2、探索叶绿体中有几种色素。

二、实验原理：

1、叶绿体中的色素能溶解在有机溶剂（无水乙醇）中，所以用无水乙醇（或95﹪的乙醇）可提取叶绿体中色素。

2、色素在层析液中溶解度不同，溶解度高的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得快，溶解度低的色素分子随层析液在滤纸条上的扩散得慢，因而可用层析液将不同的色素分离。

三、实验材料：

新鲜的绿叶（如菠菜的绿叶），无水乙醇，层析液（由20份在60~90℃下分馏出来的石油醚、2份乙醇和1份苯混合而成。93号汽油也可代用），二氧化硅和碳酸钙。

四、实验用具：

干燥的定性滤纸，试管，棉塞，试管架，研钵，玻璃漏斗，尼龙布，毛细吸管，剪刀，药勺，量筒（10ml），天平。

五、方法步骤：

（1）称取5g绿色叶片并剪碎 提取色素 研钵→研磨→漏斗过滤→

（2）加入少量SiO2、CaCO3和10ml无水乙醇 收集到试管内并塞紧管口 （1）将干燥的滤纸剪成略小于试管长和直径的纸条，剪去一端两角（使层析液

同时到达滤液细线）

制滤纸条

（2）在距剪角一端1cm处用铅笔画线

（1）用毛细管吸少量的滤液沿铅笔线处小心均匀地划一条滤液细线 滤液划线 （2）干燥后重复划2-3次 （1）向烧杯中倒入适量层析液

纸上层析 （2）将滤纸条尖端朝下略微斜靠烧杯内壁，轻轻插入层析液中（以层析液不没

及滤液细线为准）

（3）用培养皿盖盖上烧杯

观察结果：滤纸条上出现四条宽度、颜色不同的彩带（如下图）

最宽：叶绿素a； 最窄：叶绿素b；

相邻色素带最近：叶绿素a和叶绿素b； 相邻色素带最远：胡萝卜素和叶黄素。

六、注意：

1、二氧化硅：为了使研磨充分；碳酸钙：保护叶色素免受破坏；丙酮：色素的溶剂。 2、扩散最快的是胡萝卜素（橙黄色），扩散最慢的是叶绿素b（黄绿色）。

3、滤纸上有四条色素带说明了绿叶中的色素有四种，它们在层析液中的溶解度不同，随层析液在滤纸上扩散的快慢也不一样。

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4、裁取定性滤纸时，注意双手尽量不要接触纸面，以免手上的油脂或其他脏物污染滤纸。 5、制备滤纸条时，要将滤纸条的一端剪去两角,这样可以使色素在滤纸条上扩散均匀,便于观察实验结果。

6滤纸上的滤液细线如果触到层析液，细线上的色素就会溶解到层析液中，就不会在滤纸上扩散开来，实验就会失败。

7画滤液细线时，用力要均匀，速度要适中

8研磨要迅速、充分。a.因为无水乙醇容易挥发; b.为了使叶绿体完全破裂.从而能提取较多的色素;c.叶绿素极不稳定，能被活细胞中的叶绿素酶水解而被破坏。

实验十二：细胞大小与物质运输的关系

一、实验目的：

通过探究细胞大小，即细胞的表面积与体积之比（即细胞的相对表面积），与物质运输效率之间的关系，探讨细胞不能无限长大的原因

二、实验原理：NaOH和酚酞相遇，呈紫红色。NaoH在琼脂块中扩散的速度为匀速，在相同时间内，NaoH扩散的深度（或琼脂块变红的体积）与琼脂块的总体积的比值，可以反应NaoH扩散的速率。 三、实验材料：3cm×3cm×6cm的含酚酞的琼脂块，质量分数为0.1%的NaOH溶液。 四、实验用具：塑料餐刀，防护手套，毫米尺，塑料勺，纸巾，烧杯。 五、方法步骤： 1、用塑料餐刀将琼脂块切成三块边长分别为3cm、2cm、1cm的正方体 2、将三块琼脂块放在烧杯内，加入NaOH溶液，将琼脂块淹没，浸泡10min。用塑料勺不时翻动琼脂块。注意：不要用勺子将琼脂块切开或挖动其表面 3、戴上手套，用塑料勺将琼脂块从NaOH溶液中取出，用纸巾把它们擦干，用塑料刀把琼脂块切成两半。观察切面，测量每一块上NaOH扩散的深度。纪录测量结果。注意：每两次操作之间必须把刀擦干 4、根据测量结果进行计算，并填写下表 琼脂块的表面积体积相对表面积 边长/cm /cm2 /cm3 比值（NaOH扩散的体NaOH扩散的深积/整个琼脂块的体度 积） 0.5 0.5 0.5 19/27 7/8 1 3 2 1 54 24 6 27 8 1 2 3 6 六、实验结论： 琼脂块的表面积与体积之比随着琼脂块的增大而减小； NaOH扩散的体积与整个琼脂块体积之比随着琼脂块的增大而减小。 实验十三：观察根尖分生组织细胞的有丝分裂 一、实验目的： 1、制作洋葱根尖细胞有丝分裂装片。

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2、观察植物细胞有丝分裂的过程，识别有丝分裂的不同时期，比较细胞周期不同时期的时间长短。

3、绘制植物细胞有丝分裂简图。

二、实验原理：

1、高等植物的分生组织有丝分裂较旺盛。

2、有丝分裂各个时期细胞内染色体的形态和行为变化不同，可用高倍显微镜根据各个时期内染色体的变化情况，识别该细胞处于那个时期。

3、细胞核内的染色体易被碱性染料（如龙胆紫或醋酸洋红）染成深色。

三、实验材料：洋葱（可用葱.蒜代替），质量分数为15%的盐酸，体积分数为95%的酒精，

质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（将龙胆紫溶解在质量分数2%的醋酸溶液中配制而成）或醋酸洋红液，洋葱根尖细胞有丝分裂固定装片。

四、实验用具：显微镜，载玻片，盖玻片，玻璃皿，剪子，镊子，滴管。 五、方法步骤：

1、洋葱根尖的培养在上实验课之前的3-4天，取洋葱一个，放在广口瓶上。瓶内装满清水，让洋葱的底部接触到瓶内的水面。把这个装置放在温暖的地方培养。待根长约5cm，取生长健壮的根尖制成临时装片观察。 2、装片的制作

制作流程为：解离—漂洗—染色—制片 过程 方 法 时 间 目 的 上午10时至下午2时，剪去洋葱根尖2-3mm，3-5min 用药液使组织中的细胞解离 立即放入盛入有1﹪盐酸和95﹪酒精混合液（1：相互分离开来 1）的玻璃皿中，在温室下解离。 漂洗 待根尖酥软后，用镊子取出，放入盛入清水的玻璃皿中漂洗。 染色 把根尖放进盛有质量浓度为0.01g/ml或0.02g/ml的龙胆紫溶液（或醋酸洋红液）的玻璃皿中染色。 用镊子将这段根尖取出来，放在载玻片上，加制片 一滴清水，并用镊子尖把根尖弄碎，盖上盖玻片，在盖玻片上再加一片载玻片。然后，用拇指轻轻的按压载玻片。 约10min 洗去药液，防止解离过度 3-5min 染料能使染色体着色。 使细胞分散开来，有利于观察 3、观察

a低倍镜观察：找到分生区细胞，其特点是细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞正在分裂。 b高倍镜观察：在低倍镜观察的基础上换高倍镜，直到看清细胞的物象为止。 c仔细观察：先到中期，再找其余各期，注意染色体的特点。 d移动观察：慢慢移动装片，完整地观察各个时期。 4、绘图 5、记录

六、实验结论：

处于分裂间期的细胞数目最多。

前期：①出现染色体②核膜核仁消失③纺锤丝出现 中期：①着丝粒位于赤道面②纺锤体明显

后期：染色体分裂成两组子染色体向相反两极运动

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末期：①纺锤体出现②核膜核仁出现

七、注意

（1)培养根尖时，为何要经常换水？

增加水中的氧气，防止根进行无氧呼吸造成根的腐烂。 （2）培养根尖时，应选用老洋葱还是新洋葱？为什么？

应选用旧洋葱，因为新洋葱尚在休眠，不易生根。

（3）为何每条根只能用根尖？取根尖的最佳时间是何时？为何？

因为根尖分生区的细胞能进行有丝分裂；上午10时到下午2时；因为此时细胞处于分裂期的较多。

（4）解离和压片的目的分别是什么？压片时为何要再加一块载玻片？

解离是为了使细胞相互分离开来，压片是为了使细胞相互分散开来；再加一块载玻片是为了受力均匀，防止盖玻片被压破。

（5）若所观察的组织细胞大多是破碎而不完整的，其原因是什么？

压片时用力过大。

（6)解离过程中盐酸的作用是什么？丙酮可代替吗？

分解和溶解细胞间质；不能，而硝酸可代替。 （7)为何要漂洗？

洗去盐酸便于染色。

（8)细胞中染色最深的结构是什么？

染色最深的结构是染色质或染色体。

（9）若所观察的细胞各部分全是紫色，其原因是什么？

染液浓度过大或染色时间过长。

（10）为何要找分生区？分生区的特点是什么？能用高倍物镜找分生区吗？为什么？

因为在根尖只有分生区的细胞能够进行细胞分裂；分生区的特点是：细胞呈正方形，排列紧密，有的细胞处于分裂状态；不能用高倍镜找分生区，因为高倍镜所观察的实际范围很小，难以发现分生区。

（11）分生区细胞中，什么时期的细胞最多？为什么？ 间期；因为在细胞周期中，间期时间最长。

（12）所观察的细胞能从中期变化到后期吗？为什么？

不能，因为所观察的细胞都是停留在某一时期的死细胞。 （13）观察洋葱表皮细胞能否看到染色体？为什么？ 不能，因为洋葱表皮细胞一般不分裂。 （14）若观察时不能看到染色体，其原因是什么？

没有找到分生区细胞；没有找到处于分裂期的细胞；染液过稀；染色时间过短。

实验十四：观察蝗虫精母细胞减数分裂固定装片

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