沙门菌 蜡样芽胞杆菌 甘露醇卵黄多黏菌素MYP BP、MM、SC增菌 30℃EB48H、LB24H SPS 3.5%氯化钠肉汤（增菌） 葡萄肉汤浸液（增菌） 布氏肉汤（增菌） 改良磷酸盐缓冲液（增菌） 粉红色菌落，周围有粉红色晕，产生卵磷脂酶所致 单增李斯特菌G+ 胰酪胨大豆培养基 产气荚膜梭菌 副溶血性弧菌 霍乱 肠道致病菌 溶血性链球菌 空肠弯曲菌 小肠结肠耶尔 庆大霉素 麦康凯（抑制剂胆盐） 血平板、匹克肉汤、 GIN-1、改良克氏Y 三糖、动力，呈伞或月芽生长 链激酶、杆菌肽试验 42℃，微需氧 GIN-1红色牛眼状菌落。尿素+、动力+、V-P+、鸟氨酸+、甘露醇+、山梨醇+ 为防止人工游泳池生长藻类，加入0.25---0.5%mg/L硫酸铜。

153．GB18466-2001《医疗机构污水排放要求》2002年3月1日颁布，GB18466-2005《医疗机构水污染排放标准》2006年1月1日颁布，取样200ml；

传染病、结核病医疗机构水污染排放控制项目：粪大肠菌群数100、肠道致病菌、肠道病毒、结核杆菌、总余氯0.5

综合医疗机构和其他医疗机构水污染排放控制项目：粪大肠菌群数500、肠道致病菌、肠道病毒、总余氯0.5

①医疗机构水污染中粪大肠菌群的检验程序：污水200ml、污泥200g稀释处理→乳糖胆盐发酵试验44℃→EMB平板分离→革兰染色鉴定→乳糖蛋白胨培养鉴定→计数，报告结果。

②医疗机构沙门菌的检验程序：污水稀释处理→双倍浓缩SF增菌→SS平板、BS平板分离→三糖铁生化鉴定→血清学鉴定→计数，报告结果。生化：葡萄糖+、甘露醇+、麦芽糖+（猪、雏-）、硫化氢+、乳糖-、蔗糖-、靛基质-、尿素-、动力+（鸡、雏、伤-）

③医疗机构志贺菌的检验程序：污水稀释处理→双倍浓缩GN增菌→EMB平板分离→三糖铁生化鉴定→血清学鉴定→计数，报告结果。

④结核菌的检验程序：污水集菌→改良罗氏（小川）培养基培养（2周或8周淡黄色或无色粗糙菌）→抗酸染色初步鉴定→致病力试验点→计数，报告结果。污水集菌：过滤离心法或直接离心法。乙酸纤维滤膜（0.3—0.7）水样500ml抽滤，沉淀物用4%的硫酸处理30分钟。致病力试验：小白鼠尾静脉接种。

⑤蛔虫卵检验方法：检测污泥蛔虫时，100g样品中加入5ml 3%盐酸或3%甲醛4-10℃保存，以防止微生物繁殖和蛔虫卵的发育。如有余氯则取样后立即用5%硫代硫酸钠中和。

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蛔虫卵收集：1、分离、50 ml 5%氢氧化钠2、水洗3、漂浮—饱和硝酸钠或饱和氯化钠（量20倍于沉淀物）4、沉淀

镜检：加入30%次氯酸钠A死亡率=M死亡蛔虫卵数/ M死亡蛔虫卵数+存活蛔虫卵数*100% SS平板 强选择性培养基 抑制剂 煌绿、胆盐、硫代硫酸钠、枸橼酸盐 营养物 牛肉浸膏蛋白胨 鉴别用糖 乳糖 154．空气微生物检测：撞击法---对空气微生物捕获率达95%。自然沉降法---通常设置5个采样点，高度1.2—1.5M，采样点离墙1M以上。皿暴露5分钟。

155．茶具微生物检测：采样---茶具内外缘1—1.5cm高处一圈涂抹50cm24小时内送样。或5cm×5cm纸片两张贴30秒。

156．毛巾、床上卧具微生物检测：毛巾、枕巾对折后两面的中央各25cm2（5cm×5cm），床单、被单上下两部位各25cm2

157．拖鞋微生物检测：鞋面与脚趾处（5cm×5cm）涂抹三次，一双为一份样，共50cm2

游泳池水微生物检测：1、采样瓶的预处理：灭菌前125ml+0.1 ml 10%（m/m）硫代硫酸钠,121℃高压20分钟。 2、滤膜在蒸馏水中煮沸15分钟，灭菌3次。前两次煮沸需更换水洗涤2—3次除去残留溶剂。滤器用121℃高压20分钟或点燃的酒精棉球火焰灭菌。水样在-0.5个大气压下抽滤。

158．浴盆、脸（脚）盆微生物检测：选择盆内侧壁1/2--1/3高度采样。浴盆四壁、盆底梅花5个布点，放入125ml。脸（脚）盆在相对两侧壁2个布点放入50ml生理盐水中。1ml相当于1cm2

159．SARS的检测方法描述：1、用ELISA可检测SARS病人血清中的抗体（发病21天后的血清标本所得结果比较可靠）。2、IFA可作为血清SARS-CoV抗体检测方法3、用RT-PCP检测特异的SARS-CoV RNA片段，但阴性结果不能排除感染 4、Ver0利用可分离SARS-CoV，但阴性结果不能排除感染。血清学诊断的金标准是：SARS冠状病毒中和抗体试验，检测的是总抗体；SARS-CoV在Ver0-E6细胞中培养滴度最高

大肠埃希菌质粒：F因子、R因子、col因子（大肠杆菌素因子） SPA：金黄色葡萄球菌A蛋白

食品卫生微生物检验

1. 采样：乳及制品按1/1000，不足1000者抽1件。蛋品检查沙门菌按5%抽，不少于3件，听装

时取250kg；测菌总和大肠采前中后3次，每次50克，每批合为1个样。 2. 送检：不超过3小时。

3. 检验：阳性样品发出报告后3天始能处理，进口食品阳性品应保存6个月。

食品卫生中的致病菌11种：沙门菌、志贺菌、致病性大肠埃希菌、副溶血弧菌、小肠结肠炎耶尔林菌、空肠弯曲菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌、肉毒梭菌、产气荚膜梭菌、蜡样芽胞杆菌。

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常规规定：菌落总数、大肠菌群、沙门菌、志贺菌、金黄色葡萄球菌、溶血性链球菌。 GB4789。1—4789。31—2003《食品卫生检验方法微生物学部份》，2003 (1) 食品菌落总数：

(2) 食品大肠菌群：（3×3管）→乳糖胆盐发酵（产气）（1ml下单糖上双）→伊红美兰（分离）→G—乳糖产气（证实）→查MPN报告。

(3) 食品粪大肠菌群：产气→产气种EC肉汤→伊红美兰→报告100ml（g）粪大肠菌群的MPN (4) 食品冻肉等沙门菌：缓冲蛋白胨水前增菌→亚硫酸铋和DHL平板或（HE、WS、SS）→三糖铁、蛋白胨水（供靛基质试验）、尿素琼脂PH7.2、氰化钾、赖氨酸脱羧酶试验。

硫化氢 靛基质 尿素 氰化钾 赖氨酸脱羧酶 A1 + — — — + 沙门菌属

A2 + + — — + 沙门菌属（少见）爱德菌

B1 — — — — + 沙门菌属、大肠埃希菌、甲型副伤寒沙门 — — — — — 菌、志贺菌属（ B2 — + — — + 大肠埃希菌、志贺菌属

— + — — —

A2补做甘露醇、山梨酸；

B1补做β－半乳糖苷(ONPG)试验，+为大肠埃希菌，—为沙门菌但赖氨酸+，甲伤沙赖氨酸—。 必要时沙门菌生化群鉴定：O、H、Vi抗原鉴定。

(5) 志贺菌：

GN增菌→HE或SS琼脂平板（无色透明，不发酵乳糖菌落）→三糖铁琼脂和葡萄糖半固体。 GN增菌→麦康凯或伊红美兰（无色透明，不发酵乳糖菌落）→三糖铁琼脂和葡萄糖半固体。

凡是乳糖、蔗糖不发醇，葡萄糖产酸不产气，无动力。可做血清分型。

(6) 致泻大肠埃希菌：

增菌肉汤→麦康凯或伊红美兰（无色透明，不发酵乳糖菌落）→三糖铁琼脂或克式双糖，蛋白胨水、半固体、尿素琼脂PH7.2、氰化钾肉汤、赖氨酸脱羧酶试验。36℃过夜。

大肠埃希菌：三糖铁斜面产酸或不产酸，底层产酸，硫化氢—，氰化钾—、尿素—

(7) 副溶血性弧菌：3.5%氯化钠三糖铁，底层变黄，葡萄糖产酸不产气，斜面不变乳糖、蔗糖不分解，有动力，不产生硫化氢，G—。在7%盐的胨水中生长。3.5%氯化钠胨水小鼠腹腔注射。

(8) 金黄色葡萄球菌：3.5%氯化钠肉汤或胰酪胨大豆肉汤→血平板

4．细菌生长所需的常用元素：钾、磷、硫10-3—10-5mol/L。微量元素：钴、锌、锰10-7—10-8mol/L。 5．肺炎衣原体可引起人类原发性非典型肺炎，多发儿童和青少年。

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6．细胞分散剂：胰酶、乙二胺四乙酸钠（EDTA）、灰色链丝菌酶。 7．MRSA---耐甲氧西林金黄色葡萄球菌。

8．密度梯度离心常用的溶媒：蔗糖、甘油、氯化铯、Kenogafin肾造影剂

9．检疫期限的确定：根据潜伏期的长短确定接触者的留验、检疫、医学检验期限。为常见的潜伏期增加1-2天。

10．常用的化学消毒剂：醇类、重金属盐类、氧化剂、表面活性剂、烷化剂

11．分枝杆菌无内毒素，也不产生外毒素、侵袭性酶类，致病作用主要靠菌体成份，特别是胞壁中所含大量的脂质。结核分枝---罗氏，在液体培培养呈膜状生长。钩端---Korthof培养。

12．液体冲击式微生物气溶胶采样器，利用喷射气流将空气中微生物粒子采集于采样液体中。 13．DNA分子中核苷酸排列顺序-----一级结构；双螺旋结构---二级

14．转座子功能----促进DNA重排、引起基因扩增、引起基因重复、造成缺失突变、

15．噬菌体主要应用---细菌的鉴定与分型、分子生物学研究的重要工具、细菌感染的诊断与治疗。 16．链球菌主要抗原：蛋白质抗原、多糖抗原、核蛋白抗原

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