三、名词解释 1.必须氨基酸

2. 等电点 3. 肽键

四、问答题

1．简述水溶性蛋白质的构象特点。

水溶性蛋白质的整体结构通常为球形，疏水性氨基酸侧链主要聚集于球状构象的内部，亲水性氨基酸侧链主要位于球状构象的表面，球状构象内部也可以聚集可电离侧链，整体的能量需要尽可能的低，其构象才属于稳定构象

2.八肽氨基酸组成为Asp, Ser, Gly, Ala, Met, Phe, Lys2. (1)DNFB与之反应再酸水解，得DNP-Ala。

（2）胰凝乳蛋白酶消化后分出一个四肽，其组分为Asp，Gly，Lys和Met，此四肽与DNFB反应生成DNP-Gly。

（3）胰蛋白酶消化八肽后，得到组成为Lys，Ala，Ser及Phe，Lys，Gly的两个三肽及一个二肽，此二肽被CNBr处理游离出Asp。 请写出八肽的顺序及推理过程

由(1)知 即N-Ala① (2分)

由(2)知 Phe-Gly-*-*-*(*为Asp, Lys和Met)② (2分,判断出四肽的N端是Gly给1分,判断出四肽的N相邻的氨基酸是Phe给1分)这个四肽其实就是八肽的C端4肽 (胰凝乳蛋白酶的消化位点为C-term of Phe, Trp, Tyr) 由(3)知

Lys,Ala,Ser③ 并且顺序是 N-Ala-Ser-Lys⑥ (1分) Phe,Lys,Gly④ 并且顺序是 Phe-Gly-Lys⑦ (1分) Met-Asp⑤ (1分) 并且顺序是 Met-Asp⑧ (1分)

(胰蛋白酶的消化位点为C-terminal side of Lys, Arg)

(溴化氰CNBr断裂由Met残基的羧基参加形成的肽键). ②⑦⑧可知 Phe-Gly-Lys-Met-Asp⑨ (1分) ⑥⑨可知N- Ala-Ser-Lys-Phe-Gly-Lys-Met-Asp (1分)

蛋白质的结构与功能

练习题 一、 选择题

1．下列氨基酸残基中最不利于形成a螺旋结构的是（C ）

Ａ.亮氨酸 Ｂ.丙氨酸 Ｃ.脯氨酸 Ｄ.谷氨酸 2.关于α螺旋的叙述错误的是（C） A.分子内的氢键使α螺旋稳定

B.减弱R基团间不利的相互作用使α螺旋稳定 C．疏水作用力使α螺旋稳定

D.在某些蛋白质中，α螺旋是二级结构中的一种类型 E．脯氨酸和甘氨酸残基使α螺旋中断 3.血红蛋白的氧合曲线（A）

A.双曲线 B 抛物线 C S曲线 D直线 E钟罩型 4.每分子血红蛋白所含铁离子数（D） A. 1 B.2 C. 3 D. 4 E. 6

5．可用于蛋白质多肽链N未端氨基酸分析的方法有( AC ) A.二硝基氟苯法 B.肼解法 C.丹磺酰氯法 D.茚三酮法

6．对一个富含His残基的蛋白质,在离子交换层析时,应优先考虑严格控制的是( B )

A.盐浓度 B.洗脱液的pH

C.NaCl的梯度 D.蛋白质样品上柱时的浓度 7．有关变性蛋白质的描述错误的是( C ) A.变性蛋白质的空间结构被显著改变 B.强酸碱可以使蛋白质变性 C.变性蛋白质的一级结构被破坏 D.变性蛋白质的溶解度下降

8．SDS凝胶电泳测定蛋白质分子量是根据各种蛋白质的（B） A．一定pH条件下所带电荷B．分子大小 C. 分子极性 D．溶解度

9.将抗体固定在层析柱的载体，使抗原从流经此柱的蛋白质样品中分离出来，这技术属于 D

A.吸附层析 B.离子交换层析 C.分配层析 D.亲和层析 E.凝胶过滤

10．根据蛋白质分的配基专一性进行层析分离的方法有( C )

A.凝胶过滤 B.离子交换层析 C.亲和层析 D.薄层层析 11．关天凝胶过滤技术的叙述正确的是(AC )

A.分子量大的分子最先洗脱下来B.分子量小的分子最先洗脱下来

C.可用于蛋白质分子量的测定D.主要根据蛋白质带电荷的多少而达到分离的目的 二、填空题

1．血红蛋白（Ｈb）与氧结合的过程呈现_协同_效应，是通过Ｈb的_变构_现象实现的，它的辅基是_血红素_。由组织产生的CO2扩散至红细胞，从而影响Hb和O2的亲和力，这称为_波尔_效应。

2．维持蛋白质构象的化学键有_二硫键，肽键，氢键，离子键，疏水键，范德华力_。 3．Pauling等人提出的蛋白质α螺旋模型，每圈螺旋包含 _3.6__个氨基酸残基，高度为_0.54nm__。每个氨基酸残基沿轴上升_0.15nm_，并延轴旋转_100_度。 4.蛋白质的二级结构有α螺旋结构，β折叠，β转角，无规则卷曲_

5．常用打开二硫键的方法是使用_过量β-巯基乙醇_试剂，使其还原为-SH,为了使反应能顺利进行，通常加入一些变性剂，如_尿素_或_盐酸胍_，而为了避免-SH被重新氧化，可加入_碘乙酸_试剂，使其生成羧甲基衍生物。 6.稳定蛋白质胶体性质的因素有_双电层_和_水化膜_。

7.SDS-PAGE是用_丙烯酰胺_为单体，以_ N,N-亚甲基双丙烯酰胺_为交连剂，聚合而成的网状凝胶。

8.蛋白质与印三酮反应生成_蓝紫色_颜色化合物，而蛋白质和多肽分子中的肽键在稀碱溶液中与硫酸铜共热，呈现_红紫色，此反应称为_双缩脲_反应。 三、名词解释

1.α-螺旋 2. β-折叠

3. 亚基 4. 四级结构

5. 超二级结构

6．别构效应 7.协同效应 8.分子伴侣

9.蛋白质变性和复性 10.亲和层析 四、问答题

1．氨基酸序列、立体（空间）结构、生物功能之间有怎样的关系？

氨基酸和环境条件共同决定蛋白质的构象，而构象又决定蛋白质的功能，所以基因决定氨基酸的序列和所处的环境共同决定蛋白质的功能

2．在蛋白质变性的过程中，有哪些现象出现？并举三种能引起蛋白质变性的理化因素。

①生物活性丧失 ②导致某些理化性质的改变 ③生物化学性质改变 物理因素：高压，X射线，高温，超声波，紫外线 化学因素：强酸，强碱，尿素，胍盐

3.简述蛋白质分离纯化的主要方法？

(1) 根据分子大小不同的分离方法：凝胶过滤层析 (2) 利用蛋白质的酸碱性质：离子交换纤维素层析 （3）利用蛋白质与特定化学基团专一结合:亲和层析

3.SDS-PAGE凝胶电泳测蛋白质分子量的原理？

SDS是一种阴离子去污剂，可使蛋白质变性并解离成亚基，当蛋白质样品中加入SDS后，SDS与蛋白质分子结合，是蛋白质带上大量的负电荷，这些电荷量远远超过蛋白质原来所带的电荷量，因此掩盖了不同蛋白质之间的电荷差异。聚丙烯酰胺是一种网状结构凝胶，具有分子筛效应，这样在消除了蛋白质间原有的电荷和形状差以后，电泳速度只取决于蛋白质的相对分子质量大小

4.从结构和功能上谈谈血红蛋白与肌红蛋白的区别？ ①肌红蛋白一条肽链,血红蛋白4条,分别为2条α两条β

②肌红蛋白含有75%α螺旋含有一个血红素的辅基,辅基通过组氨酸连接在肌红蛋白上;血红蛋白每个亚基含一个血红素,共有4个血红素辅基 ③肌红蛋白氧合曲线是双曲线,血红蛋白是S型 ④肌红蛋白与氧气结合无协同性,而血红蛋白有

⑤血红蛋白与氧气有叠构效应,CO2与质子升高,S曲线右移,亲和性降低,不受二磷酸甘油酸调节

⑥肌红蛋白在肌肉中运氧气,血红蛋白在血液中