复制和遗传。
⑶对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等,最终获得所需的遗传性状或表达出所需的产物。
⑷经过限制性内切酶酶解和连接酶作用,形成重组DNA分子,并对其加以克隆和筛选。 ⑸对获得外源基因的受体细胞(转化子)进行筛选和鉴定。 上述五个步骤按通常的操作技术应依( C )顺序进行。
A. ⑴、⑵⑶、⑷、⑸ B. ⑴、⑵⑸、⑷、⑶ C. ⑴、⑷⑵、⑸、⑶ D. ⑴、⑵⑸、⑶、⑷
10.下列对克隆羊叙述不正确的是( A )。
A.. 克隆羊是无性生殖产生的 B. 克隆绵羊“多莉”采用的是母体乳腺上皮细胞
C. 克隆绵羊“多莉”利用了三只绵羊 D. 克隆绵羊“多莉”用的是16细胞“胚”植入代孕母羊 二、判断题
1. 某些细菌通过噬菌体获得的外源DNA片段,经过重组进入自己染色体组的过程称为转导。( × )
2. 由于外源DNA的进入而使细胞遗传性质改变称为转化。( √ ) 3. 现代生物技术是以20世纪70年代DNA重组技术的建立为标志。(√ ) 4. 由动物胚胎核移植培育出的新个体也属于克隆动物。( × ) 5. 蛋白质组学是研究细胞内所有蛋白质及其动态变化规律的科学。(√ ) 三、名词解释
生物技术:生物技术是指以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需要的产品或达到某种目的的一系列技术。 基因工程:根据分子生物学和遗传学原理,设计并实施把一个生物体中有用的DNA转入另一个生物体中,使后者获得所需要的遗传性状或表达出所需要的产物,实现该技术的商业价值。
细胞工程:总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。 蛋白质工程: 是指在基因工程的基础上,结合蛋白质结晶学,计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识通过对基因的人工定向改造等手段,对蛋白质进行修饰,改造和拼接以生产出能满足人类需要的新型蛋白质的技术。
酶工程: 酶工程是指利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造,并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术,酶的修饰改造技术及酶反应器的设计等技术。 发酵工程: 发酵工程是利用微生物特定性状好功能,通过现代化工程技术生产有用物质或其直接应用于工业化生产的技术体系,是将传统发酵与现代的DNA重组、细胞融合、分子修饰和改造等新技术结合并发展起来的发酵技术。
基因克隆:基因克隆是70年代发展起来的一项具有革命性的研究技术,可概括为∶分、切、连、转、选。\分\是指分离制备合格的待操作的DNA,包括作为运载体的DNA和欲克隆的目的DNA;\切\是指用序列特异的限制性内切酶切开载体DNA,或者切出目的基因;\连\是指用DNA连接酶将目的DNA同载体DNA连接起来,形成重组的DNA分子;\转\是指通过特殊的方法将重组的DNA分子送入宿主细胞中进行复制和扩增;\选\则是从宿主群体中挑选出携带有重组DNA分子的个体。
限制性内切酶:是细菌产生的一类能在特定位点切断外源DNA的蛋白酶。 核酸杂交:两条核酸单链可以通过序列互补形成双链化合物的过程。 四、问答题
1. 什么是生物技术,它包括哪些基本内容?
生物技术是指以现代生命科学为基础,结合先进的工程技术手段和其他基础科学的科学原理,按照预先的设计改造生物体或加工生物原料,为人类生产出所需要的产品或达到某种目的的一系列技术。
一般认为,生物技术通常包括基因工程、细胞工程、蛋白质工程、酶工程和发酵工程5个方面内容。此外也包括生物材料技术、分子诊断技术、基因治疗技术、生物芯片技术、环境污染检测和治理的生物技术等。
2. 什么是基因工程?其研究的基本路线是什么?
根据分子生物学和遗传学原理,设计并实施把一个生物体中有用的DNA转入另一个生物体中,使后者获得所需要的遗传性状或表达出所需要的产物,实现该技术的商业价值。
基本步骤:
(1)获得目的基因:通过基因文库、反转录法、PCR等方法获得目的外源基因。 (2)重组DNA分子:在限制内切酶和连接酶作用下与克隆载体连接,形成新的重组DNA分子,需要对重组DNA分子进行克隆和筛选。
(3)转化:用重组DNA分子转化受体细胞,使之进入受体细胞并能够在受体细胞中复制和遗传。
(4)转化子筛选和鉴定:对转化子(获得外源基因的受体细胞)进行筛选和鉴定。 (5)获得外源基因的遗传性状或需要的产物:对获得外源基因的细胞或生物体通过发酵、细胞培养、养殖和栽培等,最终获得所需要的遗传性状或表达出所需要的产物。 3. 什么是细胞工程?主要技术有哪些?
总的来说,它是应用细胞生物学和分子生物学的理论和方法,按照人们的设计蓝图,进行在细胞水平上的遗传操作及进行大规模的细胞和组织培养。 主要技术:
植物细胞工程包括:植物组织培养,植物体细胞杂交,
动物细胞工程包括:动物细胞培养,动物细胞融合,单克隆抗体,胚胎移植,核移植,胚胎分割等。
4. 什么是蛋白质工程?其研究内容和主要步骤有哪些? 是指在基因工程的基础上,结合蛋白质结晶学,计算机辅助设计和蛋白质化学等多学科的基础知识通过对基因的人工定向改造等手段,对蛋白质进行修饰,改造和拼接以生产出能满足人类需要的新型蛋白质的技术。
研究内容:蛋白质工程是在基因重组技术、生物化学、分子生物学、分子遗传学等学科的基础之上,融合了蛋白质晶体学、蛋白质动力学、蛋白质化学和计算机辅助设计等多学科而发展起来的新兴研究领域。其内容主要有两个方面:根据需要合成具有特定氨基酸序列和空间结构的蛋白质;确定蛋白质化学组成、空间结构与生物功能之间的关系。在此基础之上,实现从氨基酸序列预测蛋白质的空间结构和生物功能,设计合成具有特定生物功能的全新的蛋白质,这也是蛋白质工程最根本的目标之一。 主要步骤:
(1)从生物体中分离纯化目的蛋白; (2)测定其氨基酸序列;
(3)借助核磁共振和X射线晶体衍射等手段,尽可能地了解蛋白 质的二维重组和三维晶体结构;
(4)设计各种处理条件,了解蛋白质的结构变化,包括折叠与去折叠等对其活性与功能的影响;
(5)设计编码该蛋白的基因改造方案,如点突变; (6)分离、纯化新蛋白,功能检测后投入实际使用。
5. 何谓酶工程? 酶工程是指利用酶、细胞器或细胞所具有的特异催化功能或对酶进行修饰改造,并借助生物反应器和工艺过程来生产人类所需产品的技术。酶工程包括酶的固定化技术、细胞的固定化技术,酶的修饰改造技术及酶反应器的设计等技术。 6. 什么是现代发酵工程?发酵工程的基本步骤是什么? 现代发酵工程主要指利用利用微生物、动植物细胞和基因工程菌在在人工生物反应器(发酵罐)中培养而获得产物的工业过程。 ①、培养基制备 ②、无菌空气制备
③、菌种与种子扩大培养 ④、发酵培养
⑤、通过化学工程技术分离、提取、精制。
7. 现代生物技术将对人类社会产生怎样的影响?
农业方面:用基因工程的方法培育高抗病性,抗倒伏,抗盐,抗寒农作物。利用基因工程手段生产的工程菌农药,可以实现高效,低毒,低残留杀灭病害虫。利用同位素育种和常规育种相结合,筛选高产,抗病抗逆境等优良性状的农作物。
工业方面:基因工程手段生产纤维素酶制剂,可以大大提高衣物洗涤效率。提高啤酒原料大麦芽的纤维素转化效率,使啤酒品质更好;提高橄榄油榨出率和纯度;提高家畜对饲料的消化利用率,家畜生长更快,并且避免一些由于饲料消化不良引起的疾病;利用纤维素酶制剂可以对服装行业生产的衣物布料实现生物打磨和生物抛光,去除布料微小的纤维碎屑。利用基因工程手段生产的溶菌酶杀菌剂,有替代抗生素治疗奶牛乳房炎的前景,有高效安全,不易产生抗药性的特点。
军事方面:除了生产和防御生化武器之外,还有筛选能富集放射性元素的微生物,吸收核辐射地区的放射性元素,加快战争灾害地区的净化。利用某些特殊微生物的特性,吸附于地雷等爆炸物周围并释放荧光或者其他易检测到的信号,可以辅助排除地雷,增加排雷效率,减少工兵伤亡。
医学方面:利用生物工程手段,用大肠杆菌表达系统,酵母表达系统和真核细胞表达系统生产疫苗和蛋白质药品。扩大了产量,降低了成本。 林业方面:生物农药,抑制林区病虫害。 其他方面:
体育运动方面:随着生物技术的发展,人类对于人体的机制和构造有更清晰的认识,从而推动训练方法,运动器材,运动损伤恢复疗法等相关一系列专业水平的提高。 日常生活方面:生物技术方法生产的昆虫病毒可以特异性地杀灭某种或者几种居家害虫,而对人畜无害。
8. 人类基因组计划的内容和任务是什么?将解决什么问题?它对生命科学、医学的发展及其对人类产生什么影响?
内容:绘制人类基因连锁图,绘制物理图,人类基因组测序,其他物种基因组分析
任务:HGP的主要任务是人类的DNA测序,此外还有测序技术、人类基因组序列变异、功能基因组技术、比较基因组学、社会、法律、伦理研究、生物信息学和计算生物学、教育培训等目的。
解决问题:解码生命、了解生命的起源、了解生命体生长发育的规律、认识种属之间和个体之间存在差异的起因、认识疾病产生的机制以及长寿与衰老等生命现象、为疾病的诊治提供科学依据。
医学影响:基因诊断、基因治疗和基于基因组知识的治疗、基于基因组信息的疾病预防、疾
病易感基因的识别、风险人群生活方式、环境因子的干预。 人类影响
对人类疾病基因研究的贡献
人类疾病相关的基因是人类基因组中结构和功能完整性至关重要的信息。对于单基因病,采用“定位克隆”和“定位候选克隆”的全新思路,导致了亨廷顿氏舞蹈症、遗传性结肠癌和乳腺癌等一大批单基因遗传病致病基因的发现,为这些疾病的基因诊断和基因治疗奠定了基础。对于心血管疾病、肿瘤、糖尿病、神经精神类疾病(老年性痴呆、精神分裂症)、自身免疫性疾病等多基因疾病是目前疾病基因研究的重点。健康相关研究是HGP的重要组成部分,1997年相继提出:“肿瘤基因组解剖计划”“环境基因组学计划”。 对医学的贡献
基因诊断、基因治疗和基于基因组知识的治疗、基于基因组信息的疾病预防、疾病易感基因的识别、风险人群生活方式、环境因子的干预。 对生物技术的贡献
胚胎细胞克隆羊——多利 胚胎细胞克隆羊——多利 ⑴基因工程药物
分泌蛋白(多肽激素,生长因子,趋化因子,凝血和抗凝血因子等)及其受体。 ⑵诊断和研究试剂产业
基因和抗体试剂盒、诊断和研究用生物芯片、疾病和筛药模型。 对细胞、胚胎、组织工程的推动
胚胎和成年期干细胞、克隆技术、器官再造。 对制药工业的贡献
筛选药物的靶点:与组合化学和天然化合物分离技术结合,建立高通量的受体、酶结合试验以知识为基础的药物设计:基因蛋白产物的高级结构分析、预测、模拟—药物作用“口袋”。
个体化的药物治疗:药物基因组学。 对社会经济的重要影响
生物产业与信息产业是一个国家的两大经济支柱;发现新功能基因的社会和经济效益;转基因食品;转基因药物(如减肥药,增高药) 对生物进化研究的影响
生物的进化史,都刻写在各基因组的“天书”上;草履虫是人的亲戚——13亿年;人是由300~400万年前的一种猴子进化来的;人类第一次“走出非洲”——200万年的古猿;人类的“夏娃”来自于非洲,距今20万年——第二次“走出非洲”? 带来的负面作用
侏罗纪公园不只是科幻故事;种族选择性灭绝性生物武器;基因专利战;基因资源的掠夺战;基因与个人隐私。
9. 简述开展水稻基因组计划的意义。
国际水稻基因组计划破译了水稻遗传的“密码本”,科学家可以根据测序得到的精确序列,对水稻中影响产量、口感、香味、抗病虫害等重要农业性状的基因进行鉴定,并采取措施提高水稻的产量和质量。这些将给水稻育种带来革命性的影响。 国际水稻基因组计划的完成,在农业生产上的意义可以与人类基因组计划对人类健康的意义相媲美。 获得水稻基因4号染色体的序列分析结果,将有助于了解小麦、玉米等其它禾本科农作物的基因组,为培育具有高产、优质、抗病虫害、抗逆等优良性状的水稻新品种打下良好基础。