(6)放射性同位素(或荧光分子)标记的抗虫基因 (7)受精卵 棉花有抗虫性状的表现

解析 (1)将目的基因和质粒结合形成重组质粒的过程需要同一种限制酶，连接时还需要DNA连接酶。(2)作为基因工程的载体，必须具备三个条件：①在宿主细胞中能稳定保存并能大量复制。②有一个至多个限制酶切点，而且每种酶的切点最好只有一个。③有一定的标记基因，便于筛选。题目中能体现的是①③。(3)由题可知，我们需要的植株是含有抗虫基因的植株，因此要进行筛选，含有抗虫基因的植株也一定含有抗卡那霉素基因，所以要利用卡那霉素进行筛选。(4)抗虫基因最终要表现出抗虫的性状就必须表达，即通过转录和翻译来实现。(5)真核生物的基因的获取常用人工合成的方法，包括反转录法和化学合成法。(6)目的基因的检测最关键是看受体细胞是否含有目的基因，常用DNA分子杂交技术，以已知目的基因片段作为探针，利用碱基互补配对原则进行检测。(7)将目的基因导入植物细胞，可以选用体细胞或受精卵，最后要进行个体水平检测，即看是否能抗虫。

13.人组织纤溶酶原激活物(htPA)是一种重要的药用蛋白，可在转htPA基因母羊的羊乳中获得。流程如下：

(1)htPA基因与载体用切割后，通过DNA连接酶连接，以构建重组表达载体，检测目的基因是否已插入受体细胞DNA，可采用技术。 (2)将重组表达载体导入受精卵常用的方法是 。

(3)若在转htPA基因母羊的羊乳中检测到，说明目的基因成功表达。

答案 (1)同种限制性核酸内切酶(或同种限制酶) DNA分子杂交 (2)显微注射技术 (3)htPA(或人组织纤溶酶原激活物)

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14.(2014·重庆卷，4)如图是利用基因工程培育抗虫植物的示意图。以下相关叙述，正确的是( )

A.②的构建需要限制性核酸内切酶和DNA聚合酶参与 B.③侵染植物细胞后，重组Ti质粒整合到④的染色体上

C.④的染色体上若含抗虫基因，则⑤就表现出抗虫性状 D.⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异 答案 D

解析 重组质粒的构建需要限制性核酸内切酶和DNA连接酶参与，DNA聚合酶一般用于DNA复制过程，故A选项错误；③侵染植物细胞后，重组Ti质粒上的T-DNA整合到棉花细胞的染色体上，故B选项错误；受体细胞的染色体上含抗虫基因，但不代表该基因就一定成功表达，因此不能确定⑤是否表现出抗虫性状，故C选项错误；⑤只要表现出抗虫性状就表明植株发生了可遗传变异，故D选项正确。

15.(2015·重庆卷，6)下列有关人胰岛素基因表达载体的叙述，正确的是( ) A.表达载体中的胰岛素基因可通过人肝细胞mRNA反转录获得 B.表达载体的复制和胰岛素基因的表达均启动于复制原(起)点 C.借助抗生素抗性基因可将含胰岛素基因的受体细胞筛选出来 D.启动子和终止密码子均在胰岛素基因的转录中起作用 答案 C

解析 人肝细胞不能合成胰岛素，则人肝细胞中不含有胰岛素的mRNA，不能通过反转录获得人胰岛素基因，A错误；表达载体的复制启动于复制起点，胰岛素基因的表达启动于启动子，B错误；抗生素抗性基因是标记基因，可用于筛选含胰岛素基因的受体细胞，C正确；启动子在转录过程中起作用，终止密码子在翻译过程中起作用，D错误。