羟基磷石灰晶体有两个不同的吸附面，即存在两种不同的吸附点，起阴离子交换剂作用的为C点，带正电荷；起阳离子交换剂作用的为P点，带负电荷

第十八章

所有层析系统分为：固定组、移动组、需离析的样品 色层分离过程：加试样→展开→分部收集

色谱展开是关键，方法：洗脱分析法、前流分析法、顶替分析法 阻滞因素：溶质的迁移速率和一个理想标准物质的迁移速率之比 溶出体积：溶质的最大浓度区从柱中流出时已流出的流动相体积

容量因子：衡量色谱柱对分离组分保留能力的重要参数，意味着在固定相和移动相中溶

质数量的比例大小

吸附色层分离法利用吸附剂对组分的吸附能力的差别进行分离，用了填充柱的物质包括无机吸附剂、有机吸附剂

疏水作用色层分离法原理：靠疏水基团的疏水力分离生物大分子在的液相色谱法。利用

生物大分子如蛋白质表面暴露的疏水部位和疏水介质上的疏水配基的疏水作用来表达分离目的

共价作用色层分离法：利用溶质分子与层析剂凝胶间的共价吸附作用将目标产物与其他

溶质分子分离开

聚焦色层分离法原理：利用蛋白质分子或其他两性分子等电点的不同，在一个稳定的、

连续的、线性的pH梯度中进行蛋白质分离纯化

离子交换色层分离法原理：通过带点的溶质分子与离子交换剂中可交换的离子进行交换

而达分离目的

凝聚过滤色层分离法是以多孔性凝胶作为介质利用分子筛原理将生物物质按其分子大小不同而建立起来的一种分离纯化方法

原理：含不同组分的溶液，过网状的凝胶粒子，小分子物质自由扩散于凝胶颗粒隙缝中进入凝胶相，大分子被排阻在外，加入洗脱剂后溶液向下推移，重复上述扩散、排阻。最先洗出的洗脱液中含大量大分子，最后出的含大量小分子，分段收集可获各种相对分子质量大小的区段

凝胶过滤介质：葡萄糖凝胶、琼脂糖凝胶、聚丙烯酰胺凝胶

第十九章

Zeta电位是动点现象的根本原因。是在静止流体和流动流体间剪切面上的动电电位 动电现象：固-液或液-液界面在外加电场作用下做相对运动而产生的电场现象 质点的电泳迁移率，在电位梯度作用下，单位时间内质点所移动距离

影响质点电泳迁移率的因素：颗粒性质、电场强度、溶液性质（pH值、离子强度、黏度）、其他（焦耳效应、电渗、吸附、分子筛分离、扩散、缓冲液性质）

电泳类型：自由界面电泳、自由相中的区带电泳、不同支持物上的区带电泳、有机溶剂中的凝胶电泳、亲和电泳、等速电泳、等电聚焦、免疫电泳

聚丙烯酰胺凝胶电泳原理：以聚丙烯酰胺为支持介质的电泳是目前分离生物大分子的最好方法。其分离是以它们的物理差别、分子大小和净电荷为基础，即分离除了利用物质所带电位的差别外，还具分子筛的特殊作用，这种性质为分开电泳率很相近的大分子提供了简单有效的方法。

SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳：加有阴离子去污剂-SDS的聚丙烯酰胺凝胶电泳，用于分离蛋白质和测定他的相对分子质量。

原理：SDS以一定比例和蛋白质结合并使它带大量负电荷，大大超过其原来所带电荷，从而使各天然蛋白质间的电荷差别下降乃消除，同时蛋白质结构变松散，形状变一致，排除电泳中电荷影响。

等电聚焦原理：利用电场和pH梯度的复合作用来实现两性物质分离二维电泳最高分辨率，第一维度使用等点聚焦，第二维度使用SDS-聚丙烯酰胺凝胶电泳

免疫电泳：将琼脂电泳与琼脂扩散结合起来的一种免疫化学技术，使具有相同电泳迁移率的物质通过抗原与同源抗体间的特异沉淀反应来检测所形成的沉淀数目，相当于不同抗原存在的数目

毛细管电泳：以内径为20~200μm的柔性毛细管柱作为分离通道，以高压直流电场为驱动力，对各小分子、大分子及细胞等进行高效分离、检测或微量制备的总径

第二十章

重组蛋白更易或包含体形成原因：表达量过高、重组蛋白的氨基酸组成、重组蛋白所处环境、重组蛋白是大肠杆菌的异源蛋白、在细菌表达蛋白质过程中，蛋白质间的离子键，疏水键，共价键等化学作用导致了包含体形成

包含体：基因工程菌表达的外源蛋白质由于来不及加工而堆积在一起形成致密的颗粒 从包含体中回收有生物活性的蛋白质：从大肠杆菌中提取包含体并洗涤→对洗涤后的包

含体进行溶解（尿素、盐酸胍）→对变性蛋白进行体外重折叠恢复活性→对复性蛋白进行纯化获高纯度蛋白

包含体复性方法：透析法、稀释法、超滤法、色谱法、其他复性法

第二十一章

结晶：过饱和液形成→晶核形成→晶体生长

初级成核无任何晶体或有这样的晶体存在，影响小或无 二次成核有晶体存在，很大影响

二次成核：物质的一个或几个晶体存在他们的过饱和溶液中，会引起新晶体生长，其中成核作用，不会按其他方式发生 结晶方法：一次结晶、重结晶、分级结晶 重结晶：结晶的一种重复过程

杂质夹带原因：1.某些杂质与产物溶解度相近，产生共结晶 2.有些杂质会被结合到产物结晶晶格中

3.因洗涤失效不除去结晶中所有母液，使晶体沾染杂质 重结晶方法：简单重结晶、分级重结晶

第二十二章

微生物生产过程，原始湿物料呈毛细-多孔状胶体，性质取决于含水率，物料中毛细管壁有弹性，并与水相互作用会膨胀

按水分原始聚集态，干燥可分为从液态开始干燥和绕过液相从固态直接蒸发-升华 喷雾干燥时，被干燥的溶液或悬浮体用特殊装置来雾化，在干燥室中或细小分散状与气体干燥介质结合

升华干燥原理：湿物料从冻结态下除去水分，即水分不经液态直接升华或气态而脱水的干燥过程