ ）。 A. 重组质粒载体导入感受态细胞
B. 重组噬菌体DNA或重组噬菌质粒导入感受态细胞 C. 外源DNA被包装成λ噬菌体颗粒导入宿主细胞 D. 电转化法 标准答案: B
9.根据你所掌握的知识，你认为形态学特征在以下几类微生物中的哪一类分类鉴定中显得更加重要（ ） A. 病毒 B. 细菌 C. 酵母菌 D. 霉菌 标准答案: D
10.第一个古生菌的全基因组序列测定结果初步证实了它是独立于其他两域生物的第三生命形式。该古生菌是（ ）。 A. 螺旋体
B. 淋病奈瑟氏菌 C. 变形杆菌
D. 詹氏甲烷球菌 标准答案: D
三、判断正误（共有题目9题,共计9.0分） 1.病毒只含有一种核酸，DNA或是RNA。 A.正确 B.错误
标准答案: A
2.溶源性细菌对其他噬菌体的再感染均具特异性的免疫力。 A.正确 B.错误
标准答案: B
3.1952年，Alfred D. Hershey和Martha Chase为了证实T2噬菌体的DNA是遗传物质，他们用P32标记病毒的DNA，用S35标记病毒的蛋白质外壳。然后将这两种不同标记的病毒分别与其宿主大肠杆菌混合。结果发现决定蛋白质外壳的遗传信息是在DNA上，DNA携带有T2的全部遗传信息。 A.正确 B.错误
标准答案: A
4.1956年，H. Fraenkel Conrat用烟草花叶病毒所进行的拆分与重建实验，结果也证明DNA是遗传物质的基础。 A.正确 B.错误
标准答案: B
5.质粒作为细胞中的主要遗传因子，携带有在所有生长条件下所必需的基因。 A.正确 B.错误
标准答案: B
6.大肠杆菌是最常用的各种生物基因克隆载体构建的宿主菌。 A.正确 B.错误
标准答案: A
7.如果外源DNA片段插入载体的位点位于抗生素抗性基因之外，则具有抗性的细胞肯定是重组体细胞。 A.正确 B.错误
标准答案: B
8.两种细菌的G＋C含量相近，说明它们亲缘关系近，反之，G＋C含量差别大说明它们亲缘关系远。 A.正确
B.错误
标准答案: B
9.DNA－DNA杂交主要用于种、属水平上的分类研究，而进行亲缘关系更远（属以上等级）分类单元的比较，则需进行DNA－rRNA杂交。 A.正确 B.错误
标准答案: A
四、名词解释（共有题目6题,共计12.0分） 1.Prophage
原噬菌体，或者前噬菌体。温和噬菌体侵入其宿主的细胞后，它在选择走溶源化道路时，其基因组可整合到宿主的染色体上或者以质粒的形式存在于宿主的细胞质中，这时的噬菌体基因组核酸就被称为原噬菌体。 2.abortive transduction
流产转导，在普遍性转导过程中，被噬菌体带到受体细胞中的DNA片段不被降解也没有发生重组，因此不能进行复制，但其携带的基因可进行转录和表达，经过培养后在选择平板上形成微小菌落。 3.Prion
朊病毒，具有传染性的蛋白质致病因子。其致病作用是由于动物体内正常的蛋白质prpc改变折叠状态为prpsc所致，而这二种蛋白质的一级结构并没有改变。 4.细菌素
由质粒编码的一种蛋白，能够抑制或杀死近缘、甚至同种不同株的细菌 5.Shuttle vector
穿梭载体，拥有2个复制起始区的质粒，在不同属种的宿主细胞具有中具有自我复制能力，方便对基因的克隆与操作。 6.核酸探针
一段与被测定的核苷酸序列（靶序列）互补的带标记的核苷酸（DNA或者RNA）单链，长度通常是十几～数千个碱基。核酸探针应是一段特异的已知片段，通常是一个基因序列或基因序列片段，其核苷酸序列可以是已知的或未知。 五、简答题（共有题目4题,共计24.0分） 1.何为毒粒？试结合功能讨论其结构特点。
也称病毒颗粒：病毒的细胞外颗粒形式，也是病毒的感染性形式。结构：基因组，DNA或RNA，是病毒的遗传物质。蛋白质外壳：包围着病毒核酸的蛋白质外壳，由蛋白质亚基按对称的形式、有规律地排列而成，是病毒毒粒的基本结构。起保护作用，并通过识别宿主细胞上的特异性受体启动感染（决定感染的特异性） 有些在蛋白质外壳外还有外膜
2.自然遗传转化与人工转化之间有什么关系?为什么在一般情况下它们转化质粒的成功率有如此大的差别?
自然转化：感受态的建立受基因控制，是细菌自身的生理形状人工转化：用外在干预的方法使细菌细胞建立人工感受态，处于可吸收外源DNA的状态，与细菌自身的基因控制无关质粒一般是双链环状的具有自主复制能力的染色体外DNA分子，和染色体一般不具有同源性，不容易和染色体发生同源重组自然转化时，双链DNA被感受态细胞吸附后，细胞水解其中一条链，只有一条链进入细胞，这样质粒的结构被破坏，只有通过多个质粒分子DNA片段的重组才能重新恢复到可自主复制的状态，效率相对低人工转化时，进入细胞的质粒DNA结构未被破坏，因此效率相对高
3.为什么说微生物学不仅为基因工程提供了理论基础，同时也提供了操作技术？
①基因工程所用克隆载体主要是用病毒、噬菌体和质粒等来自微生物的材料改造而成； ②基因工程所用千余种工具酶绝大多数是从微生物中分离纯化得到的； ③微生物细胞是基因克隆的宿主，即使植物基因工程和动物基因工程也要先构建穿梭载体，使外源基因或重组体DNA在大肠杆菌中得到克隆并进行拼接和改造，才能再转移到植物和动物细胞中； ④为大规模表达各种基因产物（基因表达的宿主），从事商品化生产，通常都是将外源基因表达载体导入大肠杆菌或是酵母菌中以构建成工程菌，利用工厂发酵来实现的； ⑤微生物的多样性，尤其是抗高温、高盐、高碱、低温等基因，为基因工程提供了极其丰富而独特的基因资源； ⑥有关基因结构、性质和表达调控的理论主要也是来自对微生物的研究中取得的，或者是将动、植物基因转移到微生物中后进行研究而取得的，此外基因工程是在细菌自然遗传转化、人工转化的基础上发展起来的。因此微生物学不仅为基因工程提供了操作技术，同时也提供了理论指导。
4.哪些分子生物学技术被用于对细菌的分类、鉴定？
16S rRNA序列绘制的分子进化树，其他有分类学价值的生物大分子； GC％含量基因组DNA序列的相似程度－同源杂交、电子杂交）核酸探针或特异性PCR：对微生物的快速鉴定