养的组织应是分裂能力强的组织，如分生组织，A正确；用于植物组织培养的培养基是MS培养基，其成分不同于培养微生物的培养基，所以培养微生物的培养基不能用于植物组织培养，B错误；天竺葵的组织培养需要光照条件，D正确。

10.某兴趣小组拟用组织培养繁殖一种名贵花卉，其技术路线为“取材→消毒→愈伤组织培养→出芽→生根→移栽”。下列有关叙述，错误的是( )

A.消毒的原则是既杀死材料表面的微生物，又减少消毒剂对细胞的伤害 B.在愈伤组织培养中加入细胞融合的诱导剂，可获得染色体加倍的细胞 C.出芽是细胞再分化的结果，受基因选择性表达的调控 D.生根时，培养基通常应含α－萘乙酸等生长素类调节剂 答案 B

解析 组织培养时应确保无菌操作，消毒剂的使用原则是既能杀死材料表面的微生物，又能防止伤害组织细胞，A正确；植物细胞融合是指经纤维素酶和果胶酶处理后得到的原生质体诱导融合，具有细胞壁的愈伤组织细胞不能诱导融合形成染色体加倍的细胞，B错误；出芽和生根都是细胞再分化的结果，其实质是基因的选择性表达，C正确；α－萘乙酸为生长素类似物，可诱导愈伤组织生根，D正确。

11.在植物组织培养过程中，愈伤组织的成功诱导是至关重要的步骤。科学家以食用稗的成熟胚作为外植体，在基本培养基上研究植物生长调节剂对食用稗愈伤组织诱导的影响。实验结果如下表。请回答下列相关问题：

培养基代号 L1 L2 L3 L4 L5 L6

注：愈伤组织诱导率(%)＝产生愈伤组织的外植体数/接种外植体总数×100%。

(1)从上表可以知道，在基本培养基中添加较高浓度的________________有利于食用稗胚形成愈伤组织，而添加__________则不利于食用稗愈伤组织的形成。

(2)影响愈伤组织成功诱导的因素除植物生长调节剂外，培养的环境条件也是重要的因素。现给你提供200个已经消毒过的食用稗的成熟胚，在上述研究的基础上，探究光照对愈伤组织形成的影响。 实验步骤：

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2,4－D/mg·L 1.0 2.0 3.0 3.0 3.0 3.0 －16－BA/mg·L 0 0 0 0.2 0.5 1.0 －1愈伤组织诱导率/% 65.41 68.76 91.01 54.48 57.35 51.71 ①将200个已经消毒过的食用稗的成熟胚平均分为甲、乙两组，分别接种到__________培养基上；

②_______________________________________________________________________； ③_______________________________________________________________________。 预期实验结果和结论：____________________________________________________ ________________________________________________________________________。 答案 (1)2,4－D 6－BA (2)①L3 ②甲组置于光照条件下培养，乙组置于黑暗条件下培养，其他条件相同且适宜 ③培养一段时间后，分别计数甲、乙两组中形成愈伤组织的个数并计算愈伤组织诱导率 ①若甲组的愈伤组织诱导率大于乙组的愈伤组织诱导率，则光照有利于愈伤组织的形成；②若甲组的愈伤组织诱导率小于乙组的愈伤组织诱导率，则黑暗有利于愈伤组织的形成；③若甲组的愈伤组织诱导率和乙组的愈伤组织诱导率相当，则光照、黑暗对愈伤组织的形成没有影响

12.斯图尔德将胡萝卜韧皮部细胞进行培养，最终获得发育完整的新个体，实验过程如下： AB

从根的切片分离出单个细胞――→细胞团――→胚状体―→植株

(1)A过程称为______________，诱导这一过程的物质是__________。这一实验的原理是______________。

(2)植物组织培养过程中多次强调一系列的消毒、灭菌及无菌操作，原因是_______________。 (3)愈伤组织的培养是很重要的一步，一般从接种到出现愈伤组织需要14 d，到时可以看到外植体长出__________色或__________色的__________状的愈伤组织。

(4)培养时注意恒温箱要关闭光源，因为在__________条件下愈伤组织长得更快，两周以后，由于培养基中的营养几乎耗尽，必须______________进行继续培养。

(5)试管苗的培养可分为__________培养和__________培养，必须先进行____________培养，二者的区别在于_________________________________________________。 答案 (1)脱分化 植物激素(或生长素与细胞分裂素)

植物细胞具有全能性 (2)外植体材料体积小，抗性差，如果不小心引起污染，将可能造成培养工作的前功尽弃 (3)乳白 黄 瘤 (4)无光 更换培养基 (5)生芽 生根 生芽 培养基中的生长素和细胞分裂素的比例不同

解析 (1)A过程表示由离体的细胞发育成细胞团，所以为脱分化过程，诱导脱分化过程需要有植物激素，主要为生长素和细胞分裂素，该过程的原理是植物细胞的全能性。(2)同植物体相比较，离体的植物组织抗性差，所以在组织培养整个过程中都要执行严格的消毒程序。(3)愈伤组织为外植体经脱分化形成的乳白色或黄色的瘤状物。(4)进行组织培养过程脱分化阶段不需要光照，但在再分化阶段，由于叶片中叶绿素的形成需要光照，当营养耗尽时，需更换有丰富营养成分的培养基。(5)试管苗的培养分为生根和生芽培养，但是先生芽，才有利于生根，生根培养基与生芽培养基的区别就在于生长素和细胞分裂素的比例不同。

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[真题体验]

13.(2014·江苏，29)为了获得植物次生代谢产物，先用植物外植体获得愈伤组织，然后在液体培养基中悬浮培养。请回答下列问题：

(1)外植体经诱导后形成愈伤组织的过程称为________________。

(2)在愈伤组织悬浮培养时，细胞干重、蔗糖浓度和pH的变化如图所示。细胞干重在12 d后下降的原因有____________；培养液中蔗糖的作用是____________、__________。

答案 (1)脱分化 (2)蔗糖浓度下降，pH降低 提供能源 调节渗透压

解析 (1)外植体在人工、无菌条件下，经脱分化可形成愈伤组织。(2)由图中蔗糖浓度下降，可知外植体离体培养过程中需要消耗蔗糖，12 d后蔗糖浓度变化不大；pH下降会影响酶的活性，愈伤组织细胞对物质的合成小于分解，细胞干重下降。植物组织培养过程中，蔗糖既能维持一定的渗透压，又能提供植物细胞生命活动必需的营养物质(能量)。

14.(2012·新课标全国，39)为了探究6－BA和IAA对某菊花品种茎尖外植体再生丛芽的影响，某研究小组在MS培养基中加入6－BA和IAA，配制成四种培养基(见下表)，灭菌后分别接种数量相同、生长状态一致、消毒后的茎尖外植体，在适宜条件下培养一段时间后，统计再生丛芽外植体的比率(m)，以及再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n)，结果如表所示。

培养基编号 1 2 3 4

回答下列问题：

(1)按照植物的需求量，培养基中无机盐的元素可分为__________和__________两类。上述培养基中，6－BA属于__________类生长调节剂。

(2)在该实验中，自变量是__________，因变量是________________________，自变量的取值范围是__________。

(3)从实验结果可知，诱导丛芽总数最少的培养基是__________号培养基。

(4)为了诱导该菊花试管苗生根，培养基中一般不加入__________(填“6－BA”或“IAA”)。

15 / 16 0.5 浓度/mg·L 6－BA IAA 0 0.1 0.2 0.5 －1m/% 76.7 77.4 66.7 60.0 n/个 3.1 6.1 5.3 5.0 答案 (1)大量元素 微量元素 细胞分裂素

(2)IAA浓度 再生丛芽外植体的比率(m)和再生丛芽外植体上的丛芽平均数(n) 0～0.5 mg·L (3)1 (4)6－BA

解析 (1)根据植物的需求量，组成生物体的元素可以分为大量元素和微量元素，6－BA属于细胞分裂素类生长调节剂。(2)根据实验目的和实验步骤中的数据，可以得出IAA的浓度是自变量，菊花再生丛芽外植体的比率和外植体上的丛芽平均数是因变量。由表中数据可以看出IAA的浓度范围是0～0.5 mg·L。(3)再生丛芽的外植体数乘以外植体上丛芽平均数即为丛芽总数，诱导丛芽总数最少的培养基是1号培养基。(4)当生长素用量与细胞分裂素用量的比值较高时，容易诱导试管苗生根，所以培养基中一般加入IAA，而不加入6－BA。

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