C 所有RNA都在于细胞质中； D 寿命最短、含量最少的是mRNA; 13．核酸变性时:

A 氢键断裂、双链脱解、碱基堆积破坏； B 分子量不变；

C 在退火条件下互补单链可以重新缔合为双链； D 单链核酸增色效应不显著。 14．DNA的Tm与介质的离子强度有关，所以DNA制品应保存在：

A 高浓度的缓冲浪中 B 低浓度的缓冲液中C 纯水中 D 有机试剂中 15．热变性后的DNA：

A 紫外吸收增加 B 磷酸二酯键断裂 C 形成三股螺旋 D (G-C)％含量增加 *16．下列过程中与DNA体外重组无关的是：

A 用专一性的限制性内切酶在特定的互补位点切割载体DNA和供体DNA B 通过连接酶催化载体DNA与供体DNA接合。 C 将重组后的DNA通过结合反应引入寄主细胞。

D 常常根据载体所具有的抗药性来筛选含有重组DNA的细菌。 17．核酸分子中的共价键包括：

A 嘌呤碱基第9位N与核糖第1位C之间连接的β—糖苷键 B 磷酸与磷酸之间的磷酸酯键

C 磷酸与核糖第1位C之间连接的磷酸酯键 D 核糖与核糖之间连接的糖苷键

19．下列哪种物质不是由核酸与蛋白质结合而成的复合物：

A 病毒 B 核糖体 C 蛋白质生物合成70S起始物 D 线粒体内膜 20．下列关于核糖体的叙述正确的是：

A 大小亚基紧密结合任何时候都不分开。B 细胞内有游离的也有与内质网结合的核糖体。 C 核糖体是一个完整的转录单位。 D 核糖体由两个相同的亚基组成。

21．Crick的摆动假说较好的描述了：

A 密码子的第三位变动不影响与反密码子的正确配对B 新生肽链在核糖体上的延长机理。 C 由链霉素引起的翻译错误。D 溶原性噬菌体经过诱导可变成烈性噬菌体。

22．分离出某病毒核酸的碱基组成为：A＝27％，G＝30％，C＝22％，T＝21％，该病毒应为： A 单链DNA B 双链DNA C 单链RNA D 双链RNA

五、 问答与计算： 1．DNA双螺旋结构模型的主要内容是什么？ 生物体内遗传信息的传递主要是通过什么方式实现的？

2．简要描述酵母tRNAAla的三叶草模型。

3．有一DNA分子，其(A+G)／(T+C)在一单链中的比值为0.9，试计算在另一互补链中(A+G)／(T+C)的比值。

4．DNA样品在水浴中加热到—定温度，然后冷至室温测其OD260，请问在下列情况下加热与退火前后OD260的变化如何?(a)加热的温度接近该DNA的Tm值；(b)加热的温度远远超过该DNA的Tm值。

6．根据同源蛋白质的知识，说明为什么编码同源蛋白质的基因(DNA片段)可以杂交?

第三章 酶 学

一、名词解释

１．Ｋm与Ｋs： ２．双成分酶：３．活性中心：４．变构酶：５．酶原激活： ６．寡聚酶：７．同工酶：８．酶活力、比活力： 二、是非题 判断下列各句话意思的正确与否，正确的在题后括号内画“√”，错误的画“×”，如果是错误的，请说明其理由

1．形成酶活性部位的氨基酸残基，在一级结构上并不相连，而在空间结构上却处在相近位置。

2．在底物浓度为限制因素时，酶促反应速度随时间而减小。

3．只要底物浓度足够大，即便是有竞争性抑制剂的存在，酶的最大反应速度仍然可以达到。

4．丁二酸脱氢酶受丙二酸的抑制，但此抑制作用可以通过增加丁二酸浓度的方式来解除或减轻。

5．辅酶和辅基都是酶活性不可少的部分，它们与酶促反应的性质有关 6．当[S]>> Km时，酶促反应速度与酶浓度成正比。 7．抑制剂二异丙基氟磷酸(DFP或DIFP)能与活性部位中含有Ser-OH的酶结合使其失活。 8．在结合酶类中，酶促反应的专一性主要由酶蛋白的结构决定，催化性质则主要由辅因子的化学结构所决定。

9．根据定义：酶活力是指酶催化一定化学反应的能力。一般来说，测定酶活力时，测定产物生成量，比测定底物减少量更准确。

10．如果体系中所有的酶都以酶底复合物的形式存在，则v=Ｖmax。 11．酶活力的测定，本质上就是测定酶催化的反应速度。

12．最适温度不是酶的特征性常数，因此可以说温度与酶促反应的速度无关。 13．酶催化反应速度的能力不能直接用酶的体积和质量来表示，这主要是由酶本身的化学性质所决定的。

14．同工酶是指功能和结构都相同的一类酶。

15．在竞争性抑制剂存在时，加入足够量的底物可使酶促反应速度达到正常的Vmax。 16．反竞争性抑制剂是既能改变酶促反应的Km值，又能改变Vmax的一类抑制剂。 17．有些酶的Km值可能由于结构上与底物无关的代谢物的存在而改变。

18．将具有绝对专一性的酶与底物的关系，比喻为锁和钥匙的关系还比较恰当。 19．所有酶的米氏常数(Km)都可被看成是酶与底物的结合常数(Ks)，即Km＝Ks。 20．脲酶的专一性很强，除尿素外不作用于其它物质。 三、填空题 1．酶分为六大类，l ，2 ，3 ， 4 ，5 ， 6 。

2．结合酶类是由 和 组成。

3．为准确测定酶活力，必须满足下面三个条件，即 、 。 4．当底物浓度远远大于Km，酶促反应速度与酶浓度 。

5．影响酶促反应速度的因素主有 、 、 、 、 和 六种。 6．溶菌酶的活性部位有 和 两种氨基酸残基，其催化机制是典型的 。 7．胰脏分泌的蛋白酶具有相同的作用机制，活性部位都是由 、 和 组成的 ，它们的区别是 。

8．用双倒数作图法求Km时，横坐标为 ，纵坐标为 。 10．酶的比活力是指单位质量蛋白质所具有的酶活力大小，一般采用 和 两种方式来表示。

11．竞争性抑制剂使酶促反应的Km ，而Vmax 。

12．天冬氨酸转氨甲酰酶(ATCase)催化 和 生成氨甲酰天冬氨酸。它的正调节物是 ，负调节物是CTP。

13．能催化多种底物进行化学反应的酶有 个Km值，其中Km 的底物是该酶的最适底物。

14．与无机催化剂相比，酶催化作用主要具有 、 、 和 四方面主要特性。

15．乳酸脱氢酶以 为辅酶，它的酶蛋白由 个亚基构成，其亚基分为 和 两种。

16．迄今已知的变构酶大多都是 酶，它含有 个以上亚基构成，除具有活性中心外，还具有 中心。

四、选择题

１．米氏常数：

Ａ 随酶浓度的增大而增大；Ｂ 随酶浓度增大而减小；Ｃ 随底物浓的增大而减小； Ｄ 是酶的特征性常数。 ２．生物素作用是：

Ａ 转氨酶的辅酶； Ｂ 脱羧酶的辅酶；Ｃ 一碳单位的载体； Ｄ 羧化酶的辅酶。 ３．用双倒数作图法求Ｖmax和Ｋm值时，若以Ｓ表示底物，Ｖ表示反应速度，哪么图中Ｘ轴的实验数据表示：

Ａ 1/V； Ｂ 1/[S] Ｃ V Ｄ [S] ４．竞争性抑制作用可以通过下列哪种方式来减轻或消除？

Ａ 增加底物浓度； Ｂ 增加酶浓度； Ｃ 减少底物浓度； Ｄ 以上方式都不行。 ５．磺胺药物冶病的原理是：

Ａ 直接杀死细菌；Ｂ 叶酸合成的非竞争性抑剂； Ｃ 叶酸合成的竞争性抑制剂 Ｄ 以上三者都不行。

６．有机磷农药作为酶的抑制剂，是作用于酶活性部位的： Ａ 硫基； Ｂ 羟基； Ｃ 羧基； Ｄ 咪唑基。 ７．抑制剂与酶结合，使酶催化作用降低，是因为：

Ａ 酶蛋白质变性失活；Ｂ 占据酶的活性部位；Ｃ 抑制剂与酶必须基团结合；Ｄ Ｂ和Ｃ。 ８．将一种非竞争性抑制剂加到一种酶反应系统中：

Ａ Ｋm值增加、Ｖmax升高； Ｂ Ｋm值增加、Ｖmax不变； Ｃ Ｋm值不变、Ｖmax升高； Ｄ Ｋm值不变、Ｖmax变小。

９．酶加速其化学反应速度的原因是：

Ａ 使产物比非酶反应更稳定； Ｂ 使底物获得更多的自由能； Ｃ 缩短反应达到平衡所需时间； Ｄ 保证底物全部形成产物。 10．ATCase的负调节物是：

Ａ CTP； Ｂ UTP； Ｃ ATP； Ｄ Asp 11．在下列酶的辅因子中，不含AMP的是：

Ａ NAD+ Ｂ NADP+ Ｃ CoASH； Ｄ FMN。 12．维生素Ｂ6辅酶形式是：

Ａ 吡哆醇； Ｂ 吡哆醛； Ｃ 吡哆胺； Ｄ 磷酸吡哆醛。 13．催化反应Ａ.Ｒ→Ａ＋Ｒ的酶是：

Ａ 合成酶类； Ｂ 裂合酶类； Ｃ 转移酶类 Ｄ 氧化还原酶类。 14．大多数酶都具有如下特征：

Ａ 都能加速化学反应速度； Ｂ 对底物有严格的选择性； Ｃ 分子量大多都在5000以上； Ｄ 近中性pH值时活性最大。 15．下列具别构行为的物质是：

Ａ 葡萄糖异构酶； Ｂ ATCase；Ｃ 乳酸脱氢酶； Ｄ 血红蛋白。

16．具有协同效应的酶，其结构基础是

A 酶蛋白分子的解离和聚合 B 酶蛋白可产生别构效应

C 酶蛋白的降解作用 D 酶蛋白与非蛋白物质结合 17．别构酶的反应速度与底物浓度的关系曲线是：

A 双倒数曲线 B S形曲线 C U形曲线 D 直线

18．酶的不可逆性抑制的机制是：

A 使酶蛋白变性 B 与酶的催化部位以共价键结合

C 使酶降解 D 与酶作用的底物以共价键结合 19．丙二酸对琥珀酸脱氢酶的抑制是由于： A 丙二酸在性质上与酶作用的底物相似 B 丙二酸在结构上与酶作用的底物相似

C 丙二酸在性质上与酶相似 D 丙二酸在结构上与酶相似

20．国际上常常采用Hill系数判断别构酶的类型，典型的米氏类型酶的：

A Hill系数＞1 B Hill系数＝1 C Hil1系数＜1 D Hill系数＝o

21．下列关于同工酶的叙述正确的是：

A 同工酶是由多个亚基以共价键结合形成的复合物 B 同工酶对同一种底物有不同的专一性。

C 同工酶是催化同一种反应，但结构不完全相同的同一种酶的多种形式 D 各种同工酶在电场电泳时，迁移率相同。

五、问答与计算

1．酶的化学本质是什么？如何证明？酶作为催化剂具有哪些主要特点？

2．什么是酶的活性中心?底物结合部位、催化部位和变构部位之间有什么关系?为什么酶对其催化反应的正向及逆向底物都具有专一性?

3．酶活力为什么不能直接用酶制剂的质量或体积来表示？

4. 酶的催化本质是什么？为什么能比无机催化剂更有效地催化化学反应？

5．什么是酶的抑制作用？有哪几种类型？研究酶的抑制作用有什么实际意义？ 6．许多酶由相同的亚单位组成，这一现象的生物学意义是什么?

7．请简要说明Fisher提出的‘锁与钥匙学说’和Koshland提出的诱导契合学说的主要内容。

8．举例说明同工酶存在的生物学意义。

9．测定酶活力时：(1)酶和底物为什么必须用缓冲液配制?(2)酶和底物是先分别保温，然后混合，还是先混合后保温，为什么?

10．己糖激酶催化葡萄糖磷酸化时，Km值为0.15mmol/L，催化果糖磷酸化时，Km为1.5mmo1／L。假如两种反应的Vmax相同。

(1)写出己糖激酶催化葡萄糖和果糖磷酸化的反应式。．

(2)分别计算葡萄糖和果糖为底物(S)时，[S]＝0.15，1.5，15mmol/L时，酶催化反应的速度V是多少?

11．绝大多数酶溶解在纯水中会失活，为什么?