突变体②减数分裂可产生D、dd、Dd、d四种比值相等的配子，突变体③减数分裂可产生D、Dd、dd、d四种配子，比例为1：2：1：2。
【详解】（1）依题意和分析图甲可知：正常情况下，纯合白花植株的基因型有6种：AABBDD、AAbbDD、AABBdd、AAbbdd、aabbDD、aabbdd。
（2）纯合白花植株和纯合橙红色植株（aaBBDD）杂交，所得F1自交产生的F2植株中白色：橙红色：黄色=12：3：1（为9：3：9：1的变式），说明F1的基因型是AaBBDd，进而推知该亲本纯合白花植株的基因型是AABBdd；F2的白花植株的基因型为A-BB--，可见，从F2的白花植株中随机抽取，得到纯合子的概率是1/3AA×1/2（DD+dd）=1/6。
（3）图乙中，突变体①中的两个d基因在同一条染色体上，此变异类型属于染色体结构变异中的重复；突变体③中的D和d所在的同源染色体有3条，该变异类型属于染色体数目变异。
（4）已知体细胞中的d基因数多于D基因时，D基因不能表达。让突变体aaBbDdd与基因型为aaBBDD的植株杂交。若为突变体①，则其减数分裂可产生的配子及其比例为aBD：aBdd：abD：abdd=1：1：1：1，子代的基因型及其比例为aaBBDD：aaBBDdd：aaBbDD：aaBbDdd=1：1：1：1，所以子代中黄花：橙红花=1：1；若为突变体②，则其减数分裂可产生的配子及其比例为aBD：aBdd：aBDd：aBd：abD：abdd：abDd：abd=1：1：1：1：1：1：1：1，子代的基因型及其比例为aaBBDD：aaBBDdd：aaBBDDd：aaBBDd：aaBbDD：aaBbDdd：aaBbDDd：aaBbDd=1：1：1：1：1：1：1：1，所以子代中黄花：橙红花=3：1；若为突变体③，则其减数分裂可产生的配子及其比例为aBD：aBdd：aBDd：aBd：abD：abdd：abDd：abd=1：1：2：2：1：1：2：2，aaBBDdd：aaBBDDd：aaBBDd：aaBbDD：aaBbDdd：aaBbDDd：子代的基因型及其比例为aaBBDD：aaBbDd=1：1：2：2：1：1：2：2，所以子代中黄花：橙红花=5：1。
【点睛】本题考查遗传规律即染色体畸变的相关知识，解题关键是从题中提取信息，并能运用这些信息，结合所学知识解决相关的生物学问题。 29.回答下列I、II两小题。
I．抗虫的转基因植物，含有Bt蛋白，也叫毒蛋白，Bt蛋白本身其实没有任何毒性，但是鳞翅目幼虫的肠道壁上有一种特别的蛋白，喜欢与Bt蛋白结合，引起肠道壁穿孔，导致幼虫死亡。
注： Cef， Carb 抑菌类抗生素
（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，用________________ 作为抗原，通过制备________________ 作为特异探针，对Bt蛋白表达进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有________________ 和________________ 等。
（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要________________ 处理，据图分析，选择抗生素的________________ 很关键。光OD600指的是某种溶液在600nm波长处的吸光值。吸光值与电比色法可用于细菌细胞密度的吸光值的测定，
溶液中吸光物质的浓度呈正比，通常用于细菌细胞密度（OD600）测量；在测量过程中要保持溶液中的细菌处于____状态。 如图可知，________________ （填Cef或Carb）在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。
II．回答与泡菜制作有关的问题：
（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是________________， 在________________ 条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、________________ 和________________ 等。
（2）在泡菜制作过程中________________ ，________________ 两部操作主要是为了减少杂菌，还可以采用________________ ，________________ 两种方法缩短腌制时间。
【答案】 (1). Bt蛋白 (2). 单克隆抗体 (3). 农秆菌转化法 (4). 基因枪法 (5). 脱菌 (6). 种类和浓度 (7). 悬浮 (8). Carb (9). 假丝酵母和乳酸菌 (10). 无氧 (11). 醇类物质 (12). 亚硝酸（HNO2） (13). 热水洗坛壁两次 (14). 加白酒 (15). 入坛前用开水浸泡一下蔬菜 (16). 加入腌制过的泡菜汁 【解析】 【分析】
1.光电比色法是通过测量菌悬液的光密度（OD600）值来估算细菌数，吸光值与溶液中吸光物质的浓度呈正
比。据图可知，浓度为300mg/L时两种抗生素都可以完全抑制农杆菌的生长，所以头孢霉素（Cef）和羧苄青霉素（Carb）对农杆菌都有很好的抑制效果。
2.基因工程的基本操作程序有四步：①目的基因的获取，②基因表达载体的构建，③将目的基因导入受体细胞，④目的基因的检测与鉴定。 3. 制作泡菜的实验原理：
（1）乳酸菌在无氧条件下，将糖分解为乳酸。
（2）利用乳酸菌制作泡菜的过程中会引起亚硝酸盐的含量的变化。
温度过高，食盐用量不足10%、腌制时间过短，容易造成细菌大量繁殖，亚硝酸盐含量增加。一般在腌制10天后，亚硝酸盐的含量开始下降。
（3）测定亚硝酸盐含量的原理：在盐酸酸化条件下，亚硝酸盐与对氨基苯磺酸发生重氮化反应后，与N-1-萘基乙二胺盐酸盐结合形成玫瑰红色染料，与已知浓度的标准显色液目测比较，估算泡菜中亚硝酸盐含量。 【详解】I．（1）抗虫植物的抗虫效果与Bt蛋白的表达量直接相关，可用Bt蛋白作为抗原，通过制备单克隆抗体作为特异探针，利用抗原-抗体杂交方法对Bt蛋白表达量进行检测。将Bt蛋白基因导入植物细胞的方法有农杆菌转化法和基因枪法等。
（2）在农杆菌转化过程中，防止农杆菌过度生长是转基因成败的重要环节。因此植物材料和农杆菌共同培养结束后，转化组织需要脱菌处理，选择合适的抗生素和使用的抗生素浓度是实验成败的关键。光比色法可用于细菌细胞密度的测定，在测量过程中要保持溶液中的细菌处于悬浮状态。分析图示可知，Cef（头孢霉素）和Carb（羧苄霉素）两种抗生素对农杆菌有很好的抑制效果；当Carb浓度为50mg/L时，OD600几乎降为0，即细菌细胞数目为0，说明抗生素Carb浓度为50mg/L时可以完全抑制农杆菌的生长，Carb在低浓度条件下对农杆菌有更好的抑制效果。
II．（1）泡菜发酵过程中的主要菌种是假丝酵母和乳酸菌； 在无氧条件下，微生物将蔬菜中的糖和其他营养物质发酵成有机酸、醇类物质和亚硝酸（HNO2）等。
（2）在泡菜制作过程中热水洗坛壁两次（去除杂菌）、加白酒（抑制杂菌生长）两部操作主要是为了减少杂菌污染；还可以采用入坛前用开水浸泡一下蔬菜（杀死植物细胞）、加入腌制过的泡菜汁（可以提供菌种）两种方法缩短腌制时间。
【点睛】本题考查基因工程及泡菜制作的相关知识，要求考生识记基因工程的原理及操作步骤，掌握各操作步骤中需要注意的细节问题；了解基因工程技术的相关应用和泡菜制作的应用，能结合所学的知识准确作答。
30.研究发现，不同浓度的胰岛素可以缓解肝细胞的损伤，且胰岛素浓度越高保护作用越强。LPS是一种导致肝细胞损伤的常见物质（用生理盐水配置）。现提供正常大鼠的肝脏完成实验步骤。（要求：胰岛素浓度
配置成低中高三个浓度，用细胞存活数作为指标） （1）实验步骤：
①肝细胞悬液的制备：取健康幼年鼠肝脏，适宜条件下剪碎再用________________ 消化，放入卡氏瓶中和 得到细胞悬液后分成________________ 组，________________中进行，________________ 培养。编号A-E备用。
②胰岛素溶液：用________________ 配制低中高三种不同浓度的胰岛素溶液，分别加入对应的C、D、E培养瓶中。
③A组作为空白对照，其余各组加入________________ 。 ④各组存活细胞数的检测。
（2）用柱形图预测各组的实验结果______________ 。
【答案】 (1). 胰蛋白酶 (2). CO2培养箱 (3). 原代 (4). 5 (5). 生理盐水 (6). 等量的
LPS (7). 不同浓度的胰岛素缓解肝细胞的损
伤示意图 【解析】 【分析】
1. 胰蛋白酶能分解蛋白质，胰蛋白酶作用时间过长，则细胞会被消化掉若时间太短，消化不充分。
2. 设计实验遵循对照原则，该实验需要一个空白对照，即添加生理盐水的对照组。
【详解】（1）实验步骤：①肝细胞悬液的制备：取某健康幼年大鼠的肝脏，适宜条件下取出剪碎再用胰蛋白酶消化，经多次洗涤离心处理得到分散的肝细胞；加入适宜的细胞培养液置于卡氏瓶和CO2培养箱中进行原代培养；将培养得到的肝细胞悬液随机分为5组，编号为A-E，每组均需再设置多个重复样液，置于相同且适宜的培养瓶中培养备用。
②胰岛素溶液：用生理盐水配制低、中、高三种浓度的胰岛素溶液，分别加入到C、D、E组的肝细胞悬液中。