中南民族大学药学院化学生物学与药学实验教案中心
《药物分析实验》讲义
赵丹王少兵 林亲雄 编写 适用专业：药学专业 药物制剂 化学生物学专业 2018年9月
目 录
实验一 阿司匹林肠溶片的鉴别和含量测定…………………3 实验二异烟肼的杂质检查和异烟肼片的含量测定………6 实验三葡萄糖注射液的分析…………………………………8 实验四复方磺胺甲噁唑片的含量测定………………………10 实验五高效液相色谱法测定天麻药材的天麻素含量………12
实验一：阿司匹林肠溶片的鉴别和含量测定
实验学时：6学时 实验类型：验证性实验
教案方式：集中授课，分小组实验
一、实验目的
1. 掌握水杨酸类药物的鉴别反应实验原理。
2. 掌握比色法检查阿司匹林片剂中游离水杨酸的实验原理。
3. 掌握两步滴定法测定阿司匹林片剂中药物含量的实验原理。
二、实验原理
1. 鉴别：阿司匹林加热水解后导致游离水杨酸产生，水杨酸及其盐在中性或弱酸性条件下 2. 杂质检查：游离水杨酸含有酚羟基，可与高铁盐反应显紫堇色，因此，将适量阿司匹林供试品溶液与一定量水杨酸对照品溶液生成的色泽对比，即可控制阿司匹林中游离水杨酸的含量<比色法）。 3. 含量测定：通过两步滴定法完成，因为阿司匹林中存在酸性的稳定剂，所以不能用氢氧化钠直接滴定，必须使用两步滴定法。 首先用氢氧化钠滴定液中和制剂中其它的酸性物质和阿司匹林上游离的羧酸： COOHCOONaOHNaOHOHCOOHOCOCH3NaOHCOONaOCOCH3 然后在加入过量的氢氧化钠滴定液，加热水解，氢氧化钠中和水解所产生的醋酸，然后用硫酸回滴，测得中和醋酸所消耗的氢氧化钠的量。该消耗量和阿司匹林的摩尔比为1:1。 COONaNaOHCOONa+CH3COONaOHNa2SO4+2H2OOCOCH32NaOH+H2SO4 三、实验方法 1. 鉴别 取本品的细粉适量<约相当于阿司匹林0.1g），加水10ml，煮沸，放冷，加三氯化铁试液1 滴，即显紫堇色。 2. 检查<游离水杨酸） 取本品5 片，研细，用乙醇30ml分次研磨，并移入100ml量瓶中，充分振摇，用水稀释至刻度，摇匀，立即滤过，精密量取滤液6ml，置50ml纳氏比色管中，用水稀释至50ml，立即加新制的稀硫酸铁铵溶液3ml<硫酸铁铵溶液配置：取 1mol/L盐酸溶液1ml，加硫酸铁铵指示液2ml后再加水适量使成100ml），摇匀，30秒钟内如显色，与对照液<精密量取0.01％水杨酸溶液4.5ml，加乙醇3ml，0.05％酒石酸溶液1ml ，用水稀释至50ml，再加上述新制的稀硫酸铁铵溶液3ml，摇匀）比较，不得更深(1.5％>。 3. 含量测定 取本品40片，研细，用中性乙醇70ml，分数次研磨，并移入100ml量瓶中，充分振摇，再用水适量洗涤研钵数次，洗液合并于100ml量瓶中，再用水稀释至刻度，摇匀，滤过，精密量取滤液10ml<相当于阿司匹林0.3g），置锥形瓶中，加中性乙醇<对酚酞指示液显中性）20ml，振摇，使阿司匹林溶解，加酚酞指示液3 滴，滴加氢氧化钠滴定液<0.1mol/L）至溶液显粉红色，再精密加氢氧化钠滴定液<0.1 mol/L）40ml，置水浴上加热15分钟并时时振摇，迅速放冷至室温，用硫酸滴定液<0.05mol/L> 滴定，并将滴定的结果用空白实验校正。每1ml硫酸滴定液<0.05 mol/L>相当于18.02mg C9H8O4。 四、计算 片剂按标示量计算的百分含量定义是： 上式中，V0和V分别为空白实验和样品实验时消耗硫酸滴定液的体积 五、实验结果与讨论 记录鉴别、检查和含量测定的结果，并对其讨论。 六、思考题 1）请写出阿司匹林肠溶片含量测定中含量的计算公式。 2）含量测定中为什么要在水浴上加热。 附录：滴定液的标定 氢氧化钠滴定液(0.1mol/L>：取在105℃干燥至恒重的基准邻苯二甲酸氢钾约0.6g, 精密称定，加新沸过的冷水50ml，振摇，使其尽量溶解；加酚酞指示液2滴,用本液滴定；在接近终点时,应使邻苯二甲酸氢钾完全溶解，滴定至溶液显粉红色。每1ml氢氧化钠滴定液(0.1mol/L>相当于20.42mg的邻苯二甲酸氢钾。 硫酸滴定液(0.05mol/L>：取在270～300℃干燥至恒重的基准无水碳酸钠约0.25g，精密称定，加水50ml使溶解，加甲基红－溴甲酚绿混合指示液10滴，用本液滴定至溶液由绿色转变为紫红色时，煮沸2分钟,冷却至室温，继续滴定至溶液由绿色变为暗紫色。1ml硫酸滴定液(0.05mol/L>相当于5.30mg的无水碳酸钠。 实验二：异烟肼的杂质检查和异烟肼片的含量测定 实验学时：6学时 实验类型：验证性实验 教案方式：集中授课，分小组实验 一、实验目的 1. 掌握薄层色谱检查杂质的实验原理和操作技能。 2.掌握溴酸钾法测定异烟肼含量测定原理和操作方法。 二、实验原理 1. 游离肼的检查 异烟肼是一种不稳定的药物，可能会在制备时由原料引入游离肼，或在贮藏过程中降解产生游离肼，肼是一种诱变剂和致癌物质，因此应对其进行限量检查。本实验采用薄层色谱法检查，利用药物与杂质用异丙醇-丙酮<3 : 2）展开后，肼能与对二甲氨基苯甲醛反应生成腙显色，进行比较检查。 2. 片剂的含量测定 异烟肼结构中的酰肼基团具有还原性，在强酸性介质中可与溴酸钾定量反应，反应式如下： 三、实验方法 1. 异烟肼中游离肼杂质检查 取本品，加水制成50 mg/ml的异烟肼水溶液，作为供试品溶液。另取硫酸肼加水制成每1 ml中约含有0.20 mg<相当于游离肼50 μg）的溶液，作为对照品溶液。照薄层色谱法，吸取供试品溶液10 μl和对照品溶液2 μl，分别点于同一硅胶G薄层板上，以异丙醇-丙酮<3 : 2）为展开剂，展开，晾干，喷以乙醇制的对-二甲氨基苯甲醛试液，放置15分钟后检视。在供试品溶液主斑点前方与对照品溶液主斑点相应位置，不得显黄色斑点。