7.影响花药培养的因素有哪些？

答：一、基因型 二、植株的生理状态 三、培养基 四、预处理 五、培养条件 六、接种密度

8. 单倍体育种的意义是什么？

答：一、良好的遗传研究材料 二、加速育种进程 三、提高选育效率 四、突变体选育 五、遗传转化受体 六、利用单倍体育种对栽培品种进行纯化

9. 离体培养条件下小孢子是如何发育成完整植株的？

答：小孢子进行早期分裂，经多次分裂后形成多细胞花粉，其中，经胚胎发生的花粉粒最终会形成多细胞的球胚，并进一步发育成植株（如颠茄、芸薹、曼陀罗、天仙子、烟草等）。而不经胚胎发生的花粉粒则会经由器官发生途径分化出芽和跟，最终形成完整植株（如拟南芥、芦笋和黑小麦等）。

10. 如何对获得的花粉植株进行倍性鉴定？染色体加倍的方法有哪些？

答：倍性鉴定有直接鉴定法和间接鉴定法两大类，其中间接鉴定法分为1.植株形态观察法 2.细胞形态鉴定法 3.DNA含量测定 4.核体积测量法 5.生化与分子标记鉴定，染色体加倍的方法有1.小苗处理法 2.茎尖处理法 3.培养基处理法

11、植物胚胎培养

1.幼胚培养的关键技术是什么? 答:幼胚剥离（关键）

必须把胚从周围的组织中剥离出来。因为胚剥离的成功与否是幼胚能否成功的关键。 幼胚是一种半透明、高黏稠状组织，剥离过程中极易失水干缩，因此在剥离时一定要注意保湿，无菌，且操作要迅速。

胚柄的存在对于幼胚培养能否成活及成苗率有重要影响。所以幼胚剥离时应带胚柄一同取出。

2.幼胚培养时胚的发育方式有哪几种?各有何特点? 答:幼胚培养时，生长方式有三种：

a、胚性发育：幼胚接种到培养基上以后，仍然按照在活体内的发育方式发育，最后形成成熟胚（有时甚至可能类似种子），然后再按种子萌发途径出苗形成完整植株。这种途径发育的幼胚，一般一个幼胚将来发育成一个植株。

b、早熟萌发：幼胚接种后，不继续胚性生长，而是在培养基上迅速萌发成幼苗，这种现象即称为早熟萌发。这种方式形成的幼苗往往细弱、畸形，难以成活。因此在幼胚培养中应防

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止早熟萌发。

c、产生愈伤组织：在幼胚培养中常能在追加生长调节剂时诱发愈伤组织产生、进而分化形成胚状体或不定芽。

3.在实际操作中如何确定胚囊的发育时期? 答:

4.影响胚珠培养成功的因素有哪些?

答:1)材料选择 2)发育时期:已授粉具球形或此期以后胚的胚珠容易培养成种子。 未授粉胚珠培养以接近成熟期的八核囊或成熟胚囊为佳。 3)胎座组织 4)培养基

5.未授粉子房培养与授粉后子房培养有何不同? 答: 传粉和受精后的子房,仍需进行表面消毒后再接种

未授粉的子房可将花被表面消毒后,在无菌条件下直接剥取子房接种

6.植物胚乳有哪些类型?

答:①被子植物胚乳：双受精产物，属三倍体组织

②裸子植物胚乳：很特殊，在受精前就形成，是配子体的一部分，由大孢子直接分裂发育而成，因而是单倍体组织。

7.胚乳培养取材的最佳时期是何时?

答:旺盛生长期是取材的最佳时期,在该期最容易产生愈伤组织,而且诱导率也较高.

(胚乳发展进程大致分为早期,旺盛生长期和成熟期)

8.试述离体授粉的操作步骤?

答: a 采集花粉:开花前一天或当天取花蕾或花药，表面消毒后，无菌收集花粉

b 剥离子房或胚珠:开花前1~3天对用做母本的花蕾去雄并套袋。七花当天或第二天采集花蕾、表面消母，无菌下去掉柱头和花柱，肃取胚珠或子房 c 授粉

9.离体受精有何意义?

答:离体授粉与离体受精的意义: 1、克服远缘杂交不亲合性 2、克服自交不亲和性 3、诱导孤雌生殖

4、双受精及胚胎早期发育机理的研究

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10.离体授粉与离体受精有何区别?

答:离体授粉是指在无菌条件下培养离体的未受精子房或胚珠和花粉，使花粉萌发产生的花粉管进入胚珠完成受精而结实的过程。由于从花粉萌发、到精卵细胞融合形成种子，直至种子萌发产生幼苗都是在试管内完成的，所以也称其为试管受精。

离体受精是指离体及人工控制的环境下，精卵细胞融合形成合子的过程。它包括配子的分离、雌雄配子融合和合子培养三个阶段。 第9章课后习题答案

1、什么是植物体细胞无性系变异？引起或影响植物体细胞无性系变异的因素有哪些？ 植物细胞、组织、器官在无菌条件下进行离体人工培养，经过脱分化和再分化过程，重新形成愈伤组织和完整植株时所产生的变异 称为植物体细胞无性系变异

因素：（1）自发突变，与培养物的遗传背景、外植体类型及培养类型有关，同时也受培养时间、培养及成分等因素的影响

（2）人工诱变，包括物理诱变和化学诱变。物理诱变就是利用X射线、γ射线、β射线、中子、激光、电子束、离子束、紫外线等物理因素辐射诱发变异。化学诱变是利用化学试剂诱发的变异。诱变剂包括碱基类似物，烷化剂，DNA分子结构插入物三大类。

2、试述植物体细胞无性系变异的遗传学基础？ 体细胞无性系变异的遗传基础：

（1）染色体组型变异，如出现多倍体和非整倍体。

（2）染色体结构变异，由染色体重排造成的基因丢失，或“关闭”一个能使其相应隐性基因产生表现型效应的显性等位基因等。 （3）基因突变

（4）DNA总量变异和DNA重复序列拷贝数的变异 （5）基因丢失 （6）DNA碱基修饰

（7）转座子的激活，由转座引起突变。 （8）基因重排

3、何谓生理适应性变异和后生遗传变异？

答：生理适应性变异是指由于某种外界条件存在而引起的性状变异，这种变异会随着特定外界因素的消失而消失。

后生遗传变异是指在基因的DNA序列没有发生改变的情况下，基因功能发生了可遗传的变化，并最终导致了表型的变化，即指在细胞的发育和分化过程中，由于基因表达调控发生变化而引起的表型变异，并不涉及基因结构的变化。 4、植物体细胞无性系突变体筛选的方法有哪些？ 答：（一）从再生植株中直接帅选有用突变株

（二）对离体培养物的帅选1.直接帅选法（1）正选择法(2)负选择法

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2.间接帅选法 （三）绿岛法

5、植物体细胞无性系突变体筛选的一般程序和原则是什么？

答：体细胞无性系突变体筛选的程序：材料选择、预处理、预培养、诱发突变、突变细胞的筛选、细胞增殖与器官建成、突变细胞的遗传分析和鉴定。突变体筛选的一般原则：多种检测手段相结合，初筛与复筛相结合、离体筛选与常规育种相结合。

6、植物体细胞无性系突变体筛选有哪些应用价值？

答：1.在农业上的应用。在农业领域，体细胞突变体筛选主要集中在直接筛选与高产相关的农艺性状（如株型、干粒重、穗长、株型）、特定的农艺性状（如高蛋白、优质蛋白）和抗性品种（如抗病、抗旱、抗盐、抗除草剂等以及筛选间接的常规育种材料（如远缘杂种体细胞易位体系）等方面。2.在植物细胞大规模培养生产次生代谢物中的应用。植物细胞大规模培养是植物生产次生代谢物如药用成分、香料成分、花青苷或黄酮等色素的一条重要途径。 第十章

14. 试述常温限制生长保存的概念及常用的方法

常温限制生长保存的概念就是使培养物处于无生长或缓慢生长状态下抑制植物的生长，限制植物的生长，是转移继代的间隔时间延长。

常用方法有：高渗保存法、生长抑制剂保存法、低压保存法、饥饿法、干燥保存法、 15. 简述低温保存的方法及其原理

低温保存的方法就是正确的选择适宜低温。

原理：植物要生长必须有适宜的温度，温度降低以后，植物的生长速度就会受到抑制而减慢，老化程度缓慢，因而延长了继代的时间间隔而达到保存种质的目的。 16. 试述超低温保存的基本原理，常用的超低温保存方法有哪些？

超低温保存的基本原理：在超低温（液氮）保存过程中，植物细胞内自由水被固化或企划，仅剩下不能被利用的束缚水，酶促反应停止，几乎所有的细胞代谢活动。生长都停止了，当解冻后，又能够恢复再生能力。

超低温保存的方法有：传统的降温冷冻方法、玻璃化保存法、包埋脱水超低温保存、包埋玻璃化法超低温保存。其中，降温冷冻方法包含了快速冷冻法、慢速冷冻法、两步冷冻法、逐级冷冻法。

4、冷冻防护剂的主要种类有哪些？它们的生理作用如何？ 答：冷冻防护剂有渗透型和非渗透型。

渗透型生理作用：渗透型冷冻保护剂多属低分子中性物质，在溶液中易结合水分子，发生水合作用，使溶液的粘性增加，从而弱化了水的结晶过程，打到保护的目的。

非渗透型生理作用：非渗透型冷冻保护剂能溶于水，但不能进入细胞，它使溶液呈过冷状态，可在特定温度下降低溶质浓度，从而起到保护作用。

5、简述超低温冷冻保存种质资源的基本程序。

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