VL-007-08（2015） 第 8 页 共 20 页 溶液B：甲醇 流动相：见表1

表 1

时间（分钟） 溶液A（%） 0.0 99 3.0 99 7.0 19 7.1 99 10.0 99 溶液B(%) 1 1 81 1 1

标准溶液：0.1mg/mL USP对乙酰氨基酚对照品的甲醇溶液 供试溶液：0.1mg/mL对乙酰氨基酚样品的甲醇溶液 色谱系统

（见色谱<621>系统适用性） 模式： LC（注：液相） 检测器：230

色谱柱：4.6mm×10cm 3.5μm C8 柱 柱温：35℃ 流速：1.0mL/min 进样体积：5μL 系统适用性： 样品：标准溶液

适用性要求：拖尾因子：标准溶液不超过2.0 相对标准偏差：不大于1.0% 标准溶液连续进样5针 3.2.5.2.1游离对氨基酚限度

溶液A ，溶液B，流动相和色谱系统：按含量项下制备。 标准溶液：1.25μg/mL USP 对氨基酚对照品的甲醇溶液 供试溶液：25mg/mL样品甲醇溶液

VL-007-08（2015） 第 9 页 共 20 页 系统适用性 样品：标准溶液

[注：对氨基酚和对乙酰氨基酚的相对保留时间分别为0.6和1.0] 系统适用性：

相对标准偏差（RSD）：标准溶液连续进样6针，RSD不得过5.0%。 3.2.5.2.2有机杂质

溶液A： 甲醇，水，醋酸（50：950：1） 溶液B：甲醇，水，醋酸（500：500：1） 流动相：见表2

表 2

时间（分钟） 0 8 53 58 59 73 溶剂：甲醇

标准溶液：1.25μg/mL 对乙酰氨基酚有关物质D对照品和0.25μg/ml 对乙酰氨基酚有关物质J对照品溶液

系统适用性溶液:20μg/ml对乙酰氨基酚对照品，80μg/ml对乙酰氨基酚有关物质B对照品及80μg/ml对乙酰氨基酚有关物质C对照品溶液 供试溶液：25mg/mL对乙酰氨基酚样品溶液 色谱系统：（见色谱<621>，系统适用性） 模式：LC 检测器UV 254nm

柱：4.6-mm×25cm, 5-μm C8柱 流速：0.9mL/min

溶液A 82 82 0 0 82 82 溶液B 18 18 100 100 18 18

VL-007-08（2015） 第 10 页 共 20 页 柱温：40℃ 进样体积：5μL 系统适用性：

样品：标准溶液和系统适用性溶液 相对保留时间见下表： 名称 对乙酰氨基酚 对乙酰氨基酚相关组分Ba 对乙酰氨基酚相关组分Cb 对乙酰氨基酚相关组分Dc 对乙酰氨基酚相关组分Jd 单独的未知杂质 总杂 适用性要求：

拖尾因子：标准溶液对乙酰氨基酚有关物质D不大于2.0

分离度（Resolution）：系统适用性溶液中，对乙酰氨基酚与有关物质B之间的分离度不小于2.0，有关物质B与有关物质C之间的分离度不小于1.5

相对标准偏差：标准溶液连续进样6针，有关物质D的RSD不得过5.0%。 3.2.5.3 EP检验方法

液相色谱法（2.2.29），溶液应临用新制。

供试液：称取0.200g供试品，溶解于2.5mL的4.6g/L的四丁基氢氧化铵（400g/L）的甲醇溶液，再用17.9g/L的Na2HPO4和7.8g/L的NaH2PO4等体积混和液定容至10.0mL。

对照液a：吸取1.0mL供试液,用流动相稀释定容至50.0mL，再吸取5.0mL该稀释溶液用流动相定容至100.0mL。

对照液b：吸取1.0mL对照溶液a，用流动相定容至10.0mL。

对照溶液c：称取50.0mg对氨基酚R，50.0mg对乙酰氨基酚CRS和50.0mg对氯苯乙酰胺R，用甲醇R溶解并定容至200.0mL容量瓶中。量取1.0mL，用流动相定容至250mL。

对照溶液d：称取40.0mg的对硝基酚R，用甲醇R溶解并定容至100mL，吸取5.0mL用流动相定容至100.0mL。

相对保留时间 0.43 0.67 0.71 1.0 1.73 - - 相对响应因子 - 1.2 1.0 1.0 - 1.0 - 可接受标准NMT（%） - 0.05 0.05 0.05 0.001 0.05 0.1

VL-007-08（2015） 第 11 页 共 20 页 色谱柱：L=0.25m，Φ＝4.6mm；固定相：C8柱（5μm）；柱温：35℃。

流动相：17.9g/L磷酸氢二钠:7.8g/L磷酸二氢钠:4.6g/L四丁基氢氧化胺（400g/L）甲醇溶液＝375:375:250。

流速：1.4mL/min；检测波长：245nm；进样量：20μl；运行时间：12倍的对乙酰氨基酚保留时间。

参照对乙酰氨基酚（保留时间约4分钟）的相对保留值：杂质K约0.8；杂质F约3；杂质J约7。

系统适用性试验：用对照溶液（c）：

- 分离度：杂质K与对乙酰氨基酚两峰之间的分离度不小于4.0； - 信噪比：杂质J峰，最小值为50； - 理论塔板数：应不小于2000； - 对称因子：应为0.8-1.5； 3.2.6系统稳定性

按照3.2.5项下要求，准备好对照溶液与样品溶液后，对仪器进行设置，其中进样顺序的设置为空白，对照溶液（系统适用性试验），连续12批样品分析。每批样品平行试验2份，3批样品进样完毕后，进样一针对照溶液，与之前的对照溶液进行相对标准偏差计算，RSD应符合规定，证明在一个系统适用性后，连续进样12批样品分析，系统适用性依旧符合规定，检验结果准确可靠。以此来证明系统稳定性。 3.2.7系统重现性

按照3.2.5项下要求，在不同日期重复三次，与之前的系统适应性要求进行相对标准偏差计算，RSD应符合规定。

注：以上3.2.1-3.2.4参照SOP：MC-009-06进行，新增仪器应按首次检定定项目进行。其 中系统稳定性一项与《连续检验系统稳定性验证》，内容一致，因此经过性能确认后，不必重新做《连续检验系统稳定性验证》。 4. 确认标准